重慶地區(qū)健康成人血清鐵蛋白參考區(qū)間的建立

李德濤 侯玉磊

血清鐵蛋白是機(jī)體內(nèi)一種貯存鐵的可溶組織蛋白,作為鐵的貯存形式,其在血清中的濃度與體內(nèi)貯存的鐵呈正比,可用于監(jiān)測(cè)體內(nèi)鐵代謝［1］。血清鐵蛋白在急性髓性白血病中會(huì)上升,隨著病情的好轉(zhuǎn)而降低［2］。妊娠期糖尿病患者一般血清鐵蛋白會(huì)升高［3］。有分析表明血清鐵蛋白水平同糖尿病患者急性冠狀動(dòng)脈綜合征的冠脈病變程度相關(guān)［4］,另外,鐵蛋白在乳腺癌、食管癌和肺癌等腫瘤疾病中出現(xiàn)不同程度的升高,且與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè),可大大提高腫瘤的檢出率,可以作為腫瘤療效的評(píng)估指標(biāo)［5-7］。目前,國(guó)內(nèi)臨床將血清鐵蛋白用于預(yù)測(cè)機(jī)體內(nèi)鐵含量和惡性腫瘤的實(shí)驗(yàn)室診斷,但大部分實(shí)驗(yàn)室的血清鐵蛋白仍采用試劑說明書提供的參考區(qū)間,隨著生活水平的改善,健康成人血清鐵蛋白的濃度亦有可能會(huì)發(fā)生改變,經(jīng)調(diào)查本院2016 年下半年2843 例健康體檢者血清鐵蛋白濃度在參考區(qū)間以外的比例為22%,因此,若醫(yī)生將血清鐵蛋白應(yīng)用于腫瘤的診斷中容易誤診,進(jìn)而造成患者恐慌。因此,作者希望通過研究重慶地區(qū)健康人群血清鐵蛋白水平,期望建立基于羅氏Cobas e602 檢測(cè)系統(tǒng)的適合本地區(qū)、本人群的血清鐵蛋白參考區(qū)間。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2017 年1～12 月來(lái)自重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院健康體檢中心的成年健康體檢者2000 例：按照性別分為男性和女性,各1000 例。男性患者年齡22～85 歲,平均年齡45 歲。女性患者年齡19～78 歲,平均年齡42 歲。男性和女性患者的一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。患者再根據(jù)年齡分為18～30 歲、31～40 歲、41～50 歲、51～60 歲、≥61 歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①1 個(gè)月內(nèi)無(wú)急性病感染史；②B 超提示無(wú)肝硬化、脂肪肝及其他肝??；③無(wú)炎癥、感染、腎臟和肺部疾??；④半年內(nèi)無(wú)手術(shù)史和輸血史；⑤女性不在妊娠期或哺乳期；⑥調(diào)查前1 個(gè)月內(nèi)無(wú)獻(xiàn)血；⑦無(wú)腫瘤疾病史。

1.2 研究方法

1.2.1 樣本采集 嚴(yán)格按照科室靜脈采血操作規(guī)程采集空腹靜脈血2 ml,室溫放置5 min,待血液凝固后,3500 r/min,離心10 min,排除黃疸、溶血、脂血標(biāo)本,分離血清后待檢,8 h 內(nèi)完成檢測(cè)。

1.2.2 儀器與試劑 德國(guó)羅氏Cobas e602 全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀,鐵蛋白檢測(cè)試劑盒(批號(hào)：307544)、校準(zhǔn)品(批號(hào)：330886)及質(zhì)控品(批號(hào)：237198)均由羅氏公司提供。

1.2.3 質(zhì)量控制 按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程在實(shí)驗(yàn)前分別檢測(cè)羅氏配套低水平和高水平質(zhì)控,確定質(zhì)控在控的前提下進(jìn)行樣本測(cè)定,本年度Cobas e602 全自動(dòng)電化學(xué)分析儀鐵蛋白性能評(píng)價(jià)的批間平均變異系數(shù)分別為2.5%和2.8%,不精密度可接受。同時(shí)查閱2017 年衛(wèi)生部門臨檢中心鐵蛋白室間質(zhì)評(píng),成績(jī)滿意,正確度得到保障。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS13.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。按照CLSI C28-A3［8］文件判斷離群值并剔除,偏態(tài)分布資料參考區(qū)間采用百分位數(shù)法表示,以非參數(shù)排序取P2.5～P97.5作為參考區(qū)間,組間比較采用秩和檢驗(yàn)。P＜0.01 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 男女兩組鐵蛋白水平比較 對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行離群分析,采用Dixon 法剔除離群值,998 例健康成年男性和998 例健康成年女性清鐵蛋白測(cè)定結(jié)果納入下一步統(tǒng)計(jì)分析。對(duì)所有數(shù)據(jù)按性別進(jìn)行分組統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)：健康成年男性和健康成年女性血清鐵蛋白測(cè)定結(jié)果均為偏態(tài)分布,應(yīng)當(dāng)采用百分位數(shù)法進(jìn)行進(jìn)一步分析(圖1,圖2)。經(jīng)秩和檢驗(yàn)分析,健康成年男性血清鐵蛋白濃度明顯高于健康成年女性,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義［334.50(225.40,488.70)ng/ml VS 79.17(39.88,133.10)ng/ml,P＜0.01］。見圖3。

圖1 998 例健康男性血清鐵蛋白濃度(ng/ml)

圖2 998 例健康女性血清鐵蛋白濃度(ng/ml)

圖3 不同性別血清鐵蛋白濃度(ng/ml)

2.2 不同性別健康成年各年齡段血清鐵蛋白濃度比較 將同性別血清鐵蛋白濃度按年齡分段并同上一年齡段進(jìn)行比較,≥61 歲健康成年男性的血清鐵蛋白濃度低于51～60 歲男性,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。51～60 歲健康成年女性的血清鐵蛋白濃度高于41～50 歲女性,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。見圖4。女性各年齡段的血清鐵蛋白濃度均明顯低于男性,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。見表1。

表1 不同性別健康成年各年齡段血清鐵蛋白濃度比較［M(P25,P75),ng/ml］

圖4 不同性別及年齡段血清鐵蛋白濃度(ng/ml)

2.3 建立重慶地區(qū)男女血清鐵蛋白參考區(qū)間 重慶地區(qū)健康成年不同性別的血清鐵蛋白濃度有差異,相同性別不同年齡段的血清鐵蛋白濃度也有差異,所以重慶地區(qū)健康成年參考區(qū)間應(yīng)針對(duì)不同性別和年齡段來(lái)進(jìn)行設(shè)置。將無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的年齡段進(jìn)行合并,得出血清鐵蛋白不同性別及年齡段參考區(qū)間：男性：18～60 歲 為88.93～1139.35 ng/ml,≥61 歲 為34.10～854.42 ng/ml；女性：18～50 歲為6.17～260.73 ng/ml,≥51 歲為30.59～500.45 ng/ml。見表2。

2.4 重慶地區(qū)血清鐵蛋白參考區(qū)間與其他地區(qū)血清鐵蛋白參考區(qū)間比較 統(tǒng)計(jì)文獻(xiàn)可知,血清鐵蛋白在不同地區(qū),不論檢測(cè)方法是否相同,其參考區(qū)間并不一致。見表2。

表2 不同區(qū)域的血清鐵蛋白參考區(qū)間

2.5 參考區(qū)間驗(yàn)證 選取2018 年1 月～2019 年3 月在健康體檢中心體檢的體檢人員進(jìn)行參考區(qū)間驗(yàn)證,按照CLSIC28-A3 文件剔除離群值。根據(jù)CLSIC28-A3文件,制定判斷標(biāo)準(zhǔn)為：男性和女性血清鐵蛋白濃度在參考區(qū)間以外的人數(shù)占總?cè)藬?shù)的10%以下,認(rèn)為則驗(yàn)證通過。經(jīng)驗(yàn)證,本次血清鐵蛋白參考區(qū)間通過驗(yàn)證。見表3。

表3 2018 年1 月～2019 年3 月健康體檢血清鐵蛋白參考區(qū)間驗(yàn)證

3 討論

鐵蛋白作為人體細(xì)胞內(nèi)最重要的儲(chǔ)鐵蛋白,主要功能是儲(chǔ)存并調(diào)節(jié)血清鐵水平。同時(shí)作為一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白,其能夠調(diào)節(jié)造血和免疫系統(tǒng)［12］,血清鐵蛋白的降低常與缺鐵性貧血相關(guān),由此可見,血清鐵蛋白的異常升高或降低都有臨床意義。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,人們的生活方式和飲食結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變,體內(nèi)血清鐵貯存量也有明顯的改變。有研究發(fā)現(xiàn)很多因素影響血清鐵蛋白參考區(qū)間的建立,主要包括研究人群(性別、生活習(xí)慣和水平等)和檢測(cè)方法兩個(gè)方面,另外有研究證實(shí),年齡、運(yùn)動(dòng)、飲酒等因素均會(huì)影響血清鐵蛋白濃度［13,14］。

本次研究顯示,女性各年齡段的血清鐵蛋白濃度均明顯低于男性,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,這可能與女性飲食較少,且月經(jīng)失血有關(guān)［15］。男性血清鐵蛋白在成年后逐漸增加,在30～60 歲相對(duì)穩(wěn)定,在60 歲后開始下降,這可能與老年人飲食結(jié)構(gòu)改變和鐵吸收能力有關(guān)。女性50 歲以后血清鐵蛋白濃度明顯升高,這可能與女性絕經(jīng)相關(guān)。這提示,血清鐵蛋白參考區(qū)間建立應(yīng)該根據(jù)性別進(jìn)行劃分,并且按年齡段進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

參考區(qū)間又稱正常值范圍,是醫(yī)生判斷患者健康與否的重要標(biāo)準(zhǔn)之一,這就要求臨床實(shí)驗(yàn)室提供正確適用的參考區(qū)間,否則會(huì)導(dǎo)致誤診、引起患者的恐慌,甚至錯(cuò)誤的診療。因此建立適合本地區(qū)人群的血清鐵蛋白參考區(qū)間,以給臨床醫(yī)生提供正確可靠的診斷提示就顯得至關(guān)重要。本次建立重慶地區(qū)血清鐵蛋白參考區(qū)間時(shí)發(fā)現(xiàn)應(yīng)當(dāng)按性別和年齡段進(jìn)行劃分,同其他地區(qū)采用相同檢測(cè)方法或不同檢測(cè)方法的參考區(qū)間也不一致［9-11］,基于電化學(xué)檢測(cè)方法的血清鐵蛋白參考區(qū)間上限高于基于免疫比濁和化學(xué)發(fā)光方法的血清鐵蛋白參考區(qū)間,這可能與血清鐵蛋白的檢測(cè)方法有關(guān),但需要進(jìn)一步研究；其次可能與不同地區(qū)的人群的生活方式以及飲食結(jié)構(gòu)不同有關(guān)。本研究也僅是基于羅氏電化學(xué)方法的檢測(cè),且＞60 歲健康成年男性較少。鑒于血清鐵蛋白在腫瘤疾病診斷的重要性,本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)不同檢測(cè)方法的血清鐵蛋白參考范圍不一致,對(duì)于同一標(biāo)本,應(yīng)用不同檢測(cè)方法可能會(huì)出現(xiàn)不一致的結(jié)果,這就需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)方法建立相應(yīng)人群的參考范圍,對(duì)于重慶地區(qū)不同檢測(cè)方法間的血清鐵蛋白比對(duì)需要在下一步的工作中進(jìn)行調(diào)查研究。

綜上所述,本研究建立了重慶地區(qū)以羅氏電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定的血清鐵蛋白參考區(qū)間,初步為臨床提供了適用于重慶地區(qū)基于電化學(xué)檢測(cè)方法的血清鐵蛋白參考區(qū)間。