松葉的藥理作用、臨床應用及用藥規(guī)律研究進展

岳鈺茗 ,單 淇 ,楊 冰 ,王澤凡 ,周鈺通 ,付 慶 ,徐 旭*,周福軍*

1.天津中醫(yī)藥大學,天津 300193;2.釋藥技術(shù)與藥代動力學國家重點實驗室,天津 300301;3.天津市中藥質(zhì)量標志物重點實驗室,天津 300301;4.天津藥物研究院,天津 300301

松葉別名豬鬃松葉、松毛、山松須及松針[1],為松科植物馬尾松(PinusmassonianaLamb.)、黑松(PinusthunbergiiParl.)、油松(PinustabulaeformisCarr.)、云南松(PinusyunnanensisFranch.)以及紅松(PinuskoraiensisSiedetZucc.)等的針狀葉?！侗静菥V目(金陵本)》[2]記載“松葉,又名松毛,性味苦溫,無毒”。朝(東)醫(yī)的經(jīng)典醫(yī)藥典籍《東醫(yī)寶鑒》[3]記載“松為仙人之食物,能夠延年益壽”?！睹缱遽t(yī)藥學》[4]記載“馬尾松的葉為馬尾松,分布于黔南各地,性溫、味甜、苦,可用于止血、治療精衰弱(畢節(jié))和栓性脈管炎(松桃)”。

本文通過查閱文獻典籍,總結(jié)分析了松葉的藥理作用及其相關作用機制,展示了松葉在臨床方藥中的應用,并通過古今醫(yī)案云平臺對松葉的用藥規(guī)律進行了探討,旨在為松葉的進一步研究提供理論基礎和科學依據(jù)。

松葉屬于祛濕藥[5-6],歸心、肝經(jīng),具有祛風燥濕、殺蟲止癢、活血安神之功效,臨床上用于治療慢性腎炎、高血壓、高脂血癥、神經(jīng)衰弱以及鉤蟲病等腸道寄生蟲病;外用治療因風濕所致的關節(jié)疼痛、肢體麻木、跌打損傷、疥瘡和凍瘡;還可預防乙腦、流感等?，F(xiàn)代研究[7-8]表明,松葉中含有豐富的化學成分,如黃酮、莽草酸、多糖、揮發(fā)油和木脂素等,具有鎮(zhèn)痛抗炎、降血脂、降血壓、抗氧化、抗腫瘤、抗菌及控制肥胖等藥理作用。因松葉中含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì),如蛋白質(zhì)、纖維素、礦物質(zhì)及維生素等,常被用作牲畜的飼料和保健食品[9]。

1 藥理作用

1.1 鎮(zhèn)痛抗炎

炎癥是機體對各種致炎因素的局部損傷作出反應的主要病理性自衛(wèi)機制之一。導致炎癥的炎癥介質(zhì)[10]主要有白細胞介素-1β(IL-1β)、白細胞介素-6(IL-6)、一氧化氮(NO)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等。KWON J H 等[11]通過四唑鹽(MTT)細胞實驗發(fā)現(xiàn),松葉中的提取物槲皮素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和5,7,8,4′-四羥基-3-甲氧基-6-甲基黃酮8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷能有效抑制脂多糖(LPS)誘導RAW 264.7巨噬細胞釋放NO(抑制NO 50%生成的質(zhì)量濃度為26.8、27.1 μg·mL-1)和前列腺素E2(PGE2)(抑制PGE250%生成的質(zhì)量濃度為56.2、24.8 μg·mL-1)。CHIU H F 等[12]研究發(fā)現(xiàn),發(fā)酵松針乙酸乙酯提取物(EAE-FPN)能夠顯著提高LPS誘導的RAW 264.7巨噬細胞的抗氧化活性和自由基清除活性,此外,呈劑量依賴性地抑制活性氧(ROS)、NO、PGE2、TNF-α、IL-1β、IL-6以及誘導型一氧化氮合酶(iNOS)、環(huán)氧合酶2(COX-2)和核因子-κB(NF-κB)(阻斷活化p65 從細胞質(zhì)進入細胞核)蛋白的表達水平。松葉能通過調(diào)節(jié)NF-κB信號通路,發(fā)揮抗氧化和抗炎作用。RABELO T K 等[13]研究發(fā)現(xiàn),莽草酸(松葉中含量較高的化學成分[14])能通過降低脂多糖(LPS)刺激的巨噬細胞內(nèi)TNF-α和PGE2的表達水平,進而減輕炎癥反應的強度。林潔等[15]采用扭體實驗和溫浴實驗,研究莽草酸對小鼠的抗炎鎮(zhèn)痛作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn),莽草酸組的鎮(zhèn)痛作用顯著高于生理鹽水組(P＜0.05),而與阿莫西林組比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05),表明莽草酸可以提高小鼠的疼痛閾值,延長小鼠的痛閾潛伏期,從而發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用。但是目前對松葉的具體鎮(zhèn)痛機制尚未明確。

1.2 降血脂、降血壓

黃靜等[16]將高脂模型的清潔級近交系雄性Wistar大鼠隨機分為3組,分別灌胃高脂飲食、高脂飲食+松針提取物100 mg·kg-1·d-1、高脂飲食+松針提取物300 mg·kg-1·d-1,共8周,檢測血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)以及低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平。結(jié)果顯示,含松針提取物的高脂飲食組中大鼠體內(nèi)TC、TG及LDL-C的含量顯著低于高脂飲食組,而HDL-C 顯著高于高脂飲食組。表明松針能夠有效調(diào)節(jié)高血脂大鼠的血脂代謝,加強血脂在血管中的流動性,進而防止其在內(nèi)壁沉積,穩(wěn)定血壓,發(fā)揮降血脂的作用。洪靜純[17]將200例單純性高脂血癥患者分為2組,對照組服用阿托伐他汀鈣片,觀察組服用質(zhì)量濃度為5 g·mL-1的鮮松針液,分別在治療后4、8、12周檢測TC、TG、HDL-C和LDL-C水平,結(jié)果表明,以上各水平均顯著優(yōu)于治療前(P＜0.05)。但是松葉降血脂的具體作用機制并未明確。

研究表明,松葉提取物的主要成分是原花青素(以不同數(shù)量的兒茶素和表兒茶素為單元縮合而成的多酚類聚合物[18]),它通過刺激一氧化氮-環(huán)鳥苷酸(cGMP)信號釋放,減少細胞內(nèi)游離的鈣離子(Ca2+)濃度,增加血管彈性,降低總外周阻力,從而發(fā)揮降低血壓的功效[19]。楊澤填等[20]取10只SPF級SD 大鼠作為假手術(shù)組(9 g·L-1NaCl溶液),建立腎性高血壓模型的50只SPF級SD 大鼠隨機分為模型組(9 g·L-1NaCl溶液)、陽性藥組(1 kg·L-1的卡托普利懸濁液)以及松針提取液高、中、低劑量組(50、30、20 kg·L-1),連續(xù)灌胃4周后采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附(ABC-ELISA)法檢測NO 和血管內(nèi)皮素(ET)水平,并監(jiān)測大鼠舒張壓(DBP)和收縮壓(SBP),結(jié)果發(fā)現(xiàn),松針各提取液給藥組大鼠體內(nèi)的DBP(P＜0.05)、SBP(P＞0.05)和ET(P＜0.05)的含量均低于模型組,而NO 的含量高于模型組(P＞0.05)。松針各提取液給藥組DBP、SBP、ET 和NO 與陽性藥組比較差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。結(jié)果表明,松葉具有降血壓的作用,并推測其發(fā)揮作用的機制可能是通過調(diào)節(jié)ET 和NO 間的平衡狀態(tài),減少回心血量發(fā)揮作用。研究[21]表明,松葉制劑松齡血脈康膠囊(松葉為君藥[22])也可以降低高血脂、高血壓。趙英強等[23]采用24只SHR 大鼠,隨機分為3組(空白組、松齡血脈康膠囊組和雷米普利組),灌胃給藥(空白組:等體積生理鹽水;松齡血脈康膠囊組:20 mg·kg-1松齡血脈康;雷米普利組:1 mg·kg-1雷米普利)4周后,測定大鼠肝臟中的過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ,參與血壓的調(diào)節(jié))、血管緊張素Ⅱ1型受體(AT1R)的mRNA 表達量和蛋白含量,結(jié)果發(fā)現(xiàn),松齡血脈康膠囊能夠通過增加PPARγ信號因子上調(diào)其mRNA 的表達,下調(diào)AT1R mRNA 的表達,從而增加合成的PPARγ蛋白質(zhì)量和減少所合成的AT1R 蛋白質(zhì)量,增強血管的彈性能力,發(fā)揮降血壓的作用。另有研究[24]表明,腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng) (RAAS) 在調(diào)節(jié)血壓中也發(fā)揮著重要作用,李杰等[25]在對肝陽上亢型高血壓的大鼠實驗研究中證實了松齡血脈康膠囊能有效干預RAAS 的關鍵環(huán)節(jié),可以對血壓進行有效的調(diào)控。

1.3 抗氧化

細胞中的電子被奪會對人體造成損傷,因自由基含有游離的電子,所以狀態(tài)極不穩(wěn)定,進入人體后,會從相鄰近的細胞分子(包括脂肪、蛋白質(zhì)和DNA)中奪取電子而穩(wěn)定自身,致使人體的細胞結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變。人體內(nèi)常見的自由基均為氧氣在參與人體能量代謝時所產(chǎn)生的,有超氧陰離子、羥基自由基及烷氧自由基等,統(tǒng)稱為活性氧(ROS)[26-27]。凡是能夠抑制或阻止自由基奪走人體正常細胞中電子的物質(zhì)均為抗氧化物,其可以直接對自由基產(chǎn)生作用,也可以通過間接反應來消耗易產(chǎn)生自由基的物質(zhì),降低其奪電子的能力。人體在產(chǎn)生自由基的同時也產(chǎn)生著可以消除自由基的物質(zhì),這些物質(zhì)可降低自由基對人體細胞的破壞能力,維持機體的健康生長。多項研究[28-30]表明,松針中的黃酮類化合物因其強還原性而具有抗氧化能力。付文鵬等[29]通過硫代巴比妥酸法觀察不同濃度云南松松針的黃酮溶液對SD 昆明大鼠的肝勻漿MDA(脂質(zhì)過氧化終產(chǎn)物)的抑制效果,得出其質(zhì)量濃度在0.1～5.0 mg·mL-1范圍時,對MDA 的抑制率為66.36%～74.33%,呈良好的量效關系。此外,張霞[31]研究發(fā)現(xiàn),松針中黃酮類化合物的抗氧化作用機制為通過刺激抗氧化酶,有效抑制自由基的生成,從而降低脂質(zhì)過氧化。閆琳娜[32]通過酶解修飾實驗發(fā)現(xiàn),經(jīng)過β-葡萄糖苷酶的酶解修飾可以增加松葉中黃酮的抗氧化能力。

1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)是一種穩(wěn)定的自由基,當它接受抗氧化劑分子的電子時會由紫色變?yōu)辄S色或無色。亞硝酸鹽自由基能與人體內(nèi)的胺結(jié)合為亞硝胺,對人體產(chǎn)生危害,而亞硝酸鹽清除物質(zhì)如抗壞血酸、α-生育酚、硫氧化物、美拉德反應物和多酚可以抑制亞硝胺的產(chǎn)生。PARK J S等[33]采用DPPH 自由基清除法和亞硝酸鹽清除法對松葉揮發(fā)油抗氧化活性進行了評價,結(jié)果表明,抗氧化活性可歸因于松葉中的單萜烯碳氫化合物、含氧單萜烯或倍半萜的存在,如α-蒎烯、β-蒎烯等。李曉嬌等[34]采用DPPH 法考察云南松針精油的抗氧化活性,結(jié)果發(fā)現(xiàn),松針精油質(zhì)量濃度在3.19～102.20 mg·mL-1范圍時,DPPH 的清除率隨質(zhì)量濃度的增加而增大,呈良好的量效關系,且其半數(shù)抑制率(IC50)值為47.294 mg·mL-1。KOUTSAVITI A 等[35]在評估松針精油中酚類化合物的作用時,結(jié)果顯示,兒茶素具有顯著的抗氧化活性。另有研究表明[36],松針和嫩枝精油的抗氧化作用是由揮發(fā)油中的α-蒎烯和月桂烯引起的。綜上所述,可認為松葉的抗氧化活性可能是由于其單萜和倍半萜的存在,可有效地清除自由基,可以被用作天然的抗氧化劑。

1.4 抗腫瘤

研究表明,松針黃酮類成分可以用來體外抗腫瘤,SHI X等[37]通過MTT 法實驗證明了松針黃酮類提取物質(zhì)量濃度在5～100 μg·mL-1的范圍內(nèi)呈劑量依賴性地抑制肝癌HepG2細胞的增殖,總黃酮在G0/G1期阻滯HepG2細胞增殖,促進HepG2細胞凋亡。雷艷萍[38]通過CCK8法顯示松針總木脂素對人肺癌細胞株A549(IC50:39.82±1.74 μg·mL-1)、人宮頸癌HeLa細胞株(IC50:62.01±1.37 μg·mL-1)、人肝癌細胞株HepG2(IC50:67.67±2.64 μg·mL-1)、人結(jié)腸 癌細胞HT-29(IC50:99.17±1.67 μg·mL-1)及人胃癌細胞株MKN-45(IC50:115.84±2.08 μg·mL-1)5種腫瘤細胞的增殖均有明顯的抑制作用,且抑制作用隨劑量的加大而增強,呈明顯的正相關關系。董朱等[39]通過查閱資料,認為松葉抗腫瘤的機制主要為:(1)抑制腫瘤細胞的增殖,誘導腫瘤細胞的凋亡以及對細胞產(chǎn)生選擇性的毒性和不良反應;(2)抑制脂質(zhì)過氧化保護DNA,抑制相關酶的表達防止細胞突變,增強自身免疫功能提高機體耐受力。

1.5 其他

PARK J S等[33]采用紙片瓊脂擴散法和肉湯微量稀釋法研究紅松和黑松松葉的揮發(fā)油對8株革蘭氏陰性菌和5株革蘭氏陽性菌的抑制效果,結(jié)果表明,2種松葉揮發(fā)油均具有抑菌作用,尤其是對肺炎桿菌、普通變形桿菌和福氏志賀氏菌的抑制作用尤為顯著。其主要因為α-蒎烯是揮發(fā)油的主要成分(23.73%),具有很強的抗菌活性,通過破壞細菌的完整性對微生物產(chǎn)生毒性作用。KIM E A 等[40]研究發(fā)現(xiàn),松葉提取物可以明顯降低肥胖型小鼠的體質(zhì)量和脂肪量且不影響小鼠正常進食,主要是松葉提取物中的多酚類物質(zhì)原花青素作用于下丘腦前阿黑皮素(POMC)神經(jīng)元,參與脂肪組織代謝的調(diào)節(jié),抑制脂肪生成,從而具有控制肥胖的作用。

2 臨床應用

根據(jù)中醫(yī)藥整體觀和辨證論治的治療思路,松葉常以復方的形式入藥,因而現(xiàn)代醫(yī)者常通過辨證將其配伍成方藥應用于鎮(zhèn)痛、抗炎、降血脂、降血壓、祛風濕、治療失眠以及治療血小板減少性紫癜,用以增強松葉的藥效,降低其不良反應。

2.1 鎮(zhèn)痛作用

(1)松針正腦丸[41]:由松毛(鮮品)、紅參、螞蟻、萬年蒿、地龍、大黃與雞血藤制成;具有清熱益氣、活血止痛之效;臨床上用于治療氣血血瘀、熱毒內(nèi)盛所致的頭痛以及緊張性頭痛、偏頭痛、血管神經(jīng)性頭痛、老年癡呆、腦萎縮和腦退化等。

(2)將1.5 kg松葉切細,用適量水煎煮,取3.8 L釀2.8 kg米;另外煮松葉汁以漬米并饋飯,泥釀封頭,七日發(fā)。澄飲之,用于治療腳弱十二風、痹不能行[42]。

(3)取馬尾松葉30 g,加適量水煎煮,過濾去渣,加冰糖30 g調(diào)服,可有效治療腰痛[43]。

(4)松葉浸酒服用,其渣加蛤仔1只,捶爛敷于患處,用于治療跌打腫痛[44]。

(5)桂附膏[45]:鮮側(cè)柏葉5 kg,鮮松毛1.5 kg,生天雄0.5 kg,麻油3 kg,炒黃丹1.8 kg,肉桂0.5 kg。用于治療臀脊腰腹因寒痰、淤血阻滯所導致的疼痛。

2.2 抗炎作用

(1)取適量的鮮馬尾松葉,剪去兩頭,搗爛取汁,每次用溫開水送服50 g,用于治療慢性腎炎[46]。

(2)松葉2.5 kg,甘草60 g,加水50 L 煎煮濃縮至40 L,可用于預防流腦。

(3)松葉、扁柏各90 g(鮮用250 g),洗凈,切碎,加適量水煮沸1 h,過濾,共2次;將2次濾液合并濃縮至200 mL,加糖漿100 mL或蜂蜜60 g,共成300 mL(1 mL含生藥1.5 g)。每日服用3次,每次100 mL,10 d為1個療程,可有效治療慢性氣管炎[47]。

(4)復方松葉提取液[48],商品名為“祛風濕靈”,主要成分為馬尾松葉的提取物,治療炎癥所引起的水腫及纖維結(jié)締組織的形成。

2.3 降血脂、降血壓

(1)松針液:采用生物納米膜分離技術(shù)制備而成的松針提取濃縮液軟膠囊,用于降血壓、降血脂和降血糖;抗癌;抗衰老;治療關節(jié)炎等。

(2)松齡血脈康膠囊[49]:由鮮松葉、葛根、珍珠層粉制成的軟膠囊制劑,具有養(yǎng)血息風、活血化瘀、平肝潛陽及鎮(zhèn)靜安神之功效。(3)松針露:用松針葉蒸餾而成,具有雙項調(diào)節(jié)血壓的作用,可軟化血管,治療糖尿病,降低高血脂。

2.4 祛風濕

(1)松葉4.5 kg,酒70 kg,浸泡三七日,服180 g,用于治療歷節(jié)風[42]。

(2)松葉500 g,搗爛,取汁液,用清酒2 L 浸泡二宿,近火一宿,初服100 mL,漸至400 mL,頭面汗出即止,對中風面目相引口偏僻、牙車急、舌不可轉(zhuǎn)[42]有良好的效果。

(3)松葉(炒黑)30 g,輕粉、樟腦各9 g。濕則干摻,燥則用油調(diào)搽,如癢極者,以米醋調(diào)敷,治療風濕頑癬[50],還可以治療凍瘡。

2.5 治療失眠

(1)鮮松葉50～100 g,水煎服,治失眠、維生素丙缺乏、營養(yǎng)性水腫[47]等。

(2)腦寧糖漿[51]:由鮮松針、大棗、靈芝制成。具有補益氣血、養(yǎng)心安神之效,治療由心神不寧所造成的失眠,焦慮等。

2.6 治療血小板減少性紫癜

健脾涼血止血湯[52]:黨參6 g,白術(shù)6 g,骨碎補6 g,茯苓5 g,炙甘草5 g,法半夏3 g,廣陳皮3 g,松針10 g,北黃芪10 g,黃精10 g,枸杞6 g,桂圓肉10 g,雞內(nèi)金3 g,仙鶴草6 g,鹿角霜8 g,水牛角30 g(先煎),白芍8 g,藕節(jié)5個。

2.7 治療脫發(fā)

(1)復方松針育發(fā)液[53]:以松針、茶葉清熱解表,為君藥;以人參、紅景天與靈芝溫補氣血,滋養(yǎng)肝腎,為臣藥;花椒、生姜活血化淤、疏通經(jīng)絡,為佐藥;肉桂溫補回陽,為使藥。

(2)禤氏生發(fā)湯[54]:生地黃20 g,松針15 g,側(cè)柏葉15 g,蒲公英20 g,丹參(后下)20 g,赤芍15 g,甘草5 g。

2.8 殺蟲

松針精油[55]:將浸提后的松針加入蒸餾釜內(nèi)進行水蒸汽蒸餾,蒸汽經(jīng)過冷凝、油水分離。

3 用藥規(guī)律分析

為了解松葉在配伍方藥中的用藥規(guī)律,通過古今醫(yī)案云平臺建立了經(jīng)驗方藥數(shù)據(jù)庫,通過對數(shù)據(jù)庫中23個醫(yī)案進行統(tǒng)計分析,得出與松葉聯(lián)用的中藥有132個,其中甘草主要用于調(diào)和諸藥,不計算在內(nèi),頻數(shù)≥4的聯(lián)用中藥共有17個,其中聯(lián)用白芍頻數(shù)為8次,茯苓、白術(shù)和地黃為6次,茯神為5次,旱蓮草、女貞子、當歸、桂枝、牡蠣、半夏、桑葉、丹參、菟絲子、薏苡仁、大棗和黃芪均為4 次。頻數(shù)≥6 的聯(lián)用中藥所處醫(yī)案的具體主治及松葉在其中的作用見表1。由表1可知,松葉常用來與其他藥配伍治療各種類型的脫發(fā),其主要通過“以形補形”,輕身益氣,安五臟,生毛發(fā),兼以清熱燥濕、補虛固本?，F(xiàn)代藥理研究表明,松葉含大量低聚原花青素,其具有清除自由基活性、免疫調(diào)節(jié)等功效,還可促進毛發(fā)上皮細胞生長,誘導休止期毛發(fā)再生;松葉祛濕、殺蟲止癢,用于治療癢癥;松葉活血散瘀、止血消斑,用于治療血小板減少性紫癜。

表1 聯(lián)用中藥、處方主治及松葉作用Tab.1 Combined use of traditional Chinese medicine,prescription and indications,and the effect of pine leaf

4 小結(jié)

松葉作為民間常用藥之一,資源豐富,在全年任意時間均可采收,以臘月采收的松葉為最佳。為了對松葉藥材的進一步開發(fā)利用,本文對松葉的現(xiàn)代藥理和臨床應用進行了總結(jié)和歸納,研究表明,松葉具有鎮(zhèn)痛抗炎、抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂以及抗腫瘤等諸多功效,臨床上被開發(fā)成多種制劑類型,包括膠囊劑(松齡血脈康膠囊)、丸劑(松針正腦丸)以及湯劑等,廣泛用于鎮(zhèn)痛、抗炎、降血脂、降血壓、祛風濕、殺蟲以及治療失眠、血小板減少性紫癜和脫發(fā)等疾病。此外,本文還通過對古今醫(yī)案云平臺中的臨床用藥進行分析,為松葉在傳統(tǒng)中醫(yī)理論下的用藥規(guī)律提供了一定的客觀數(shù)據(jù),為充分合理地開發(fā)利用松葉提供了科學依據(jù)。