獻(xiàn)血者ALT 檢測(cè)結(jié)果追蹤與檢測(cè)功效的重新評(píng)估

馮娟，楊波

（安陽(yáng)市中心血站，河南 安陽(yáng)455000）

丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 （alanine aminotransferase,ALT）是我國(guó)現(xiàn)行獻(xiàn)血法規(guī)定的無(wú)償獻(xiàn)血者必須檢測(cè)的項(xiàng)目之一，ALT 作為非特異性檢測(cè)指標(biāo)，曾作為非甲非乙型肝炎的替代性檢測(cè)指標(biāo)， 在血液安全中發(fā)揮了重要的作用， 但由于該項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)的非特異性使得ALT 成為血液報(bào)廢的首要原因[1-2]。2013 年8 月血站開(kāi)始執(zhí)行衛(wèi)生部頒布的行業(yè)新標(biāo)準(zhǔn)[3]，ALT 參考區(qū)間上限由原來(lái)40 U/L 調(diào)整為50 U/L，在一定程度上降低了由ALT 非特異性升高導(dǎo)致的血液報(bào)廢[4]。 但隨著4 代ELISA 試劑的普遍應(yīng)用及血液核酸檢測(cè)的全面覆蓋，ALT 引入獻(xiàn)血者篩查的意義已經(jīng)發(fā)生了改變,對(duì)比國(guó)際上許多國(guó)家的篩查模式，是否取消ALT 的篩查或調(diào)整ALT 的篩查上限成為國(guó)內(nèi)業(yè)內(nèi)人士關(guān)注熱議的焦點(diǎn)[5]，因此我們應(yīng)該重新正確評(píng)估ALT 在現(xiàn)行血液檢測(cè)模式中的功效與意義。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 我站2017 年7 月至2018 年7 月251 例ALT 單項(xiàng)檢測(cè)不合格再次獻(xiàn)血的獻(xiàn)血者。

1.2 儀器 奧林巴斯AU400 全自動(dòng)生化分析儀（日本OLYMPUS），ML-STAR CH.8 全自動(dòng)加樣系統(tǒng)（瑞士HAMILTON），ML-FAME 24/20 全自動(dòng)酶免后處理系統(tǒng)（瑞士HAMILTON），Uranus AE280 全自動(dòng)酶免儀 （深圳愛(ài)康），ChiTas BSS1200 核酸血液篩查系統(tǒng) （上海浩源生物科技有限公司），ABI7500 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 儀 （美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司）。

1.3 試劑 ALT 試劑： 美國(guó)貝克曼ALT 速率法；HBsAg 試劑：北京萬(wàn)泰、法國(guó)伯樂(lè)；抗-HCV 試劑：北京萬(wàn)泰、珠海麗珠；PCR 試劑：上海浩源乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒PCR-熒光法。 以上試劑均有國(guó)家批準(zhǔn)文號(hào)和批批檢標(biāo)識(shí)， 且在有效期內(nèi)使用。

1.4 方法

1.4.1 常規(guī)檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）對(duì)血液標(biāo)本分別進(jìn)行2 次HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP 檢測(cè)， 采用速率法對(duì)獻(xiàn)血者標(biāo)本進(jìn)行1 次ALT 檢測(cè)（采血前已進(jìn)行1 次速率法檢測(cè)）。

1.4.2 核酸檢測(cè) 采用PCR 方法對(duì)酶免檢測(cè)陰性的血液標(biāo)本進(jìn)行乙型肝炎病毒（HBV-DNA）、丙型肝炎病毒（HCV-RNA）、人類免疫缺陷病毒（HIVRNA）定性檢測(cè)。

1.4.3 追蹤檢測(cè) 2017 年7 月至2018 年7 月期間74 038 名獻(xiàn)血者中因ALT 單項(xiàng)檢測(cè)不合格的251例獻(xiàn)血者， 對(duì)其再次獻(xiàn)血進(jìn)行ALT、HBsAg、 抗-HCV 和HBV-DNA、HCV-RNA 追蹤檢測(cè)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 18.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用±s表示， 組間比較采用t 檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 獻(xiàn)血者ALT 與肝炎病毒指標(biāo)相關(guān)性比較 結(jié)果 988 例ALT 不合格、73 050 例ALT 合格標(biāo)本與HBsAg、HBV-DNA、抗-HCV、HCV-RNA 相關(guān)性結(jié)果比較，χ2值分別為2.69、0.32、9.36、0.03。見(jiàn)表1。

表1 獻(xiàn)血者ALT 與肝炎病毒指標(biāo)相關(guān)性比較

2.2 獻(xiàn)血者ALT 不合格追蹤結(jié)果比較 251 例ALT 單項(xiàng)檢測(cè)不合格的獻(xiàn)血者6 個(gè)月后再次獻(xiàn)血ALT 不合格率為26.69%（67/251）；12 個(gè)月后再次獻(xiàn)血ALT 不合格率為25.71%（27/105）； 肝炎病毒相關(guān)性指標(biāo)檢測(cè)全部陰性。 見(jiàn)表2。

表2 獻(xiàn)血者ALT 不合格追蹤結(jié)果比較

2.3 重復(fù)獻(xiàn)血者ALT 不合格次數(shù)結(jié)果比較 ALT 1次不合格、連續(xù)2 次不合格、連續(xù)3 次不合格檢測(cè)值分別為 （57.77±6.85）、（96.86±45.32）、（90.00±37.44）； 不同組別之間比較t 值分別為0.25、6.17、6.83。 見(jiàn)表3。

表3 重復(fù)獻(xiàn)血者ALT 不合格次數(shù)結(jié)果比較（±s）

表3 重復(fù)獻(xiàn)血者ALT 不合格次數(shù)結(jié)果比較（±s）

ALT 例數(shù)（n）1 次不合格連續(xù)2 次不合格連續(xù)3 次不合格P 60 57 28 ALT 值（U/L） t 57.77±6.85 96.86±45.32 90.00±37.44 0.25 6.17 6.83 P＞0.05 P＜0.05 PP＜0.05

3 討論

42 例HBV-DNA 反應(yīng)性和2 例HCV-RNA 反應(yīng)性標(biāo)本ALT 檢測(cè)均為合格，說(shuō)明ALT 異常升高晚于核酸檢測(cè)，這與金新莉等研究結(jié)果[6]是一致的， 因此ALT 檢測(cè)對(duì)篩查HBV、HCV 窗口期感染無(wú)相關(guān)性意義。 386 例HBsAg 反應(yīng)性和169 例抗-HCV 反應(yīng)性標(biāo)本中ALT 檢測(cè)不合格僅為16 例，明顯低于非肝炎性ALT 異常升高，16 例病毒性肝炎合并ALT 異常升高者其ALT 值并無(wú)規(guī)律可尋，這是由于重型肝炎存活的肝細(xì)胞較少，ALT 活性反而隨著病情的惡化而降低， 因此不能簡(jiǎn)單地以ALT 升高的程度來(lái)判斷肝炎病情， 也不能以ALT異常升高而判斷受檢者是否患有病毒性肝炎[7]。ALT 與肝炎病毒指標(biāo)統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，HBsAg、HBVDNA、HCV-RNA 反應(yīng)性與ALT 不合格之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義， 但抗-HCV 反應(yīng)性與ALT 不合格之間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示ALT 檢測(cè)在HCV 檢測(cè)中具有一定意義，其影響因素應(yīng)做進(jìn)一步研究，完全取消ALT 檢測(cè)從血液安全角度考慮有失偏頗。

對(duì)于251 例ALT 升高獻(xiàn)血者追蹤6 個(gè)月后發(fā)現(xiàn)，26.69%獻(xiàn)血者ALT 仍升高； 其中105 例ALT升高獻(xiàn)血者繼續(xù)追蹤12 個(gè)月后發(fā)現(xiàn)，25.71%獻(xiàn)血者ALT 仍升高，且肝炎相關(guān)性指標(biāo)均為陰性，無(wú)1例發(fā)展成為病毒性肝炎。 說(shuō)明251 例ALT 升高人群中約3/4 為非特異性ALT 升高，1/4 為非肝炎特異性升高，均無(wú)肝炎相關(guān)性，非特異ALT 升高與性別、年齡、獻(xiàn)血季節(jié)等相關(guān)因素有關(guān)[8]。 經(jīng)追蹤發(fā)現(xiàn)，存在非肝炎性ALT 特異性升高人群，該人群無(wú)肝炎感染， 但能較為穩(wěn)定地維持在正常水平以上的ALT 值，這應(yīng)與飲酒、睡眠、運(yùn)動(dòng)等一過(guò)性影響因素?zé)o相關(guān)性。 有研究表明BMI、肥胖所引起的代謝綜合征、 非酒精性脂肪肝病導(dǎo)致的肝細(xì)胞損害都是ALT 升高的因素之一[9-10]，該結(jié)論需進(jìn)一步進(jìn)行非肝炎性ALT 特異性升高人群分布與調(diào)查后得以證實(shí)。

隨機(jī)抽取145 份ALT 不合格次數(shù)不同的三組重復(fù)獻(xiàn)血者， 發(fā)現(xiàn)連續(xù)2 次不合格和連續(xù)3 次不合格的獻(xiàn)血者ALT 的均值之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但與一次不合格的獻(xiàn)血者ALT 均值比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 連續(xù)多次ALT 不合格ALT 水平明顯高于一次不合格ALT 水平，50 U/L~90 U/L 區(qū)間的ALT 升高人群多為非特異性ALT 升高， 由非病理性因素引起且與肝炎病毒無(wú)關(guān)， 但其報(bào)廢的血液超過(guò)75%， 這與劉如萱發(fā)表獻(xiàn)血者80%以上的ALT 不合格不是由于急性病毒性肝炎引起的觀點(diǎn)[11]比較接近，臨床肝炎防治指南[12-13]設(shè)定ALT 的2 倍正常值作為參考標(biāo)準(zhǔn)， 因此筆者認(rèn)為有必要調(diào)整血液篩查ALT 檢測(cè)上限。

綜上所述， 目前血液肝炎相關(guān)性檢測(cè)技術(shù)已發(fā)展較為成熟，且核酸檢測(cè)已全覆蓋，應(yīng)摒棄過(guò)去把ALT 檢測(cè)作為病毒性肝炎的淘汰依據(jù)， 可以增加肝炎特異性檢測(cè)項(xiàng)目作為血液篩查的依據(jù)，應(yīng)調(diào)整非肝炎性ALT 特異性升高人群的檢測(cè)上限，雖然ALT 血液篩查是一項(xiàng)低成本的檢測(cè)項(xiàng)目，但其較低的特異性所帶來(lái)高報(bào)廢率及負(fù)面影響不可估量。