不同種類(lèi)糕點(diǎn)在不同溫度條件影響下的微生物檢驗(yàn)

王言爽，丁世杰，連 威

（威海市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，山東威海 264200）

預(yù)包裝糕點(diǎn)被污染可能出現(xiàn)在生產(chǎn)加工、運(yùn)輸和儲(chǔ)存過(guò)程中，散裝糕點(diǎn)被污染可能出現(xiàn)在加工過(guò)程及售賣(mài)過(guò)程中。在我國(guó)，夏季溫度南北差異大，糕點(diǎn)如不及時(shí)食用，則容易發(fā)生變質(zhì)。微生物是判斷食品新鮮程度的重要指標(biāo)，常見(jiàn)的微生物指標(biāo)主要有菌落總數(shù)、大腸菌群和霉菌。其中，黃曲霉毒素感染狀況較為嚴(yán)重，食用產(chǎn)生霉變后的糧食可引起急性或慢性中毒，長(zhǎng)期食用甚至能引起癌癥[1]。霉菌會(huì)產(chǎn)生毒素，霉菌毒素對(duì)產(chǎn)品的污染已經(jīng)被世界衛(wèi)生組織列為食源性疾病的重要來(lái)源[2-3]。適宜的含水量、溫度和充足的氧氣都會(huì)影響細(xì)菌、霉菌生長(zhǎng)和霉菌毒素的產(chǎn)生[4-5]。釀酒酵母是乙醇生產(chǎn)的最常用的發(fā)酵菌株，一般無(wú)毒[6]。本文主要對(duì)糕點(diǎn)儲(chǔ)存過(guò)程中的儲(chǔ)存溫度和糕點(diǎn)本身性質(zhì)對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響進(jìn)行有針對(duì)性探究，為消費(fèi)者提供相應(yīng)的衛(wèi)生安全操作指導(dǎo)，減少食源性疾病的發(fā)生。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

來(lái)自5家商店的不同類(lèi)型預(yù)包裝糕點(diǎn)，包括有餡料產(chǎn)品5批（編號(hào)：A1～A5）、無(wú)餡料產(chǎn)品5批（編號(hào)：B1～B5），其中A1、A2、B1、B2為保質(zhì)期較短產(chǎn)品，共計(jì)10批次。

生理鹽水，平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（Plate Count Agar，PCA），結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂（Violet Red Bile Agar，VRBA），孟加拉紅瓊脂，煌綠乳糖膽鹽肉湯（Brilliant Green Lactose Bile Broth，BGLB）。

1.2 儀器與設(shè)備

0.01 g天平；加熱板；高壓鍋；恒溫水浴鍋；拍擊式均質(zhì)器；渦旋振蕩器；立式壓力蒸汽滅菌器；恒溫培養(yǎng)箱等。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

根據(jù)檢驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)操作，其中菌落總數(shù)按照GB 4789.2—2016國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)；大腸菌群按照GB 4789.3—2016（第二法）進(jìn)行檢驗(yàn)；霉菌按照GB 4789.15—2016（第一法）準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)，將所購(gòu)買(mǎi)的產(chǎn)品分別置于22 ℃和40 ℃放置7 d后對(duì)產(chǎn)品微生物含量進(jìn)行檢驗(yàn)檢測(cè)。

菌落總數(shù)：選取菌落數(shù)在30～300 CFU/平板，無(wú)蔓延菌落生長(zhǎng)的平板計(jì)數(shù)菌落總數(shù)。低于30 CFU的平板記錄具體菌落數(shù)，大于300 CFU的平板可記錄為多不可計(jì)。每個(gè)稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)。

大腸菌群：平板選取菌落15～150 CFU的平板，分別計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的典型和可疑大腸菌群菌落（如菌落直徑較典型菌落?。５湫途錇樽霞t色，菌落周?chē)屑t色的膽鹽沉淀環(huán)，菌落直徑為0.5 mm或更大，最低稀釋度平板低于15 CFU的記錄具體菌落數(shù)。從VRBA平板上挑取10個(gè)不同類(lèi)型的典型和可疑菌落，少于10個(gè)菌落的挑取全部典型和可疑菌落，分別移種于BGLB肉湯管內(nèi)，（36±1）℃培養(yǎng)24～48 h，觀察產(chǎn)氣情況。凡BGLB肉湯管產(chǎn)氣，即可報(bào)告為大腸菌群陽(yáng)性。

霉菌：選取菌落數(shù)10～150 CFU/平板，霉菌蔓延生長(zhǎng)覆蓋整個(gè)平板可記為菌落蔓延。

2 結(jié)果與分析

本文分別在22 ℃和40℃溫度條件下，針對(duì)不同類(lèi)別的糕點(diǎn)進(jìn)行微生物檢測(cè)，根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，預(yù)包裝糕點(diǎn)中菌落總數(shù)應(yīng)符合n=5、c=2、m= 104CFU/g、M=105CFU/g的要求，大腸菌群應(yīng)符合n=5、c=2、m=10 CFU/g、M=102CFU/g的要求，霉菌應(yīng)符合≤150 CFU/g的要求，其中菌落總數(shù)和大腸菌群的要求不適用于現(xiàn)制現(xiàn)售的以及含有未熟制的發(fā)酵配料或新鮮水果蔬菜的產(chǎn)品，霉菌不適用于添加了霉菌成熟干酪的產(chǎn)品。本次實(shí)驗(yàn)不涉及以上特殊要求，不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

由表1和表2可知，溫度為22 ℃（模擬常溫狀態(tài)）下，糕點(diǎn)可以維持正常狀態(tài)，其菌落總數(shù)、大腸菌群以及霉菌無(wú)明顯增殖，溫度為40 ℃（模擬高溫狀態(tài)）下，大腸菌群無(wú)明顯變化，其結(jié)果均＜10 CFU/g，而菌落總數(shù)較常溫狀態(tài)下數(shù)值明顯增多，部分菌落總數(shù)呈現(xiàn)百倍增長(zhǎng)；霉菌總數(shù)較常溫狀態(tài)下明顯增多，部分超出標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定限值，且有餡料糕點(diǎn)菌落總數(shù)和霉菌總數(shù)在高溫狀態(tài)下增長(zhǎng)明顯變多，無(wú)餡料糕點(diǎn)菌落總數(shù)部分有增長(zhǎng)，大多無(wú)明顯增殖，以上結(jié)果表明，高溫和水分對(duì)糕點(diǎn)中的菌落總數(shù)和霉菌有較大影響。

表1 A1～A5樣品菌落總數(shù)、大腸菌群和霉菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表2 B1～B5樣品菌落總數(shù)、大腸菌群和霉菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)論

菌落總數(shù)可以用來(lái)衡量食品被細(xì)菌污染的情況及其衛(wèi)生質(zhì)量，容易受到外界因素溫度和水分的影響，檢測(cè)結(jié)果差異較大[7]；大腸菌群為糞便污染指標(biāo)菌，大腸菌群計(jì)數(shù)結(jié)果的高低能夠表明糞便的污染程度，從而反映對(duì)人體健康危害性的大小，以此來(lái)評(píng)價(jià)食品的衛(wèi)生情況[8]；霉菌是食品衛(wèi)生質(zhì)量評(píng)價(jià)的指標(biāo)菌，可以判斷食品被污染的程度[9]。霉菌一旦進(jìn)入食品后可使食品發(fā)生變質(zhì)、霉變，部分霉菌污染食品后還能產(chǎn)生霉菌毒素，人類(lèi)誤食后會(huì)導(dǎo)致霉菌中毒[10]。本次檢測(cè)的樣品中大腸菌群檢測(cè)結(jié)果均＜ 10 CFU/g，符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，受外界調(diào)節(jié)因素影響不大。而高溫和水分對(duì)糕點(diǎn)中的菌落總數(shù)和霉菌有較大影響，有餡料比無(wú)餡料糕點(diǎn)更易變質(zhì)。因此，在購(gòu)買(mǎi)有餡糕點(diǎn)后，應(yīng)盡早食用，如不能及時(shí)食用，必須按照儲(chǔ)存條件進(jìn)行儲(chǔ)存。可在0～4 ℃冰箱中冷藏暫存，發(fā)現(xiàn)明顯菌落、霉菌生長(zhǎng)時(shí)，不可 食用。