新型通用型檢測(cè)器-電噴霧檢測(cè)器在藥物分析中的應(yīng)用進(jìn)展

劉 菁，吳 燕

（天津市藥品檢驗(yàn)研究院，天津 300070）

目前，高效液相色譜法（HPLC）已成為制藥研發(fā)、環(huán)境檢測(cè)、化工化學(xué)、食品分析等多個(gè)領(lǐng)域應(yīng)用最普遍的分析技術(shù)。檢測(cè)器作為高效液相色譜的重要組成部分，其類(lèi)型和性能決定被測(cè)化合物的響應(yīng)值和干擾情況，是色譜方法建立初期應(yīng)考慮的關(guān)鍵問(wèn)題。近年來(lái)，電噴霧檢測(cè)器（CAD）作為一種新型通用型檢測(cè)器在多個(gè)檢測(cè)分析領(lǐng)域的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，應(yīng)用CAD檢測(cè)器進(jìn)行藥物分析檢測(cè)的液相色譜法已被國(guó)外藥典收載。例如《英國(guó)藥典》2021年版（BP 2021）［1］和《美國(guó)藥典》2021年版（USP 2021）［2］均采用CAD檢測(cè)器對(duì)造影劑釓布醇的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行考查，同時(shí)USP43/NF38［3］中脫氧膽酸的含量測(cè)定也采用CAD檢測(cè)器進(jìn)行?，F(xiàn)行的《中國(guó)藥典》2020年版［4］首次在通則高效液相色譜法中提及CAD檢測(cè)器并進(jìn)行了簡(jiǎn)要介紹。本文在介紹CAD檢測(cè)器原理、特點(diǎn)、優(yōu)勢(shì)的基礎(chǔ)上，結(jié)合近年來(lái)國(guó)內(nèi)外發(fā)表的相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)CAD檢測(cè)器在藥物分析領(lǐng)域的應(yīng)用成果作以總結(jié)，為無(wú)紫外吸收或弱紫外吸收物質(zhì)的檢驗(yàn)檢測(cè)提供參考。

1 CAD檢測(cè)器工作原理及特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)

1.1 工作原理 當(dāng)CAD檢測(cè)器與HPLC聯(lián)用時(shí)，HPLC洗脫液經(jīng)與CAD檢測(cè)器的霧化器中氮?dú)馀鲎捕F化，含有分析物的較小液滴在室溫下干燥形成溶質(zhì)顆粒，與帶電氮?dú)馀鲎?，使得分析物顆粒表面帶上正電荷，經(jīng)過(guò)帶有低負(fù)電壓的離子阱裝置去除遷移率大的多余帶電氮?dú)?，遷移率小的帶電分析物顆粒把其電荷轉(zhuǎn)移給一個(gè)顆粒收集器，最后通過(guò)一個(gè)高靈敏度的靜電檢測(cè)計(jì)測(cè)量分析物的電荷量并形成電信號(hào)，該信號(hào)強(qiáng)度與溶質(zhì)質(zhì)量成正比［5］。CAD檢測(cè)器原理圖見(jiàn)圖1［6］。

圖1 CAD檢測(cè)器原理圖

1.2 特點(diǎn)及優(yōu)勢(shì) CAD檢測(cè)器作為一種通用型檢測(cè)器，適用范圍廣、靈敏度高、穩(wěn)定性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便。相對(duì)于紫外及二極管陣列檢測(cè)器（UV&DAD），CAD檢測(cè)器的響應(yīng)值不依賴(lài)于被測(cè)物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)，只與被測(cè)物質(zhì)的進(jìn)樣質(zhì)量有關(guān)，具有較高的響應(yīng)一致性；雖然質(zhì)譜檢測(cè)器（MS）的應(yīng)用也十分廣泛，但應(yīng)用MS作為檢測(cè)器的前提是被測(cè)物質(zhì)可以被電離，且其造價(jià)和維護(hù)維修費(fèi)用都很昂貴；另一種通用型檢測(cè)器示差折光檢測(cè)器（RID）由于不能兼容梯度洗脫，且抗干擾能力較差，應(yīng)用范圍也很有限；相對(duì)同為通用型檢測(cè)器的蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD），CAD檢測(cè)器的線(xiàn)性范圍通?？蛇_(dá)3~4個(gè)數(shù)量級(jí)，檢測(cè)靈敏度高，且CAD檢測(cè)器的測(cè)定參數(shù)基本已在出廠(chǎng)時(shí)設(shè)定好，每次分析的條件相對(duì)固定，因此重現(xiàn)性良好［7］。CAD檢測(cè)器雖具有明顯優(yōu)勢(shì)，但在使用時(shí)還存在一定的局限，表現(xiàn)在由于被測(cè)物質(zhì)隨流動(dòng)相進(jìn)入檢測(cè)器后需要先霧化再干燥形成溶質(zhì)顆粒，所以流動(dòng)相中不可使用不揮發(fā)的緩沖鹽。

2 CAD檢測(cè)器在藥物分析中的應(yīng)用

2.1 在中藥分析中的應(yīng)用 在中藥飲片、中成藥及天然產(chǎn)物的分析研究及質(zhì)量控制中，被測(cè)物質(zhì)常常不具備發(fā)色基團(tuán)，紫外吸收極弱，甚至沒(méi)有紫外吸收，如皂苷類(lèi)、內(nèi)酯類(lèi)、糖類(lèi)等化合物。胡瀚文等［8］建立了HPLC-CAD測(cè)定大葉三七葉中人參皂苷Rb1含量的方法，并與以DAD作為檢測(cè)器的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行了對(duì)比，結(jié)果表明CAD檢測(cè)器具有更穩(wěn)定的基線(xiàn)和更高的靈敏度。劉可等［9］采用HPLC-CAD建立了一種準(zhǔn)確、快速、高效的測(cè)定遠(yuǎn)志藥材中細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷含量的方法，并對(duì)方法學(xué)參數(shù)進(jìn)行了考查。南易等［10］建立了HPLC-CAD同時(shí)對(duì)知母中芒果苷和知母皂苷BⅡ進(jìn)行含量測(cè)定的方法，此前由于芒果苷和知母皂苷BⅡ的結(jié)構(gòu)差異，知母中這兩種成分要分別采用DAD和ELSD檢測(cè)器進(jìn)行測(cè)定。同時(shí)，在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)CAD檢測(cè)器的靈敏度明顯高于ELSD檢測(cè)器。沈建偉等［11］從溶劑補(bǔ)償流速、柱溫箱溫度、霧化溫度三個(gè)角度，對(duì)柱后補(bǔ)償電噴霧檢測(cè)器測(cè)定黃芪甲苷含量的方法進(jìn)行了探索，最終確定最佳色譜條件為采用0.4 ml/min流速的乙腈進(jìn)行補(bǔ)償，同時(shí)將柱溫箱溫度設(shè)為30℃，霧化溫度設(shè)為30℃。劉麗娜等［12］采用HPLC-CAD技術(shù)建立了同時(shí)測(cè)定銀杏葉提取物中白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯C、銀杏內(nèi)酯A和銀杏內(nèi)酯B含量的方法，所建方法各項(xiàng)方法學(xué)參數(shù)良好，與ELSD檢測(cè)器、RID檢測(cè)器的測(cè)定結(jié)果相比，CAD檢測(cè)器的靈敏度最高。白鋼鋼等［13］采用HPLC-CAD法對(duì)銀杏葉片、銀杏葉分散片、銀杏葉膠囊和銀杏葉滴丸等18批銀杏葉制劑中4種萜類(lèi)內(nèi)酯類(lèi)成分的含量進(jìn)行測(cè)定，該方法操作簡(jiǎn)便，靈敏度高，準(zhǔn)確度、重復(fù)性均良好，各項(xiàng)方法學(xué)參數(shù)符合要求。王瑩等［14］分別采用ELSD檢測(cè)器、CAD檢測(cè)器建立了注射用益氣復(fù)脈（凍干）中果糖、葡萄糖、蔗糖和麥芽糖的含量測(cè)定方法，并對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行了分析。同時(shí)研究中發(fā)現(xiàn)，CAD檢測(cè)器的功能參數(shù)（PF）是能否對(duì)糖類(lèi)進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定的關(guān)鍵參數(shù)。Hu等［15］建立了超高效液相色譜與CAD檢測(cè)器聯(lián)用方法（UPLC-CAD）用于同時(shí)測(cè)定太子參中7種低聚糖和蔗糖，該方法各項(xiàng)方法學(xué)參數(shù)良好。試驗(yàn)中還采用液質(zhì)聯(lián)用（UPLC-QTOF）技術(shù)對(duì)不同產(chǎn)地來(lái)源的太子參樣品中所含低聚糖的種類(lèi)進(jìn)行了鑒定。Sebastian等［16］利用HPLC-CAD技術(shù)建立了測(cè)定歐洲龍牙草中14種多酚類(lèi)物質(zhì)的方法，并在試驗(yàn)中觀(guān)察到CAD檢測(cè)器在定量多酚類(lèi)化合物的過(guò)程中存在一定的局限性，需要予以重視。方靈芝等［17］利用HPLC-CAD技術(shù)同時(shí)對(duì)兒童用中成藥小兒解感片中7種黃酮類(lèi)成分的含量進(jìn)行測(cè)定，所建方法準(zhǔn)確度高，重復(fù)性好，線(xiàn)性關(guān)系、回收率、精密度均符合測(cè)定要求。

CAD檢測(cè)器具有寬動(dòng)態(tài)檢測(cè)范圍、高靈敏度和穩(wěn)定性等優(yōu)點(diǎn)，可用于同時(shí)測(cè)定中性、酸性、堿性及兩性物質(zhì)［18］，因此常用于同一藥材或成藥中多種不同性質(zhì)物質(zhì)的同時(shí)測(cè)定。任霞等［19］采用HPLC-CAD建立了甘草中芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖異甘草苷及甘草酸4種成分的含量測(cè)定方法，4種成分的回收率均在97%以上，所建方法準(zhǔn)確高效。羅昌明等［20］應(yīng)用CAD檢測(cè)器測(cè)定了中成藥風(fēng)濕定片中8種指標(biāo)成分的含量，方法學(xué)實(shí)驗(yàn)表明所建方法準(zhǔn)確性、重復(fù)性好，可操作性強(qiáng)，得到了滿(mǎn)意的測(cè)定結(jié)果。

中藥指紋圖譜從“全成分”的角度出發(fā)進(jìn)行中藥的質(zhì)量控制，是中藥道地藥材研究的重要手段，具有系統(tǒng)性、特征性等特點(diǎn)，而能否檢出盡可能多的色譜峰是中藥指紋圖譜是否具有代表性的關(guān)鍵影響因素。由于CAD檢測(cè)器具有響應(yīng)一致性且靈敏度高，現(xiàn)已成為中藥指紋圖譜研究不可或缺的重要技術(shù)手段。Cao等［21］將UPLC-CAD技術(shù)應(yīng)用于中成藥滋腎育胎丸的指紋圖譜及多成分分析研究，試驗(yàn)中選擇了52個(gè)色譜峰作為特征峰用以評(píng)價(jià)16批滋腎育胎丸的相似性。該團(tuán)隊(duì)還利用超高分辨率質(zhì)譜儀鑒定了滋腎養(yǎng)胎丸中的281種化合物的結(jié)構(gòu)。張春泥等［22］利用HPLCCAD技術(shù)對(duì)20批不同來(lái)源、產(chǎn)地的川楝子飲片進(jìn)行成分分析，確定了28個(gè)共有峰，并采用UPLC-QTOF質(zhì)譜技術(shù)對(duì)其中6個(gè)色譜峰進(jìn)行了指認(rèn)和鑒定。通過(guò)與HPLC-UV及HPLC-ELSD獲得的指紋圖譜對(duì)比，發(fā)現(xiàn)CAD檢測(cè)器的靈敏度更高，且所建方法的分離度及各項(xiàng)方法學(xué)參數(shù)良好。研究中采用聚類(lèi)分析、主成分分析等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)獲得的指紋圖譜進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，最終將20批樣品分成三類(lèi)。陳學(xué)松［23］利用HPLC-CAD技術(shù)建立了馬鞭草指紋圖譜的測(cè)定方法，確定了17個(gè)共有峰，并對(duì)其中的熊果酸峰、齊墩果酸峰進(jìn)行了確認(rèn)。試驗(yàn)中通過(guò)優(yōu)化色譜條件使難分離的同分異構(gòu)體熊果酸、齊墩果酸達(dá)到基線(xiàn)分離。2.2 在生化、化學(xué)、抗生素藥物分析中的應(yīng)用

2.2.1 在生化藥物分析中的應(yīng)用 Satoshi等［24］采用HPLC-CAD方法在低濃度范圍內(nèi)對(duì)未進(jìn)行衍生化的19種氨基酸和?；撬徇M(jìn)行了分離及含量測(cè)定。試驗(yàn)結(jié)果表明，在0.1～1.6 nmol范圍內(nèi)各組分線(xiàn)性關(guān)系良好，且方法重復(fù)性好、精密度高。羥甲司坦是一種用于治療慢性阻塞性肺疾病及支氣管哮喘的輔助用藥，其結(jié)構(gòu)可以看作是氨基酸的衍生物，因此羥甲司坦及其結(jié)構(gòu)類(lèi)似物在紫外檢測(cè)器上響應(yīng)強(qiáng)度很低。Oliver等［25］采用反相、陽(yáng)離子交換混合模式與CAD檢測(cè)器聯(lián)用對(duì)羥甲司坦中的雜質(zhì)進(jìn)行了研究，所建方法在0.05%～0.25%和0.10%～0.60%范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好，檢出限可達(dá)到0.03%以下。Daniel等［26］利用HPLCCAD技術(shù)對(duì)多聚唾液酸的鏈長(zhǎng)進(jìn)行了表征，并建立了多聚唾液酸的定量測(cè)定方法。該方法與傳統(tǒng)的經(jīng)衍生化處理熒光檢測(cè)測(cè)定法比較，具有簡(jiǎn)便、快速的特點(diǎn)，且在0.025～15 mg/ml濃度范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好。Helen等［27］利用HPLC-UV-CAD聯(lián)用技術(shù)對(duì)兩種靜脈注射脂質(zhì)乳液型腸外營(yíng)養(yǎng)液（PN）的化學(xué)穩(wěn)定性情況進(jìn)行了研究。試驗(yàn)中通過(guò)測(cè)定樣品中甘油三酯和過(guò)氧化產(chǎn)物4-羥基壬烯醛的量來(lái)監(jiān)測(cè)PN中脂質(zhì)的降解情況，該方法的檢出限、定量限、線(xiàn)性、日內(nèi)及日間精密度等各項(xiàng)方法學(xué)參數(shù)均能滿(mǎn)足測(cè)定要求。

2.2.2 在化學(xué)藥物分析中的應(yīng)用 有些化學(xué)藥物結(jié)構(gòu)中沒(méi)有紫外吸收基團(tuán)或在紫外檢測(cè)器上僅有末端吸收，CAD檢測(cè)器是對(duì)這類(lèi)化學(xué)藥物進(jìn)行分析的重要手段。龍珍等［28］采用親水色譜及CAD檢測(cè)器建立了同時(shí)測(cè)定5種抗病毒藥物的方法，并通過(guò)比較被測(cè)物質(zhì)的峰型、分離選擇性及信號(hào)響應(yīng)，考查不同的色譜模式、檢測(cè)方式對(duì)色譜系統(tǒng)的影響，所建方法實(shí)現(xiàn)了紫外吸收差異大、極性分布范圍廣的5種抗病毒藥物的同時(shí)分析，且方法學(xué)參數(shù)良好。趙慧［29］建立了HPLC-CAD法測(cè)定阿卡波糖膠囊含量，克服了《中國(guó)藥典》［30］中該品種的含量測(cè)定方法靈敏度低、基線(xiàn)不穩(wěn)、氨基柱使用壽命短、柱效下降快、色譜峰峰形差等缺陷，并在試驗(yàn)中考查了采樣頻率和過(guò)濾常數(shù)、霧化溫度、冪率等CAD檢測(cè)器參數(shù)的改變對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。周潔等［31］建立了HPLC-UV-CAD聯(lián)用同時(shí)測(cè)定卡前列素氨丁三醇注射液中主要成分含量的方法，試驗(yàn)中采用反相C18和陽(yáng)離子交換混合模式的色譜柱，紫外檢測(cè)器用于檢測(cè)注射液中的苯甲醇，CAD檢測(cè)器用于檢測(cè)注射液中紫外吸收很弱或沒(méi)有紫外吸收的組分卡前列素和氨丁三醇，方法靈敏準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)便、專(zhuān)屬性強(qiáng)。

某些化學(xué)藥物的有關(guān)物質(zhì)及降解產(chǎn)物不具備紫外吸收基團(tuán)，僅采用常規(guī)的紫外檢測(cè)器無(wú)法全面掌握藥物的穩(wěn)定性情況，CAD檢測(cè)器的使用為此類(lèi)問(wèn)題提供了解決方案。Pramod等［32］建立了HPLC-CAD測(cè)定加巴噴丁及其有關(guān)物質(zhì)的方法，經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證各項(xiàng)方法學(xué)參數(shù)結(jié)果良好，且所建方法與HPLC-MS/MS可以良好兼容。該作者還利用HPLC-MS/MS對(duì)加巴噴丁的酸、堿、氧化、加熱、光照等條件下的主要降解產(chǎn)物結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究及確證。吳川彥等［33］通過(guò)對(duì)比DAD檢測(cè)器與CAD檢測(cè)器專(zhuān)屬性試驗(yàn)結(jié)果，最終建立了HPLC-CAD測(cè)定伐地那非的含量及有關(guān)物質(zhì)的方法，各項(xiàng)方法學(xué)參數(shù)良好。Oliver的科研團(tuán)隊(duì)［34］采用高效液相色譜與CAD檢測(cè)器聯(lián)用對(duì)伊班膦酸鈉的雜質(zhì)情況進(jìn)行了研究，方法中應(yīng)用了疏水C18與強(qiáng)陰離子交換的混合分離機(jī)制。所建方法各項(xiàng)方法學(xué)參數(shù)良好，多批次樣品測(cè)定結(jié)果顯示伊班膦酸鈉中的主要雜質(zhì)為合成的副產(chǎn)物。Xu等［35］采用親水作用色譜柱及CAD檢測(cè)器測(cè)定酒石酸美托洛爾注射液、酒石酸美托洛爾片和琥珀酸美托洛爾緩釋片中美托洛爾降解產(chǎn)物3-異丙基胺基-1，2-丙二醇的量，經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，該方法具有良好的特異性、準(zhǔn)確度和精密度。

CAD檢測(cè)器的應(yīng)用讓使用更加綠色環(huán)保的有機(jī)溶劑如丙酮、乙醇作為流動(dòng)相成為可能，Nevena等［36］以丙酮、乙醇為流動(dòng)相建立了測(cè)定利司培酮及其有關(guān)物質(zhì)的HPLC-CAD方法，試驗(yàn)中利用Derringer函數(shù)統(tǒng)計(jì)方法對(duì)試驗(yàn)條件進(jìn)行篩選和優(yōu)化，方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)表明所建方法符合測(cè)定要求。

2.2.3 在抗生素類(lèi)藥物分析中的應(yīng)用 氨基糖苷類(lèi)和大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物均為常用的抗生素類(lèi)藥物，其結(jié)構(gòu)中都不具備紫外吸收基團(tuán)，難以使用常規(guī)的紫外檢測(cè)器進(jìn)行分析。在此類(lèi)藥物的定量測(cè)定、降解雜質(zhì)及有關(guān)物質(zhì)研究中，CAD檢測(cè)器有著廣泛的應(yīng)用。劉照振等［37］建立了HPLC-CAD測(cè)定鹽酸依替米星注射液中有關(guān)物質(zhì)的方法，并將該方法與ELSD、脈沖安培電化學(xué)檢測(cè)器（PAD）的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行了對(duì)比。結(jié)果表明采用CAD檢測(cè)器，各色譜峰的分離度及檢測(cè)靈敏度較ELSD高，各有關(guān)物質(zhì)測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性較PAD好。Arianne等［38］建立了阿米卡星的HPLC-CAD測(cè)定方法并進(jìn)行了方法學(xué)驗(yàn)證，該方法簡(jiǎn)便快速，避免了常規(guī)方法中需進(jìn)行柱后衍生的繁瑣操作，可以達(dá)到每天測(cè)定近200個(gè)樣品的通量。氨甲基膦酸是合成萬(wàn)古霉素衍生物特拉萬(wàn)星的一種關(guān)鍵中間體，但氨甲基膦酸紫外吸收較弱，無(wú)法采用常規(guī)的DAD檢測(cè)器對(duì)其進(jìn)行測(cè)定。顧海芳等［39］采用CAD檢測(cè)器建立了氨甲基膦酸含量測(cè)定方法，并對(duì)所建方法的方法學(xué)參數(shù)進(jìn)行了考查。

Liu等［40］利用HPLC-CAD技術(shù)建立了測(cè)定約沙霉素和麥迪霉素中多種組分的通用可靠的測(cè)定方法，試驗(yàn)中對(duì)高效液相色譜條件和CAD檢測(cè)器參數(shù)均進(jìn)行了優(yōu)化，使各被測(cè)組分得到良好的分離和較高的檢測(cè)靈敏度。所建方法各項(xiàng)方法學(xué)參數(shù)良好，且對(duì)于十六元大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素的分析測(cè)定具有一定的通用性。Wang等［41］還建立了HPLC-CAD測(cè)定十六元大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素白霉素、麥白霉素中降解雜質(zhì)的方法，并分析了降解雜質(zhì)產(chǎn)生的影響因素。利用CAD檢測(cè)器的性能特點(diǎn)解決了不同降解產(chǎn)物因紫外吸收強(qiáng)度差異大而無(wú)法同時(shí)測(cè)定的問(wèn)題，試驗(yàn)結(jié)果顯示，被分析物在2～100μg/ml范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好，低、中、高三水平回收率在98.7%～102.5%，檢出限、定量限分別為5 ng和15 ng，文中還考查了流動(dòng)相中鹽的濃度、pH值以及柱溫對(duì)CAD檢測(cè)器的信號(hào)的影響。

2.3 在藥用輔料分析中的應(yīng)用 藥用輔料在藥物制劑產(chǎn)生恰當(dāng)?shù)闹委熥饔眠^(guò)程中扮演著重要的角色，其質(zhì)量控制也受到越來(lái)越多的重視。一般來(lái)講，藥用輔料尤其是小分子藥用輔料的分子結(jié)構(gòu)比較簡(jiǎn)單，常常不具備紫外吸收基團(tuán)，使得應(yīng)用如紫外檢測(cè)器等常規(guī)檢測(cè)方式對(duì)其進(jìn)行分析十分困難。CAD檢測(cè)器的應(yīng)用為解決此類(lèi)問(wèn)題提供了一種思路。蔗糖、乳糖均為常用藥物輔料，在制劑中作為賦形劑、矯味劑等。孫亞靈等［42］建立了蔗糖及其有關(guān)物質(zhì)的HPLC-CAD測(cè)定方法，試驗(yàn)中考查了CAD檢測(cè)器關(guān)鍵參數(shù)霧化溫度、采集頻率、過(guò)濾常數(shù)以及冪率對(duì)信號(hào)響應(yīng)的影響。孫亞飛等［43］建立了HPLC-CAD測(cè)定乳糖含量及其有關(guān)物質(zhì)的方法，方法學(xué)試驗(yàn)表明在1.0～100.4μg/ml范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好，檢出限、定量限約為8 ng和20.08 ng。試驗(yàn)中還觀(guān)察到所建方法較原方法色譜柱的耐用性有了很大提高。尿素作為藥用輔料在制劑中主要作為透皮吸收劑及助溶劑。趙恂等［44］采用親水作用色譜柱、CAD檢測(cè)器建立了尿素含量及有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定方法，研究中利用所建方法對(duì)6批尿素樣品進(jìn)行了含量測(cè)定，并與凱氏定氮法的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行了比較。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，所建方法各項(xiàng)方法學(xué)參數(shù)良好，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

磷脂及其衍生物由于其獨(dú)特的特性，是脂質(zhì)體藥物傳遞系統(tǒng)的重要組成部分。Florian等［45］建立了超高效液相色譜DAD檢測(cè)器、CAD檢測(cè)器聯(lián)用同時(shí)檢測(cè)大豆來(lái)源的氫化L-α-磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿等22種天然及合成脂質(zhì)、帶電磷脂、親脂熒光標(biāo)記物及其降解產(chǎn)物的方法。所建方法各項(xiàng)方法學(xué)參數(shù)良好，研究者用該方法檢測(cè)布比卡因脂質(zhì)體的光降解情況。

表面活性劑是制藥工業(yè)中常用的輔料種類(lèi)，其中的非離子型表面活性劑常常為聚合物。由于聚合物往往不具備單一分子量，成分組成具有多分散性，要對(duì)此類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行量化，就需要具有響應(yīng)一致性的通用型檢測(cè)器，CAD檢測(cè)器成為了很好的選擇。Christiane等［46］利用HPLC-CAD方法對(duì)凝膠基質(zhì)類(lèi)乳化劑進(jìn)行了研究，所建方法可以同時(shí)分離、分析13種凝膠基質(zhì)類(lèi)乳化劑及其前體化合物，如聚乙二醇、聚山梨酯、硬脂酸酯、聚氧乙烯醚。該方法重現(xiàn)性好、專(zhuān)屬性高，同時(shí)與液質(zhì)聯(lián)用儀有很好的兼容性。Steffen等［47］在測(cè)定聚山梨酯20（PS20）、聚山梨酯80（PS80）及其降解產(chǎn)物含量時(shí)，研究比較了熒光膠束法、高效液相電噴霧檢測(cè)法和高效液相蒸發(fā)光散射檢測(cè)法等三種定量分析方法定量行為的差異。試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)由于三種測(cè)定方法的原理各不相同，對(duì)PS20、PS80及其降解產(chǎn)物的定量結(jié)果存在較大差異，同時(shí)由于PS80結(jié)構(gòu)中疏水基團(tuán)比例更高，使其定量準(zhǔn)確度更加依賴(lài)于測(cè)定方法的選擇。Alizee等［48］首先利用親水色譜柱半制備色譜儀分離制備了11種非離子型表面活性劑聚氧乙烯脂肪醇醚的同系物，并利用CAD檢測(cè)器測(cè)定其在100～500 mg/kg的濃度范圍內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的斜率，用以研究CAD檢測(cè)器在同系物檢測(cè)中的響應(yīng)一致性。試驗(yàn)結(jié)果顯示在檢測(cè)此類(lèi)物質(zhì)時(shí)，CAD檢測(cè)器的響應(yīng)一致性出現(xiàn)了偏差，研究者分析可能是受被測(cè)物質(zhì)電離程度的影響，具體原因還需進(jìn)一步研究。

CAD作為一種新型檢測(cè)器在各類(lèi)藥物的分析研究領(lǐng)域發(fā)揮越來(lái)越多的作用，也逐漸被越來(lái)越多的研究人員熟悉，應(yīng)用前景十分廣闊。有研究［49］利用HPLC-CAD技術(shù)進(jìn)行葡萄糖胺的人體藥代動(dòng)力學(xué)研究，CAD檢測(cè)器靈敏度高的特性可以滿(mǎn)足人體藥代動(dòng)力學(xué)研究的要求。在食品研究領(lǐng)域［50］，采用UPLCCAD技術(shù)通過(guò)測(cè)定橄欖油中三酰甘油的分布情況，結(jié)合統(tǒng)計(jì)分析方法來(lái)辨別特級(jí)初榨橄欖油中是否摻假，該方法相對(duì)于傳統(tǒng)的脂肪酸和甾醇分析法既方便快捷又節(jié)約成本。雖然也有使用局限性的相關(guān)報(bào)道［48］，但CAD檢測(cè)器仍是對(duì)多組分樣品進(jìn)行全面分析的重要補(bǔ)充手段，在藥物分析領(lǐng)域也將發(fā)揮更大的作用。