我國馬、驢流產(chǎn)沙門氏菌病的研究進(jìn)展

文│胡哲 郭奎 王金慧 初曉雨 王垚鑫 王曉鈞*（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所）

馬流產(chǎn)沙門氏菌?。‥quine abortus Salmonellosis）是由馬流產(chǎn)沙門氏菌（Salmonella abortus equi，S.abortus.equi）、鼠傷寒沙門氏菌（Salmonella typhimurium，S.typhi）、腸炎沙門氏菌（Salmonella enteritidis，S.enteritidis）、都柏林沙門氏菌（Salmonella dublin，S.dublin）等引起的一種以妊娠動物流產(chǎn)為主要特征的馬屬動物傳染病。馬、驢是主要的易感動物，馬患此病又名為馬副傷寒（Equi paratyphoid），驢患此病又名驢副傷寒。

20世紀(jì)70年代末，馬流產(chǎn)沙門氏菌病曾在我國華北、西北、東北等養(yǎng)馬地區(qū)陸續(xù)暴發(fā)，并造成了比較嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。此后，該病在我國銷聲匿跡了40余年。自2014年開始，在一些馬群中零星出現(xiàn)流產(chǎn)情況，之后在各地陸續(xù)發(fā)生馬流產(chǎn)疫情，馬流產(chǎn)集中地區(qū)流產(chǎn)率高達(dá)66.7%，其中大部分為草原上開放式散養(yǎng)馬群，疫病傳播速度快、波及范圍廣，疑似馬流產(chǎn)沙門氏菌病。后經(jīng)實驗室確診此致病菌為馬流產(chǎn)沙門氏菌。幾年后，該病原菌引起的感染又蔓延到集約化養(yǎng)殖的驢場。

該病全年均可發(fā)生，但主要發(fā)生于春秋兩季，大多表現(xiàn)為散發(fā)，有時呈地方流行性。馬流產(chǎn)沙門氏菌主要通過飲水、飼料及交配傳播，母馬流產(chǎn)時造成的環(huán)境污染難以根除，會持續(xù)在馬群中傳播。該病的發(fā)生直接影響了我國馬匹和驢只的存欄量，并給相關(guān)產(chǎn)業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟損失，且該病還有蔓延趨勢，對我國馬業(yè)持續(xù)發(fā)展和驢業(yè)的經(jīng)濟化養(yǎng)殖造成了潛在的威脅和巨大的影響，嚴(yán)重阻礙了我國馬、驢產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

一、馬流產(chǎn)沙門氏菌病的臨床特征

馬流產(chǎn)沙門氏菌病根據(jù)動物的年齡、性別不同，其臨床特征也不同。孕馬（驢）主要發(fā)生流產(chǎn)，稱副傷寒性流產(chǎn)；幼駒感染后發(fā)生敗血癥、關(guān)節(jié)炎和腹瀉，有時出現(xiàn)支氣管肺炎，稱幼駒副傷寒；公馬（驢）表現(xiàn)睪丸炎、鬐甲腫，稱副傷寒。

孕馬（驢）的流產(chǎn)主要發(fā)生在妊娠中后期，流產(chǎn)前通常沒有任何先兆，突發(fā)流產(chǎn)。流產(chǎn)時通常是胎兒、胎衣一起娩出，很少有胎衣停滯現(xiàn)象。陰道流出污穢不潔的紅褐色腥臭液體。絕大多數(shù)流產(chǎn)幼駒為死胎，有少數(shù)存活的胎兒在出生幾天后也會發(fā)生死亡；亦有患病幼駒在一個月內(nèi)出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎、跛行等癥狀，嚴(yán)重的臥地不起。公馬（驢）患病也會發(fā)生關(guān)節(jié)炎。

以往民間普遍認(rèn)為，馬流產(chǎn)沙門氏菌病易引起初產(chǎn)母馬（驢）發(fā)生流產(chǎn)，通常在第二年便不會流產(chǎn)。但臨床統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，上一年流產(chǎn)動物在次年仍會有30%～70%的流產(chǎn)率。

孕馬（驢）流產(chǎn)時，病原菌隨流產(chǎn)胎兒、胎衣、羊水及陰道分泌物排出體外，病公馬（驢）隨精液排菌，非常容易造成環(huán)境污染，一旦形成污染，難以去除，病原菌在動物群體和飼養(yǎng)環(huán)境中持續(xù)存在，逐年加劇馬和驢的流產(chǎn)概率。因此，一旦有該病傳入，應(yīng)采取相應(yīng)的防控措施，及時止損。

二、馬流產(chǎn)沙門氏菌病疫苗的研究進(jìn)展

20世紀(jì)70年代，農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)藥品監(jiān)察所（中監(jiān)所）成功研制了沙門氏菌馬流產(chǎn)活疫苗（C355）；中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所（哈獸研）成功研制了馬流產(chǎn)沙門氏菌C系弱毒疫苗。這兩種疫苗均進(jìn)行了一定規(guī)模的臨床試驗，收到了良好的效果，為國家挽回了大量損失。遺憾的是，C355和C系疫苗后期受市場需求的限制沒有進(jìn)行商品化生產(chǎn)。近年來，迫于疫情暴發(fā)對該病疫苗產(chǎn)品的亟需，2018年哈爾濱維科生物技術(shù)有限公司成功將中監(jiān)所研制的C355馬流產(chǎn)弱毒疫苗恢復(fù)生產(chǎn)，養(yǎng)殖場應(yīng)用該疫苗后，流產(chǎn)率大大降低，及時挽回了經(jīng)濟損失。

2020年哈獸研以我國當(dāng)前流行的馬流產(chǎn)沙門氏菌的分離株作為候選疫苗株，研制了馬流產(chǎn)沙門氏菌馬源株和驢源株2項滅活疫苗，并獲得國家專利授權(quán)。此2項疫苗在小鼠體內(nèi)安全性好，免疫保護率高。

三、馬流產(chǎn)沙門氏菌病診斷技術(shù)的研究進(jìn)展

馬流產(chǎn)沙門氏菌病的診斷技術(shù)在國內(nèi)、外的研究均較少，我國主要依據(jù)《馬流產(chǎn)沙門氏菌病診斷技術(shù)（NY/T 570-2002）》行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（行標(biāo)）中規(guī)定的方法進(jìn)行檢測。該標(biāo)準(zhǔn)采用細(xì)菌分離結(jié)合生化特性和血清型鑒定進(jìn)行病原學(xué)檢測，采用試管凝集試驗（TAT）檢測馬流產(chǎn)沙門氏菌病的4種病原菌抗體。

TAT是傳統(tǒng)的抗體檢測方法，該方法屬于直接凝集反應(yīng)，其利用細(xì)菌、螺旋體和紅細(xì)胞等顆粒性抗原，在適當(dāng)電解質(zhì)參與下直接與相應(yīng)抗體結(jié)合，出現(xiàn)凝集。在檢測特異性方面，此凝集反應(yīng)存在交叉反應(yīng)，也就是以馬流產(chǎn)沙門氏菌作為凝集抗原，與含有鼠傷寒沙門氏菌抗體的血清反應(yīng)時也會有凝集現(xiàn)象。因此，該方法的特異性不強；在檢測敏感性方面，用肉眼觀察凝集程度，不僅會受到人為因素影響，在檢測單因子血清時也會使敏感性降低；在操作方面，該方法步驟繁瑣、耗時費力，需要有經(jīng)驗的人員操作；在檢測效率方面，受限于一份樣品需要多個稀釋度，無法滿足大規(guī)模樣品檢測的需要。郭奎等建立了微量凝集試驗，將操作繁瑣的試管操作換成96孔U型凝集板，相對縮短了試驗時間。

為滿足行業(yè)對馬流產(chǎn)沙門氏菌病病原學(xué)和血清學(xué)快速、高通量檢測的需求，哈獸研自主研發(fā)了一系列馬流產(chǎn)沙門氏菌檢測方法，并進(jìn)行了標(biāo)準(zhǔn)化工藝優(yōu)化、包裝成商品化檢測試劑盒，主要包括馬流產(chǎn)沙門氏菌熒光PCR檢測試劑盒、馬流產(chǎn)沙門氏菌ELISA抗體檢測試劑盒、馬流產(chǎn)沙門氏菌cELISA抗體檢測試劑盒、馬流產(chǎn)沙門氏菌膠體金免疫層析試紙條。

四、結(jié)語

近年來，馬流產(chǎn)沙門氏菌病在我國北方持續(xù)暴發(fā)，波及的范圍越來越廣，導(dǎo)致我國馬匹和驢只的存欄量急劇下降，給我國馬屬動物養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。該病一旦傳入養(yǎng)殖場，致病菌會持續(xù)在環(huán)境中存在，難以清除，造成連年損失。該病的防治重點在于及時發(fā)現(xiàn)及時預(yù)防。養(yǎng)殖場應(yīng)建立持續(xù)的檢疫制度，科學(xué)合理引進(jìn)動物，動物引進(jìn)和流動時可采用膠體金試紙條進(jìn)行初篩，規(guī)?；B(yǎng)殖場可以采用高通量ELISA方法對疫病的流行病學(xué)情況進(jìn)行評估，加強飼養(yǎng)管理，采取綜合防治手段進(jìn)行防控。如有臨床流產(chǎn)病例，可采用抗原和抗體檢測的方法及時確定致病菌，進(jìn)一步采取科學(xué)合理的防控方案。