急性髓系白血病患者ASXL2和ZBTB7A基因突變及其與臨床特征及預(yù)后的關(guān)系

周 冰 梁立新 辛小海 令狐銳 李青青 齊云曉 顧孟孟

急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)，是臨床血液科常見的造血系統(tǒng)惡性增生性疾病[1]。早期患者常出現(xiàn)疲倦、發(fā)熱、食欲減退等癥狀，后期患者多出現(xiàn)發(fā)熱、貧血、出血及器官或組織浸潤癥狀[2]。AML多起源于尚未分化為白細(xì)胞的骨髓原始細(xì)胞，其發(fā)病機(jī)制為基因突變、染色體異常等促使髓系干細(xì)胞分化受阻，失去分化成熟的能力，轉(zhuǎn)化為急性白血病細(xì)胞[3-4]?；蛲蛔冊贏ML發(fā)病機(jī)制中扮演著重要角色，可用于AML疾病的診斷和預(yù)后檢測[5]。ZBTB7A是一種白血病或淋巴瘤相關(guān)因子，編碼轉(zhuǎn)錄抑制因子POK/ZBTB的轉(zhuǎn)錄[6]。有研究報道ZBTB7A與腫瘤細(xì)胞增殖有關(guān)[7]。有研究稱ASXL2 和ZBTB7A 突變與AML 疾病發(fā)展的關(guān)系密切，但是相關(guān)研究較少[8-9]。本研究主要探討AML患者ASXL2和ZBTB7A突變與臨床特征以及預(yù)后的關(guān)系?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年3月至2020年5月本院收治急性髓系白血病患者84例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)[10]中關(guān)于急性髓系白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)確診為急性髓系白血??； ②患者簽署自愿受試同意書，患者及其家屬需簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：① 合并嚴(yán)重感染者或代謝性疾?。虎诤喜⑵渌麗盒阅[瘤患者；③合并其他器官嚴(yán)重性病變患者。

1.2 ASXL2和ZBTB7A基因突變分析

采集AML患者初治時骨髓液2～3 ml，使用DNA提取試劑盒(美國 Omega 公司)提取DNA，應(yīng)用PCR法擴(kuò)增ASXL2基因的12和13號外顯子以及ZBTB7A基因2和3號外顯子，送上海生工生物公司測序，使用 Sequencer 軟件分析測序結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo)

收集患者的基本資料，包括性別、年齡及并發(fā)癥；實驗室檢查指標(biāo)包括白細(xì)胞數(shù)量(WBC)、血紅蛋白(Hb)、血小板(PLT)、骨髓原始粒細(xì)胞。

1.4 隨訪

采取電話或者門診回訪的方式對患者進(jìn)行隨訪，隨訪截止日期至5月1日，總體生存(OS)期為患者確診至死亡的時間或隨訪終點(diǎn)，無事件生存(EFS)期為自獲得完全緩解(CR)到復(fù)發(fā)、死亡或隨訪終點(diǎn)。記錄患者EFS率及OS率。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 AML患者ASXL2 和 ZBTB7A 的突變頻率及其與基線資料的關(guān)系

在AML患者中，27例(32.14%)發(fā)生ASXL2突變，8例(9.52%)發(fā)生ZBTB7A突變。ASXL2和ZBTB7A 突變和野生型患者在年齡、性別或其他并發(fā)癥方面差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

2.2 AML患者ASXL2 和 ZBTB7A 突變與臨床指標(biāo)的關(guān)系

ASXL2突變患者的白細(xì)胞數(shù)量顯著高于野生型患者(P<0.05)，而在Hb、PLT、骨髓原始粒細(xì)胞方面野生型與突變型間均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。見表2。

表2 AML患者ASXL2 和 ZBTB7A 突變與臨床指標(biāo)的關(guān)系

2.3 AML患者ASXL2 和 ZBTB7A 突變與預(yù)后的關(guān)系

AML患者ASXL2 和 ZBTB7A 突變的CR率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。ASXL2野生型患者的OS率、EFS率均顯著高于突變型(P<0.05)；ZBTB7A突變與OS率無相關(guān)性(P>0.05)，ZBTB7A野生型患者的EFS率顯著高于突變型(P<0.05)。見表3。

表3 AML患者ASXL2 和 ZBTB7A 突變與預(yù)后的關(guān)系

3 討論

AML是一種常見的血液系統(tǒng)惡性腫瘤，主要特征為原始和幼稚髓系細(xì)胞異常增生，臨床表現(xiàn)無特異性，多表現(xiàn)為乏力、發(fā)熱、皮膚黏膜蒼白、瘀斑、紫癜等癥狀[11-12]。由于該病缺乏特效的治療方法，且疾病發(fā)展迅速，病死率高，嚴(yán)重威脅著人類的生命健康[13]。在AML患者中染色體易位的發(fā)生率約為50%，T(8:21)是AML常見的染色體易位，可協(xié)同其他基因突變，致使髓系祖細(xì)胞分化受阻，其中ASXL2、ZBTB7A是常見的“協(xié)同分子”[14-16]，主要通過形成AML-ETO 融合蛋白造成核結(jié)合因子復(fù)合體被破壞，阻礙造血分化[17]。

ASXL2基因?qū)儆贏SXL基因家族成員，長度為144 722 bp，可編碼1 435個氨基酸[18]，主要起轉(zhuǎn)錄抑制和激活的雙重調(diào)節(jié)作用，是表觀調(diào)節(jié)蛋白polycomb 家族和trithorax家族的增強(qiáng)子之一[19]。同源基因還包括ASXL1和ASXL3，ASXL2基因主要存在于大腦皮層、中軸骨、心臟等組織中[20]。有研究發(fā)現(xiàn)AML患者存在ASXL2基因突變，且伴有ASXL2基因突變患者AML復(fù)發(fā)率高于未突變患者，主要突變類型為點(diǎn)突變和移碼突變，多見于第11和12外顯子區(qū)[21-22]。有研究報道AML患者中ASXL2基因突變的發(fā)生率為22.7%[23]，但本研究結(jié)果顯示，在AML患者中，32.14%發(fā)生ASXL2突變，高于研究報道的突變率，可能與種族差異有關(guān)，具體原因還需要進(jìn)一步分析。本研究還發(fā)現(xiàn)ASXL2突變患者的白細(xì)胞數(shù)量顯著高于野生型患者，這與目前的研究報道一致[24]。 AML患者ASXL2 突變型和野生型的治療緩解率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，說明ASXL2 突變對AML患者治療療效的影響較小，另外ASXL2野生型患者的OS率、EFS率均顯著高于突變型，說明ASXL2 突變對AML患者預(yù)后的影響較大。

ZBTB7A基因?qū)儆谵D(zhuǎn)錄抑制因子POK家族的成員，長度為21 600 bp，可編碼584個氨基酸，可在調(diào)節(jié)造血分化和腫瘤代謝中起作用[25]。有研究發(fā)現(xiàn)ZBTB7A在AML患者中的突變頻率為23%[26]，然而本研究發(fā)現(xiàn)在AML患者中，9.52%發(fā)生ZBTB7A突變，低于23%，與上述結(jié)果不同的原因可能與種族差異有關(guān)。POK紅髓生成因子是ZBTB7A 基因編碼的產(chǎn)物，是與細(xì)胞生長及分化密切相關(guān)的致癌轉(zhuǎn)錄因子，是多種腫瘤預(yù)后不良的生物標(biāo)志分子之一[27-28]。本研究發(fā)現(xiàn)ZBTB7A野生型患者的EFS率顯著高于突變型，提示ZBTB7A突變可能對AML患者的預(yù)后造成影響。

綜上所述，ASXL2和ZBTB7A突變型AML患者的預(yù)后較差，ASXL2和ZBTB7A突變有可能成為預(yù)后不良的分子標(biāo)志物。但是本研究樣本量不足，結(jié)果可能存在偏移，還需要進(jìn)一步增加樣本量來證實此結(jié)果。