未治療的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者臨床特征與免疫狀態(tài)及淋巴細(xì)胞亞群特點(diǎn)分析

張昊 李寧寧 戴冰冰

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是自身免疫系統(tǒng)代表性疾病,是一種好發(fā)于青年女性的多種免疫機(jī)制參與的慢性全身性自身免疫性血管炎,其發(fā)病機(jī)制不明,目前公認(rèn)的機(jī)制主要為免疫功能以及數(shù)量異常［1,2］。臨床上評(píng)估患者免疫狀態(tài)主要應(yīng)用淋巴細(xì)胞亞群分析,T 細(xì)胞表面標(biāo)記物的檢測(cè)用于T 細(xì)胞計(jì)數(shù)、T 細(xì)胞亞群分類和T 細(xì)胞活化程度的測(cè)定,是反映機(jī)體細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo)。當(dāng)不同淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量和功能異常時(shí),機(jī)體可導(dǎo)致免疫功能紊亂。流式細(xì)胞術(shù)是檢測(cè)分化抗原(CD 抗原)最快速、準(zhǔn)確、可靠的方法。通過(guò)檢測(cè)腫瘤患者T 淋巴細(xì)胞亞群的異常變化,了解機(jī)體免疫動(dòng)力學(xué),對(duì)判斷患者的病情尤為重要。SLE 作為自身免疫系統(tǒng)疾病的代表疾病,針對(duì)其基礎(chǔ)自身免疫狀態(tài)的研究尤為重要,對(duì)于評(píng)估病情、診斷疾病以及用藥指導(dǎo)均存在意義,本研究通過(guò)檢測(cè)未經(jīng)激素和免疫抑制劑治療的SLE 患者的免疫學(xué)指標(biāo)和外周血淋巴細(xì)胞亞群,探討此類患者的免疫狀態(tài)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018 年 1 月～2020 年11 月于大連醫(yī)科大學(xué)附屬大連市中心醫(yī)院風(fēng)濕免疫科就診的未經(jīng)激素和免疫抑制劑治療的SLE 患者58 例作為SLE患者組,另選取同期本院健康體檢人群52 例作為健康對(duì)照組。SLE 患者組納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者符合美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)(ACR) 1997 年修訂的 SLE 分類診斷標(biāo)準(zhǔn)；②患者均行SLE 疾病活動(dòng)評(píng)分(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)［3,4］；③近半年無(wú)中藥、非甾體抗炎藥、糖皮質(zhì)激素、生物制劑及慢作用抗風(fēng)濕藥治療。SLE 患者組排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他自身免疫系統(tǒng)性疾病；②合并實(shí)體腫瘤及血液系統(tǒng)腫瘤、嚴(yán)重肝腎功能損害、重癥感染、慢性病感染包括結(jié)核病等疾病。SLE 患者組平均年齡(37.1±9.1)歲,其中男6 例,女52 例；健康對(duì)照組平均年齡(35.3±8.9)歲,其中男2 例,女50 例。兩組年齡、性別等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。本研究經(jīng)大連市中心醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn),所有入選者均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 免疫指標(biāo)檢測(cè) 所有研究對(duì)象均于空腹12 h后抽取肘靜脈血4 ml,檢測(cè)患者血清樣本的肝功能、腎功能和免疫學(xué)指標(biāo)以及全血細(xì)胞計(jì)數(shù)進(jìn)行測(cè)定。

1.2.2 T 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè) 所有研究對(duì)象均于清晨空腹采集外周靜脈血2 ml 置于肝素抗凝管中,并于4 h 內(nèi)完成檢測(cè)。取2 只流式專用管,進(jìn)行流式細(xì)胞染色,經(jīng)BDFACSCanto Ⅱ型流式細(xì)胞儀(美國(guó)BectonDickinson 公司)檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SLE 患者臨床資料 58 例SLE 患者中,活動(dòng)期48 例(82.8%),穩(wěn)定期10 例(17.24%)；輕度活動(dòng)期20 例(34.48%),中度活動(dòng)期15 例(25.86%),重度活動(dòng)期13 例(22.41%)。全身癥狀中乏力43 例(74.1%)、發(fā)熱26 例(44.8%)為主要表現(xiàn)。臟器受累中血液系統(tǒng)受累44 例(75.9%)、皮疹及黏膜潰瘍27 例(46.6%)、狼瘡腎炎24 例(41.4%)、肺間質(zhì)改變3 例(5.2%)、心包炎2 例(3.4%)、胃腸道血管炎1 例(1.7%)。

2.2 兩組免疫指標(biāo)和T 淋巴細(xì)胞亞群水平比較 兩組CD3+T、CD8+T 百分比、CD8+T、CD56+NK、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M 比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。SLE 患者組CD3+T、CD4+T 百分比、CD4+T、CD4+/CD8+、免疫球蛋白E、ESR、CRP 水平均高于健康對(duì)照組,CD56+NK 百分比、免疫球蛋白G 水平低于健康對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組免疫指標(biāo)和T 淋巴細(xì)胞亞群水平比較()

表1 兩組免疫指標(biāo)和T 淋巴細(xì)胞亞群水平比較()

注：與健康對(duì)照組比較,aP＜0.05

2.3 SLE 患者組不同疾病活動(dòng)度T 淋巴細(xì)胞亞群計(jì)數(shù)比較 重度活動(dòng)期患者CD3+T、CD4+T 計(jì)數(shù)高于穩(wěn)定期患者,中度活動(dòng)期患者CD3+T 高于穩(wěn)定期患者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表2 SLE 患者組不同疾病活動(dòng)度T 淋巴細(xì)胞亞群計(jì)數(shù)比較()

表2 SLE 患者組不同疾病活動(dòng)度T 淋巴細(xì)胞亞群計(jì)數(shù)比較()

注：與穩(wěn)定期比較,aP＜0.05

3 討論

正常機(jī)體的免疫是通過(guò)免疫細(xì)胞相互作用,維持免疫系統(tǒng)的平衡穩(wěn)態(tài)。其中最主要的免疫細(xì)胞為淋巴細(xì)胞,淋巴細(xì)胞的種類以及數(shù)量、功能的異?？蓪?dǎo)致免疫系統(tǒng)紊亂,繼而出現(xiàn)一系列病理變化。作為典型自身免疫性疾病的一種,T 淋巴細(xì)胞功能失調(diào)在SLE的發(fā)生、發(fā)展中扮演重要角色［5］,SLE 患者異常免疫主要表現(xiàn)為B 細(xì)胞的活化、增殖,B 細(xì)胞的功能異常受到T 細(xì)胞亞群和多種細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)。其中可表現(xiàn)為輔助性CD4+T 細(xì)胞和抑制性CD8+T 淋巴細(xì)胞比例異常在T 淋巴細(xì)胞異常激活狀態(tài)下,促使SLE 患者機(jī)體B 淋巴細(xì)胞異常活化和增殖,繼而產(chǎn)生大量的自身抗體和炎性介質(zhì),進(jìn)一步損傷多個(gè)靶器官［6,7］。多種研究表明,包括SLE 在內(nèi)的多種自身免疫系統(tǒng)疾病中,T 淋巴細(xì)胞亞群平衡是保證機(jī)體正常免疫功能的必要條件。T 淋巴細(xì)胞亞群主要包括CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞絕對(duì)值、CD4+/CD8+比值等共同維持T 淋巴細(xì)胞功能及數(shù)量的平衡,若上述T 淋巴細(xì)胞亞群發(fā)生改變,可加劇機(jī)體免疫紊亂狀態(tài)。這種失衡狀態(tài)繼而誘導(dǎo)B 淋巴細(xì)胞增生,促使體液免疫功能亢進(jìn),因此,針對(duì)T 細(xì)胞亞群在SLE 發(fā)病及致病機(jī)制中的研究,已成為SLE 的研究重點(diǎn)［8］。本研究發(fā)現(xiàn),未經(jīng)藥物治療的SLE 患者外周血總CD3+T 百分比高于健康對(duì)照組,同時(shí)輔助性CD4+T 百分比升高,T 細(xì)胞處于激活狀態(tài),CD4+/CD8+淋巴細(xì)胞比值升高,這與國(guó)外學(xué)者研究相同,充分說(shuō)明CD4+T 和CD8+T 淋巴細(xì)胞在未經(jīng)藥物治療的SLE 的發(fā)病機(jī)制中存在至關(guān)重要作用［9］。CD4+T 淋巴細(xì)胞可輔助誘導(dǎo)細(xì)胞免疫和體液免疫,同時(shí)可釋放γ-干擾素來(lái)導(dǎo)致炎癥的形成,所以CD4+T 淋巴細(xì)胞可以反映自身免疫疾病機(jī)體的免疫狀態(tài)［10］。T 淋巴細(xì)胞亞群另一個(gè)重要組成部分為CD8+T 淋巴細(xì)胞,CD8+T 淋巴細(xì)胞可促進(jìn)免疫抑制因子釋放,是一種免疫抑制細(xì)胞,具有免疫抑制作用。T 淋巴細(xì)胞亞群數(shù)目的不同可反應(yīng)免疫功能異常,而比值異常即可反映機(jī)體免疫的穩(wěn)態(tài),其中CD4+/CD8+淋巴細(xì)胞比值反映機(jī)體的T 淋巴細(xì)胞免疫是否存在紊亂。本研究發(fā)現(xiàn)表明未經(jīng)激素和免疫抑制劑治療的SLE 患者外周血 CD4+/CD8+淋巴細(xì)胞比值升高,可得出未經(jīng)激素和免疫抑制劑治療的SLE 患者T 淋巴細(xì)胞處于激活狀態(tài)。SLE患者臟器損害主要來(lái)源于多種自身抗體,可見不只是T 淋巴細(xì)胞在SLE 的發(fā)病機(jī)制中起著重要作用,B 淋巴細(xì)胞及NK 細(xì)胞也發(fā)揮著重要作用；但是,本研究發(fā)現(xiàn)SLE 患者組CD56+NK 百分比低于健康對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。具體機(jī)制還需進(jìn)一步研究；本研究發(fā)現(xiàn)未治療的SLE 患者,處于疾病活動(dòng)期的患者較多,隨著疾病活動(dòng)度的增加,炎性指標(biāo)升高,SLE 患者外周血CD4+T 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)逐漸增高,與先前的研究結(jié)果一致,但此次研究中,處于穩(wěn)定期患者數(shù)目少,可能存在一定偏倚。

綜上所述,外周血T 淋巴細(xì)胞亞群的異常在SLE的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用,與SLE 疾病活動(dòng)度密切相關(guān),更加確定SLE 是由免疫介導(dǎo)的多因素參與并相互作用的復(fù)雜疾病。