循環(huán)腫瘤細(xì)胞、BRCA1檢測(cè)在卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)中的價(jià)值

史芳瑜，郝鵬飛，馬磊，賀利民，徐全曉

卵巢癌是指卵巢上的惡性腫瘤，大部分都為卵巢原發(fā)性癌癥，是婦科疾病中最為常見的惡性腫瘤之一[1]。卵巢癌由于其早期癥狀不明顯，并且篩查手段效果不佳，所有往往發(fā)現(xiàn)時(shí)已經(jīng)是晚期，此時(shí)采取治療療效甚微[2]。目前，臨床上治療卵巢癌大多都采用化療的方式，雖然患者在此時(shí)間內(nèi)癥狀能夠得到緩解，但還是有很大的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移可能性，一旦復(fù)發(fā)或者轉(zhuǎn)移，其癌癥致死率將大大提高[3]。如何提高其對(duì)卵巢癌復(fù)方轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)能力成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)界研究的熱點(diǎn)。既往研究[4-5]顯示，通過對(duì)大量的卵巢癌患者的血液采樣對(duì)比分析得知，循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)和BRCA1的水平變化在不同卵巢癌癥狀中差異明顯。CTC具有全面、豐富的腫瘤信息，可通過檢測(cè)其水平的變化及時(shí)有效地預(yù)測(cè)卵巢癌的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移；而癌癥患者BRCA1的低表達(dá)則會(huì)影響化療藥物的敏感性，使患者在長(zhǎng)期化療時(shí)療效降低，增大卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的可能。本文主要研究CTC、BRCA1檢測(cè)在卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)中的價(jià)值，旨在為預(yù)測(cè)卵巢癌的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移提供借鑒。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月—2021年1月本院進(jìn)行藥物化療的120例卵巢癌患者，年齡30～72(50.70±7.55)歲；體重質(zhì)量指數(shù)(BMI)：16.02～28.98(22.72±2.48) kg/m2；腫瘤分期：1～2期30例、3期54例、4期36例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合卵巢癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)通過，患者及家屬了解并知情同意；(2)凝血功能正常；(3)基礎(chǔ)資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并其他惡性腫瘤患者；(2)心肝腎等臟器嚴(yán)重功能障礙者。根據(jù)術(shù)后1年CT顯像檢測(cè)卵巢癌病灶復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移情況將其分為復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組48例和未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組72例；復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組年齡30～71(50.69±7.54)歲；BMI：16.02～28.69(22.81±2.62) kg/m2；腫瘤分期：1～2期10例、3期24例、4期14例。未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組年齡31～72(50.71±7.56)歲；BMI：16.62～28.98(22.62±2.33) kg/m2；腫瘤分期：1～2期20例、3期30例、4期22例。2組患者年齡、BMI、腫瘤分期等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 檢測(cè)方法 分別于化療前后，采集患者外周空腹靜脈血，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CTC；采用免疫組織化學(xué)—鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)法檢測(cè)BRCA1的表達(dá)水平，試劑盒檢測(cè)方法嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，閱片方式采用雙盲法，BRCA1以腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性。聯(lián)合檢測(cè)方法采用并聯(lián)檢測(cè)法，即采用CTC或BRCA1其中任意一種方法檢測(cè)結(jié)果為陽性或低表達(dá)即表明卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。

1.3 觀察指標(biāo) (1)CTC陽性判定標(biāo)準(zhǔn)：熒光顯微鏡下CTC呈圓形或橢圓形，長(zhǎng)徑大于10 um,細(xì)胞核對(duì)于探針信號(hào)點(diǎn)≥3個(gè)為陽性，反之則為陰性。(2)BRCA1表達(dá)評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)：400倍視野下觀察陽性細(xì)胞染色強(qiáng)度并且計(jì)算陽性細(xì)胞百分比，按照染色強(qiáng)度評(píng)分和陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)計(jì)分總和來判斷，總分0～1分為(-)，～3分為弱陽性(+)，～5分為中陽性(++)，6分為強(qiáng)陽性(+++)。以-、±和+為低表達(dá),++、+++為高表達(dá)。

2 結(jié)果

2.1 2組患者CTC陽性率與BRCA1表達(dá)水平比較 復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組患者CTC陽性率明顯高于未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組患者，BRCA1低表達(dá)率明顯高于未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組患者(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者CTC陽性率與BRCA1表達(dá)水平比較

2.2 CTC陽性率與BRCA1表達(dá)水平對(duì)卵巢癌患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的評(píng)估價(jià)值 ROC曲線顯示，CTC陽性檢測(cè)率預(yù)測(cè)卵巢癌患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的AUC為0.762(95%Cl=0.672～0.852，P<0.001)；BRCA1表達(dá)水平預(yù)測(cè)卵巢癌患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的AUC為0.717(95%Cl=0.622～0.812，P<0.001)；聯(lián)合檢測(cè)的AUC為0.786(95%Cl=0.070～0.873，P<0.001)。見表2，圖1。

表2 CTC陽性率與BRCA1表達(dá)對(duì)卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的評(píng)估價(jià)值

圖1 CTC陽性率與BRCA1表達(dá)預(yù)測(cè)對(duì)卵巢癌患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的ROC分析

3 討論

卵巢癌發(fā)病率占第三位，但其致死率卻位于首位，由于疾病前期癥狀不明顯，發(fā)現(xiàn)時(shí)已然發(fā)展成為晚期，給治療帶來巨大難度[7]。目前常用鉑類加紫杉醇進(jìn)行化療治療，短時(shí)間內(nèi)癥狀可以得到化解，但其后續(xù)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的可能性依然存在，一旦復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移，其致死率將大大提高[8]。因此，科學(xué)預(yù)測(cè)卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的情況對(duì)于患者的生命安全至關(guān)重要。

本研究結(jié)果顯示，復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組患者CTC陽性率和BRCA1低表達(dá)率明顯高于未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組患者。出現(xiàn)上述原因可能是因?yàn)镃TC具備完整腫瘤信息，當(dāng)CTC陽性率高時(shí)，即可表明卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的可能性越大，鹿欣等[9]研究結(jié)果表明，CTC陽性率高低可作為預(yù)測(cè)卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的標(biāo)準(zhǔn)之一，本文研究與其一致，提示臨床醫(yī)師可通過檢測(cè)CTC陽性率來預(yù)測(cè)卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況。既往研究[10-11]顯示，BRCA1低表達(dá)的患者對(duì)造成DNA損傷相關(guān)藥物的敏感性降低，而化療相關(guān)藥物主要作用機(jī)制是破壞癌變細(xì)胞的DNA，使其不能完成分裂增殖，對(duì)藥物的敏感度降低從而使藥物的持續(xù)作用減弱，癌癥復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的幾率變大。王根生等[12]研究結(jié)果顯示，BRCA1的低表達(dá)能夠降低對(duì)鉑類化療敏感性，從而增大癌癥的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的可能性。本研究結(jié)果與其一致，提示臨床醫(yī)師可通過檢測(cè)CTC陽性率及BRCA1的表達(dá)來預(yù)測(cè)卵巢癌患者的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況。本研究經(jīng)過ROC分析顯示，通過CTC陽性率和BRCA1表達(dá)以及聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的AUC分別為0.762、0.717、0.786，表明CTC陽性率、BRCA1檢測(cè)以及聯(lián)合檢測(cè)均可用于臨床預(yù)測(cè)卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的指標(biāo)[13]，但聯(lián)合檢測(cè)與單一檢測(cè)差異不明顯，再結(jié)合取樣、檢查費(fèi)用等實(shí)際因素，因此在臨床預(yù)測(cè)卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況優(yōu)先選擇CTC陽性檢查來預(yù)測(cè)卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移[14-15]。

綜上所述，CTC陽性檢查、BRCA1檢測(cè)以及二者的聯(lián)合檢測(cè)均可用于臨床預(yù)測(cè)卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，但聯(lián)合檢測(cè)與單一檢測(cè)差異不明顯，臨床上可優(yōu)先選取CTC檢查預(yù)測(cè)卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。