血清前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9在2型糖尿病合并冠心病患者中的表達(dá)分析

黃舒潔 陳 威*

（福建省立醫(yī)院心血管內(nèi)科，福建 福州 350001）

2型糖尿病是臨床常見(jiàn)的慢性代謝性疾病，發(fā)病率逐年升高，已成為我國(guó)重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題。冠心病作為臨床常見(jiàn)的心血管疾病，多與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化密切相關(guān)，是患者致殘、致死的重要原因，其中脂質(zhì)代謝紊亂及炎性反應(yīng)是引發(fā)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的重要因素[1]。2型糖尿病和冠心病一旦同時(shí)發(fā)生，可進(jìn)一步加劇患者機(jī)體糖脂代謝的紊亂，促進(jìn)其心血管病變的進(jìn)展，提高心腦血管事件的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，增加患者致殘和致死率[2]。因此，臨床十分重視對(duì)2型糖尿病合并冠心病的防治。前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素（9PCSK9）是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一種與常染色體顯性高膽固醇血癥密切相關(guān)的蛋白，是代謝血脂代謝的重要蛋白之一[3]。研究顯示，PCSK9可通過(guò)調(diào)節(jié)肝臟脂質(zhì)代謝，參與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展，與冠狀動(dòng)脈病變程度有一定相關(guān)性[4]。有研究顯示，PCSK9在2型糖尿病合并冠心病患者中呈高表達(dá)，證實(shí)與兩種疾病的發(fā)生、發(fā)展存在密切關(guān)聯(lián)[5]。本研究進(jìn)一步分析PCSK9在2型糖尿病合并冠心病患者中的表達(dá)及其臨床意義，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2019年12月至2021年8月在我院治療的54例2型糖尿病合并冠心病患者的臨床資料，將其作為A組，男30例，女24例，年齡39～80歲，平均年齡（62.10±10.70）歲；將同期54例單純2型糖尿病患者作為B組，男29例，女25例，年齡37～79歲，平均年齡（61.80±10.20）歲；將同期54例健康體檢者作為C組，男28例，女26例，年齡35～79歲，平均年齡（61.70±10.60）歲。所有A組、B組患者均經(jīng)血糖檢查確診為2型糖尿病，A組患者經(jīng)心電圖、心超等檢查確診為冠心病，冠狀動(dòng)脈造影顯示冠狀動(dòng)脈主支血管狹窄≥50%，兩組均未采取針對(duì)性降糖治療。排除合并甲狀腺疾病，嚴(yán)重心、肝、腎功能障礙，嚴(yán)重感染，近期服用過(guò)降糖藥物及葉酸、固醇類激素等，惡性腫瘤的患者。對(duì)比3組的年齡、性別等一般資料無(wú)明顯差異，具有可比性。

1.2 方法 3組均抽取空腹靜脈血5 mL，離心速度3 000 r/min，時(shí)間10 min，提取血清，測(cè)定PCSK9、空腹血糖（FPG）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、空腹胰島素（FINS）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）、同型半胱氨酸（Hcy）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）等血生化指標(biāo)。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定PCSK9、IL-6，使用酶標(biāo)儀在波長(zhǎng)450 nm下讀取OD值，計(jì)算PCSK9、IL-6的水平；采用葡萄糖氧化酶法測(cè)定FPG，離子交換色譜法測(cè)定HbA1c，氧化酶法測(cè)定TC、TG，均相酶比色法測(cè)定LDL-C、HDL-C，化學(xué)發(fā)光法測(cè)定FINS，熒光偏振免疫分析法測(cè)定Hcy，免疫透射比濁法測(cè)定hs-CRP；采用美國(guó)R＆D公司提供的相關(guān)試劑盒，嚴(yán)格遵守試劑盒說(shuō)明書(shū)完成各個(gè)步驟的操作[6]。

1.3 觀察指標(biāo) 測(cè)定3組的PCSK9、FPG、HbA1c、FINS、TC、TG、HDL-C、LDL-C、hs-CRP、Hcy、IL-6水平；分析2型糖尿病合并冠心病患者PCSK9與各指標(biāo)的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，（x-±s）表示計(jì)量資料，[n（%）]表示計(jì)數(shù)資料，多組間比較行F檢驗(yàn)，采用Pearson法進(jìn)行相關(guān)性分析，P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 3組血糖、血脂等血生化指標(biāo)對(duì)比 A組PCSK9、FPG、HbA1c、FINS、TC、TG、及LDL-C水平均明顯高于B組、C組，HDL-C水平明顯低于B組、C組，差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 3組患者血糖、血脂等血生化指標(biāo)對(duì)比（±s）

表1 3組患者血糖、血脂等血生化指標(biāo)對(duì)比（±s）

組別 nPCSK9(ng/mL)IL-6(ng/L)A組 54 97.41±32.03 7.89±1.64 9.17±1.96 15.27±3.94 5.34±1.02 2.30±0.79 1.15±0.28 3.15±0.69 5.72±1.34 12.78±2.49 7.56±1.57 B組 54 78.62±22.59 7.20±1.57 7.89±1.82 13.45±3.26 4.83±0.95 1.91±0.62 1.28±0.30 2.67±0.60 3.49±0.78 10.83±2.27 5.31±1.33 C組 54 47.36±17.85 5.16±1.03 5.10±1.09 8.92±2.13 4.21±0.92 1.42±0.47 1.46±0.27 2.06±0.54 1.42±0.61 8.10±1.46 1.21±0.58 F值9.7425.0146.1787.9544.9854.8733.0924.3365.9086.3715.625 P值＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05 FPG(mmol/L)HbA1c(%)FINS(mU/L)TC(mmol/L)TG(mmol/L)HDL-C(mmol/L)LDL-C(mmol/L)hs-CRP(mg/L)Hcy(μmol/L)

2.2 3組炎性因子水平對(duì)比 A組IL-6、Hcy及Hs-CRP水平均明顯低于B組和C組，與PCSK9水平呈正相關(guān)，差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 3組患者炎性因子水平對(duì)比（x-±s）

3 討 論

冠心病的病理基礎(chǔ)是動(dòng)脈粥樣硬化和血管內(nèi)皮功能紊亂，脂質(zhì)沉積、炎性反應(yīng)、血小板聚集等是形成動(dòng)脈粥樣斑塊的主要原因。2型糖尿病的發(fā)病與胰島素分泌減少、胰島素敏感性下降、胰島素抵抗等有關(guān)，患者長(zhǎng)期高血糖可損傷血管舒縮功能，引起血管內(nèi)皮功能障礙，引發(fā)血管壁炎性反應(yīng)，促進(jìn)IL-6、TNF-α等大量炎性因子釋放，不僅損傷血管內(nèi)皮，還可促進(jìn)胰島β細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致患者病情惡性循環(huán)[7-8]。2型糖尿病合并冠心病可進(jìn)一步加重病情，促進(jìn)機(jī)體脂質(zhì)代謝紊亂，加速動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展。

PCSK9是一種新型的前蛋白轉(zhuǎn)化酶，可介導(dǎo)肝細(xì)胞低密度脂蛋白受體（LDLR）的降解，對(duì)血清LDL-C產(chǎn)生影響[9]。本研究結(jié)果顯示：A組PCSK9、FPG、HbA1c、FINS、TC、TG、及LDL-C水平均明顯高于B組、C組，IL-6、Hcy、Hs-CRP及HDL-C水平明顯低于B組、C組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），由此可見(jiàn)，胰島素與PCSK9的表達(dá)密切相關(guān)。分析原因：PCSK9作為調(diào)脂及抗動(dòng)脈粥樣硬化的新型靶點(diǎn)，具有顯著的調(diào)脂效果，尤其是其單克隆抗體Alirocumab和Evolocumab，可降低LDL-C達(dá)39%～62%和47%～56%，能有效調(diào)脂，還可明顯降低心血管事件風(fēng)險(xiǎn)[10]。有研究顯示：LDL-C主要是通過(guò)肝臟表面的LDL-C受體清除，在LDL-C受體與LDL-C結(jié)合后內(nèi)吞至胞質(zhì)后，與LDL-C分離，使得LDL-C在肝細(xì)胞內(nèi)被降解，而PCSK9可降解肝細(xì)胞表面的LDL-C受體，使血清內(nèi)的LDL-C水平得到提升，并可通過(guò)LDL的代謝影響TC、TG水平，而胰島素可通過(guò)SREBP-1c上調(diào)肝細(xì)胞PCSK9 mRNA的表達(dá)，與PCSK9密切相關(guān)[11]。PCSK9作為前蛋白轉(zhuǎn)化酶，可降解載脂蛋白E受體2，間接促進(jìn)炎性反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展以及氧化應(yīng)激情況，抑制血栓形成的途徑，與IL-6等炎癥指標(biāo)呈正相關(guān)[12]。

陳曉麗等[13]學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)：治療4個(gè)月后，觀察組有效率95.83%，高于對(duì)照組的80.43%（χ2=5.390，P＜0.05）。觀察組血清PCSK9、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、高敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）低于對(duì)照組（t/P=3.082/0.008，7.658/0.000，6.465/0.000，6.637/0.000）。觀察組空腹血糖（FPG）、餐后2 h血糖（2 hPG）、胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）、三酰甘油（TG）低于對(duì)照組（t/P=4.847/0.000，4.359/0.000，5.509/0.000，2.822/0.010），認(rèn)為PCSK9作為新近發(fā)現(xiàn)的與高膽固醇血癥密切相關(guān)的調(diào)控蛋白，可特異結(jié)合肝細(xì)胞表面低密度脂蛋白受體，靶向阻斷低密度脂蛋白受體的循環(huán)路徑，抑制體內(nèi)LDL-C清除代謝，誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化，而劉云濤等[14]學(xué)者研究結(jié)果顯示：與NGT組比較，治療前Met組、Gli組血清PCSK9水平升高（3.93±0.71）vs.（5.42±1.03）、（5.78±1.61）ng/mL，P＜0.01；相關(guān)性分析顯示，血清CKSP9水平與FPG、HbA1c、胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）、FINS、TC、LDL-C、TG、高敏C-反應(yīng)蛋白（hsCRP）、TNF-α、BMI 呈正相關(guān)（r=0.578、0.638、0.556、0.610、0.578、0.592、0.589、0.638、0.561、0.552，P＜0.05或P＜0.01），與HDL-C呈負(fù)相關(guān)（r=－0.614，P＜0.01）；治療后Met組PCSK9水平下降（P＜0.05）；治療后Gli組血清PCSK9水平無(wú)明顯變化（P＞0.05）。高水平PCSK9與T2DM關(guān)系密切，可對(duì)糖代謝的影響通過(guò)葡萄糖激酶的作用完成[15-20]，這結(jié)果與本文研究觀點(diǎn)基本一致，均證實(shí)了PCSK9在T2DM中的表達(dá)關(guān)系。遂臨床在多項(xiàng)研究基礎(chǔ)上，研發(fā)了PCSK9抑制劑，以治療T2DM患者，但需注意的是，PCSK9抑制劑主要適用人群僅包括以下3種：①單純適用伐他汀類藥物且低密度脂蛋白水平降幅不明顯者。②部分對(duì)他汀類藥物無(wú)法耐受者。③有家族性遺傳性高膽固醇血癥且血脂水平不易下降者。其中有家族性遺傳性高膽固醇血癥的患者，可聯(lián)合其他汀類藥物進(jìn)行治療，效果更佳[21-31]。

綜上所述，PCSK9在2型糖尿病合并冠心病患者中的表達(dá)明顯升高，可促進(jìn)脂質(zhì)代謝紊亂及炎性反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展，臨床可用于輔助判斷冠狀動(dòng)脈粥樣硬化嚴(yán)重程度。