牛流行熱的診治及防控

文│牛金鵬（山東省諸城市畜牧業(yè)發(fā)展中心）

牛流行熱（BEF）又稱為“三日熱”，發(fā)病后表現(xiàn)為高燒，并在2～3天內(nèi)消退。該病由牛流行熱病毒（BEFV）感染牛引發(fā)，癥狀與牛流行性感冒類似，表現(xiàn)為食欲減退甚至廢絕、口鼻分泌物增多、呼吸急促、跛行以及產(chǎn)奶量明顯下降等多種癥狀。該病感染牛群后多數(shù)病牛預(yù)后良好。但是，由于該病一旦發(fā)生會(huì)造成牛群較高的感染率，往往造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，必須重視該病的診治及防控。

一、病原學(xué)特征

BEFV屬于暫時(shí)熱病毒屬、彈狀病毒科，病毒的基因結(jié)構(gòu)為單股RNA，其直徑較大，接近200納米，基因組長度為14800個(gè)堿基左右。病毒粒子主要有兩種形態(tài)，包括錐形和子彈形，與狂犬病病毒、水皰性口炎病毒類似，外部包裹囊膜。該病毒有數(shù)個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白，包括聚合酶交聯(lián)蛋白、核蛋白、聚合酶相關(guān)蛋白、糖蛋白和基質(zhì)蛋白，其中糖蛋白是抗體的結(jié)合蛋白。因此，通常以G蛋白作為基因工程疫苗的免疫原，G蛋白外表面有數(shù)個(gè)抗原位點(diǎn)，其中G1為特異性抗原位點(diǎn)。

由于存在囊膜結(jié)構(gòu)，該病毒對脂溶劑敏感，包括氯仿、乙醚以及脫氧膽酸鈉等。BEFV對熱的耐受力差，處于56℃環(huán)境條件下10分鐘或在37℃環(huán)境條件下18小時(shí)該病毒即可喪失活性。該病毒對酸堿環(huán)境較為敏感，在酸性低于pH＝2或堿性高于pH＝9環(huán)境條件下，幾十分鐘內(nèi)即可喪失活性。低溫條件下，該病毒可長期存活，并保持感染性。采集病牛血液，經(jīng)抗凝集處理后，在2℃～4℃環(huán)境條件下保存一周其致病能力不降低。在4℃條件下，在小鼠腦組織液懸液中保存一個(gè)月后其致病能力仍不降低，且毒力不受凍融影響。該病毒于-20℃條件下可長期存活，并保持致病能力。

二、流行病學(xué)特征

BEF可發(fā)生于各個(gè)品種的牛，包括奶牛、黃牛、水牛以及牦牛。經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，各類蹄類野生動(dòng)物血液內(nèi)廣泛存在可以中和BEFV的抗體，據(jù)此推斷，野生動(dòng)物可能普遍帶毒。部分地區(qū)，牛群存在BEFV抗體檢測陽性的情況，推測可能存在隱形感染。該病主要是通過非接觸性傳播，傳播媒介主要為節(jié)肢動(dòng)物，包括庫蠓以及蚊類等，因此該病在陰雨季節(jié)比較容易流行。該病存在周期性流行特點(diǎn)，流行周期為數(shù)年至十幾年，同時(shí)該病還具有明顯的季節(jié)性流行特點(diǎn)，好發(fā)于夏秋季節(jié)。該病發(fā)生時(shí)疫區(qū)與非疫區(qū)呈現(xiàn)間隔交叉存在的情形，不連接成片，疫情發(fā)生時(shí)表現(xiàn)為跳躍式傳播，該病的傳播不受一般地理屏障的阻隔。

三、致病機(jī)理、癥狀及病理變化

1.致病機(jī)理。牛機(jī)體抵抗力較弱時(shí)，BEFV侵入牛體內(nèi)并增殖，引起牛發(fā)病。通過檢測牛體內(nèi)病毒滴度發(fā)現(xiàn)，在牛發(fā)熱的第一天，BEFV即可達(dá)到較高的載量，BEFV在白細(xì)胞內(nèi)濃度較高，遠(yuǎn)高于在紅細(xì)胞內(nèi)的濃度。據(jù)推測，這一現(xiàn)象是由于白細(xì)胞吞噬BEFV導(dǎo)致的，BEFV可以激發(fā)淋巴細(xì)胞釋放淋巴因子，進(jìn)而引發(fā)炎癥。該病毒主要在內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)增殖，損傷組織的各類血管內(nèi)皮細(xì)胞，包括動(dòng)脈、靜脈、毛細(xì)血管。BEFV主要在肺、淋巴結(jié)以及脾內(nèi)繁殖，并造成損傷，其中以肺損傷為主。BEFV可以使血管通透性增加導(dǎo)致水腫，還可導(dǎo)致機(jī)體血鈣濃度降低、中性粒細(xì)胞濃度上升、白細(xì)胞濃度下降、血漿纖維蛋白濃度增加。

2.癥狀。BEFV感染牛機(jī)體后，潛伏數(shù)日后突然發(fā)病，體溫迅速升高至40℃～42℃，發(fā)熱2～3天后恢復(fù)正常。有些病牛產(chǎn)奶量明顯下降乃至停止，隨后出現(xiàn)口鼻分泌物增多、精神倦怠、食欲降低乃至廢絕、跛腿行走、關(guān)節(jié)腫脹、呼吸加快、心率增速等癥狀。肺部聽診音開始為干啰音，后發(fā)展為濕啰音，不同狀態(tài)的牛表現(xiàn)出的臨床癥狀輕重不同。高產(chǎn)奶牛、體型肥胖的牛、成年牛、公牛表現(xiàn)出更加嚴(yán)重的臨床癥狀。有些牛感染BEFV后迅速死亡不表現(xiàn)任何臨床癥狀。部分病牛出現(xiàn)頭部歪向一側(cè)、癱瘓、倒地不起、瘤胃鼓氣、反芻停止、便秘、最終死亡。多數(shù)病牛表現(xiàn)為單腿或多腿出現(xiàn)僵硬、跛行，母牛出現(xiàn)死胎、流產(chǎn)。

3.病理變化。BEF病牛因癥狀不同、發(fā)病階段不同而表現(xiàn)出不同的病理變化。該病的病理變化主要體現(xiàn)在呼吸系統(tǒng)，呼吸道黏膜腫脹、充血、有出血點(diǎn)，呼吸道內(nèi)有大量充滿的氣泡的滲出物。肺部明顯腫大，甚至占據(jù)整個(gè)胸腔，表現(xiàn)為充血腫脹、充水腫脹或者間質(zhì)部位充氣腫脹，黏膜下大量淋巴細(xì)胞積聚。肺部病變主要發(fā)生于肺葉處，有時(shí)可見到暗紅色實(shí)質(zhì)性病變。胃、腸及心臟部位的病變以出血為主，肉眼可見出血點(diǎn)，黏膜充血。心臟有時(shí)可見血凝塊，胃腸有時(shí)發(fā)生廣泛性出血、卡他性炎癥甚至黏膜脫落。肝、脾及腎等器官也可見腫大等病變。關(guān)節(jié)腫大，有炎性滲出。

四、診斷

根據(jù)特殊的臨床癥狀和病理變化可以實(shí)現(xiàn)對該病的初步診斷。如需確診需對疑似患BEF的病牛進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)室診斷。目前，常用的實(shí)驗(yàn)室診斷方法包括病原學(xué)診斷、血清學(xué)診斷以及分子生物學(xué)診斷。

1.病原學(xué)診斷。采集患BEF病牛的血液分離白細(xì)胞，并接種小鼠腦部，對BEFV進(jìn)行多次傳代，使BEFV的潛伏期不斷縮短，毒力不斷增強(qiáng)，待傳代至BEFV能夠使全部小鼠3天內(nèi)迅速發(fā)病死亡時(shí)分離小鼠體內(nèi)病毒，進(jìn)行血清中和試驗(yàn)。分別在分離得到的病毒懸液中加入陽性血清和陰性血清，并注射到小鼠腦部。若注射陽性血清與分離物懸液混合液的小鼠全部存活或者僅個(gè)別死亡，而注射陰性血清與分離物懸液混合液的小鼠全部死亡，則說明病?；糂EF。該方法耗費(fèi)時(shí)間長，有一定操作難度，因此，目前往往采用更加簡便快捷的血清學(xué)診斷方法以及分子生物學(xué)診斷方法。

2.血清學(xué)診斷。常用的血清學(xué)診斷方法包括∶血清中和試驗(yàn)（S N）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）以及間接免疫熒光技術(shù)（IFA）。這些血清學(xué)診斷方法均具有良好的特異性及靈敏度。SN包括常量SN和微量SN，適合于大規(guī)模進(jìn)行的流行病學(xué)調(diào)查，其中微量SN是目前采用的標(biāo)準(zhǔn)診斷方式。特異性抗體阻斷ELISA特異性較好，并且操作簡便，常被用于BEF的臨床診斷。

3.分子生物學(xué)診斷。采用分子生物學(xué)方法對BEF進(jìn)行診斷，具有快速、簡便、靈敏等多種優(yōu)點(diǎn)。目前已經(jīng)建立了多種行之有效的分子生物學(xué)診斷方式，包括反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）、反轉(zhuǎn)錄等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（RT-LAMP）、實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Real-time PCR）等技術(shù)。RT-PCR是目前最常用的實(shí)驗(yàn)室診斷方式，該方法操作較簡單，靈敏度較好。Real-time PCR更加省時(shí)、特異性更好、靈敏度更高。RT-LAMP相較于PCR技術(shù)環(huán)節(jié)更少，并且可以在病牛發(fā)病早期進(jìn)行檢測，但是該方法易造成病毒擴(kuò)散，因此難以廣泛應(yīng)用。

五、治療

根據(jù)患BEF病牛的臨床癥狀，采用不同的治療方案。根據(jù)癥狀不同可以分為呼吸型、消化型和癱瘓型。治療過程中根據(jù)臨床表現(xiàn)可以通過補(bǔ)充等滲溶液改善脫水癥狀，使用抗生素抑制繼發(fā)感染，使用抗炎藥物抑制炎癥的發(fā)展。針對呼吸型，可以使用解熱鎮(zhèn)痛類藥物退燒，使用糖皮質(zhì)激素進(jìn)行抗炎治療，使用廣譜類抗生素抑制細(xì)菌的繼發(fā)感染，使用林格氏液或生理鹽水進(jìn)行補(bǔ)水治療；針對消化型病牛，給予降溫退熱、抗炎以及預(yù)防繼發(fā)感染治療；針對癱瘓型病牛，要經(jīng)常幫助其每日翻身數(shù)次，避免因血液循環(huán)受阻引發(fā)壞死。除進(jìn)行降溫退熱、抗炎并防止繼發(fā)感染外，還可以使用葡萄糖酸鈣治療鈣血癥。

六、防控措施

1.免疫接種。疫苗接種是預(yù)防BEFV的主要手段，目前常用的疫苗包括弱毒疫苗、滅活疫苗、基因工程亞單位疫苗以及重組型疫苗，重組疫苗主要針對BEFV的G蛋白。牛接種該疫苗后保護(hù)期較短，因此疫苗接種后每間隔6～12個(gè)月需要加強(qiáng)免疫。發(fā)生過BEF的牛，痊愈后獲得堅(jiān)強(qiáng)的免疫，能夠抵抗BEFV的再次感染，不需要接種該疫苗。

2.飼養(yǎng)管理和環(huán)境衛(wèi)生。由于該病為非接觸性傳播，蚊類等節(jié)肢動(dòng)物是BEF傳播的主要媒介。因此，阻斷蚊蟲傳播，對抑制該病的流行具有重要意義。在蚊蟲滋生的陰雨季節(jié)應(yīng)停止放牧，改用舍飼，養(yǎng)殖場區(qū)內(nèi)應(yīng)及時(shí)清理積水，飲水器具應(yīng)定期清潔并進(jìn)行消毒，養(yǎng)殖圈舍門窗安裝紗網(wǎng)，阻止蚊蟲進(jìn)入。

采取合理的飼養(yǎng)管理措施，注重溫度、濕度控制，避免環(huán)境過冷過熱、過于干燥或者過于潮濕引發(fā)應(yīng)激導(dǎo)致抵抗力下降。飼喂?fàn)I養(yǎng)均衡的草料，清潔飲水，避免飼喂存在霉變的情況的草料或不潔飲水引發(fā)疾病，同樣導(dǎo)致抵抗力下降。