GnRHa聯(lián)合超聲射頻對子宮肌瘤患者的影響及作用機(jī)制

陳茜松， 柴 靜， 王 丹， 高淑鳳， 鄭麗莉

(唐山市婦幼保健院，河北省唐山市063000)

子宮肌瘤是女性生殖器常見的良性腫瘤，可導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局，亦是子宮切除的主要原因，對女性身心健康造成一定程度的不利影響。目前臨床對于子宮肌瘤多采取藥物治療和外科手術(shù)治療，藥物治療起效慢、治療時間長,而超聲射頻是一種安全有效的微創(chuàng)手術(shù)，療效好，創(chuàng)傷小，安全性高，有助于促進(jìn)子宮肌瘤患者術(shù)后恢復(fù)[1-2]。目前國內(nèi)外少見報(bào)道促性腺激素釋放激素激動劑(gonadotropin releasing hormone agonist，GnRHa)聯(lián)合超聲射頻對子宮肌瘤患者血清單核細(xì)胞趨化因子-1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)、存活蛋白(Survivin，Survivin)、腫瘤特異性生長因子(tumor specific growth factors，TSGF)水平的影響，故本文對此進(jìn)行了研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料和方法

1.1 研究對象

選取2019年2月—2021年2月本院子宮肌瘤患者118例，分層抽樣法分為超聲射頻組(n=57)和聯(lián)合組(n=61)，兩組一般資料均衡可比(P>0.05；表1)。研究方案經(jīng)本院倫理委員會批準(zhǔn)，患者及家屬均知情且簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《子宮肌瘤的診治中國專家共識》[3]中子宮肌瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)；未出現(xiàn)子宮內(nèi)膜惡性病變；手術(shù)指征不明顯；近1年內(nèi)月經(jīng)周期正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：中重度貧血，即HGB≤90 g/dL；妊娠、準(zhǔn)備妊娠或哺乳期；近1個月內(nèi)接受其他臨床研究；心血管、內(nèi)分泌、消化、造血系統(tǒng)的慢性疾病；惡性腫瘤；精神疾病。

表1 超聲射頻組、聯(lián)合組一般資料比較

1.2 治療方法

超聲射頻組采用超聲射頻進(jìn)行治療，術(shù)前10 min肌肉注射地西泮，對患者外陰進(jìn)行常規(guī)消毒、暴露宮頸，探針借助B超插入引導(dǎo)，用以確認(rèn)肌瘤位置、數(shù)目、大小，將自凝刀經(jīng)引導(dǎo)置入，先穿入瘤體的一個方向、再從另一方向穿入，隨后進(jìn)行消融，自凝刀在超聲監(jiān)視下再次對另一部位肌瘤進(jìn)行凝固，直至肌瘤完全凝固，對于有蒂的黏膜下肌瘤，則需采用自凝刀在肌瘤低部進(jìn)行凝固，在超聲監(jiān)視下用自凝刀反復(fù)凝固肌瘤蒂部直至完全切斷蒂部，夾出肌瘤，術(shù)后給予止血、抗生素3～5天預(yù)防出血和感染。聯(lián)合組在超聲射頻組基礎(chǔ)上，聯(lián)合GnRHa即亮丙瑞林進(jìn)行治療，3.6 mg/次，每28天皮下注射1次，共注射3次。亮丙瑞林購自北京博恩特藥業(yè)有限公司(國藥準(zhǔn)字H20093809，3.75 mg/瓶)。

1.3 臨床療效和子宮肌瘤體積觀察

將治療效果分為顯效、有效和無效。顯效：臨床癥狀消失，子宮肌瘤體積縮小≥50%且子宮無異常出血；有效：臨床癥狀部分緩解，子宮肌瘤體積縮小<50%且子宮異常出血情況有所緩解；無效：未達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)。顯效加有效為總有效。

計(jì)算子宮肌瘤體積，子宮肌瘤體積=π×a×b×c/6，其中a、b、c分別代表肌瘤三維界面直徑；觀察子宮肌瘤縮小率，子宮體積縮小率(%)=(治療前體積-治療后體積)/治療前體積×100%。

1.4 酶聯(lián)免疫吸附法檢測內(nèi)分泌功能指標(biāo)

收集兩組清晨空腹靜脈血3 mL，3 000 r/min，離心15 min，提取上清液，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測治療前內(nèi)分泌指標(biāo)孕激素(progesterone，P)、雌二醇(estradiol，E2)、促卵泡素(follicle stimulating hormone，F(xiàn)SH)及血清指標(biāo)MCP-1、Survivin、TSGF水平。制作標(biāo)準(zhǔn)品，稀釋樣品；在反應(yīng)孔中加入稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品100 μL/孔，35 ℃、濕育2 h；將反應(yīng)板洗滌3次后，加入抗體工作液100 μL/孔，35 ℃、濕育45 min；將100 μL/孔TMB溶液加入反應(yīng)孔并于35 ℃下反應(yīng)45 min，加入終止液以終止反應(yīng)，采用酶標(biāo)儀檢測上述指標(biāo)。

1.5 實(shí)時熒光定量PCR檢測微小RNA指標(biāo)

收集兩組清晨空腹靜脈血3 mL，3 000 r/min，離心15 min，提取上清液，采用實(shí)時熒光定量法檢測治療前、后微小RNA-197(miR-197)、微小RNA-214-3p(miR-214-3p)水平。將1 mL Trizol加入血清樣本取總RNA并檢測其純度和濃度，提取2 μg總RNA并加入內(nèi)參U6及目的小分子RNA miR-197、miR-214-3p逆轉(zhuǎn)錄引物，42 ℃ 15 min，85 ℃ 5 s，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA；熒光定量PCR的循環(huán)參數(shù)設(shè)定為95 ℃ 1 s，然后95 ℃ 5 s，60 ℃ 31 s，40個循環(huán)，使用Primer 5.0軟件對引物序列進(jìn)行設(shè)計(jì)，Ct值(2-△△Ct)法表示miR-197、miR-214-3p水平。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 兩組臨床療效和子宮肌瘤體積的比較

兩組肌瘤體積治療后均小于治療前，且聯(lián)合組治療后小于超聲射頻組治療后；聯(lián)合組肌瘤體積縮小率大于超聲射頻組(P<0.05；表2)。聯(lián)合組治療總有效率高于超聲射頻組(P<0.05；表2)。

表2 兩組臨床療效和子宮肌瘤體積的比較

2.2 兩組內(nèi)分泌功能指標(biāo)的比較

兩組內(nèi)分泌功能指標(biāo)治療后均低于治療前，且聯(lián)合組治療后低于超聲射頻組治療后(P<0.05；表3)。

表3 兩組內(nèi)分泌功能指標(biāo)的比較

2.3 兩組微小RNA的比較

兩組微小RNA指標(biāo)治療后高于治療前，且聯(lián)合組治療后高于超聲射頻組治療后(P<0.05；表4)。

表4 兩組微小RNA的比較

2.4 兩組MCP-1、Survivin、TSGF的比較

兩組血清MCP-1、Survivin、TSGF水平治療后低于治療前，且聯(lián)合組治療后低于超聲射頻組治療后(P<0.05；表5)。

表5 兩組MCP-1、Survivin、TSGF的比較

3 討 論

子宮是女性主要生殖器官之一，亦是胚胎發(fā)育成熟的重要場所，子宮并發(fā)子宮肌瘤對女性生理健康、心理健康造成不良影響，降低女性日常生存質(zhì)量。子宮肌瘤患者術(shù)前應(yīng)用GnRHa可有效抑制肌瘤細(xì)胞增殖，促進(jìn)肌瘤細(xì)胞凋亡、縮小肌瘤體積[4]。有研究顯示，亮丙瑞林屬于一種GnRHa中的九肽類，起效迅速，服用藥物后可明顯抑制垂體分泌FSH，進(jìn)而降低卵巢分泌雌、孕激素的能力，發(fā)揮干擾腫瘤生長的作用[5-6]。超聲射頻利用高頻交流電磁場，通過射頻消融自凝刀穿刺到肌瘤組織，自凝刀周圍正負(fù)離子高速振動，產(chǎn)生生物熱作用于腫瘤組織，局部組織溫度高達(dá)80～100 ℃，對肌瘤組織造成不可逆性壞死，且對周圍組織損傷小[7-8]。本研究中，GnRHa聯(lián)合超聲射頻可有效減小子宮肌瘤體積，提高子宮肌瘤患者治療總有效率，其原因可能為GnRHa可通過其藥效抑制肌瘤組織生長，而超聲射頻在超聲引導(dǎo)下有助于發(fā)現(xiàn)微小和隱匿肌瘤、減少肌瘤殘留，通過物理治療使病變組織產(chǎn)生凝固、溶解、壞死、變性、脫落等變化，最后被機(jī)體吸收或排除體外。

臨床研究顯示，子宮肌瘤是一種性激素依賴性良性腫瘤，主要原因?yàn)榇萍に?、孕激素水平不穩(wěn)定，產(chǎn)生較大的波動，其中P、E2、FSH是評價內(nèi)分泌的重要指標(biāo)，當(dāng)內(nèi)分泌出現(xiàn)紊亂時會導(dǎo)致血清P、E2、FSH水平異常升高[9-10]。本研究中，GnRHa聯(lián)合超聲射頻治療后子宮肌瘤患者內(nèi)分泌指標(biāo)(P、E2、FSH)降低程度更為顯著，其原因可能為兩者聯(lián)合發(fā)揮互補(bǔ)作用，通過與機(jī)體P受體有效結(jié)合，進(jìn)而抑制卵泡發(fā)育，降低孕酮活性，促進(jìn)黃體溶解，使得瘤體體積縮小。臨床研究顯示，miRNAs在子宮肌瘤以及子宮平滑肌細(xì)胞中廣泛表達(dá)及對腫瘤細(xì)胞的生長具有重要的負(fù)性調(diào)節(jié)作用，且在不同腫瘤中表達(dá)不同，其中miR-197在乳腺癌、甲狀腺濾泡癌中表達(dá)異常，且對腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為具有調(diào)控作用[11]。范文秀等[12]研究發(fā)現(xiàn)，miR-214-3p在卵巢癌組織中呈異常高表達(dá)，且其表達(dá)升高對卵巢癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移能力具有促進(jìn)作用，為生物治療提供新靶點(diǎn)。本研究顯示，經(jīng)GnRHa聯(lián)合超聲射頻治療后，miR-197和miR-214-3p表達(dá)顯著升高，其原因可能為兩者聯(lián)合使用可使患者肌瘤體積減小，并使肌瘤細(xì)胞增殖、凋亡加快，促使miR-197、miR-214-3p表達(dá)升高，是患者病情及治療的良好觀察指標(biāo)。

MCP-1是CC趨化家族主要成員之一，具有趨化及活化單核巨噬細(xì)胞的功能，其基因啟動子部位存在核因子-κB的結(jié)合位點(diǎn)，若其水平降低，可抑制腫瘤細(xì)胞增殖[13-14]。Survivin是凋亡抑制蛋白家族的新成員，在大多數(shù)腫瘤組織中可見其表達(dá)，其機(jī)制為Survivin通過與細(xì)胞周期依賴性蛋白CDK4結(jié)合，可發(fā)揮啟動細(xì)胞周期、促進(jìn)細(xì)胞增殖分裂、抑制細(xì)胞凋亡等多種作用[15]。TSGF是經(jīng)典的特異性內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂原和血管通透性誘導(dǎo)因子，可有效促進(jìn)腫瘤血管增生，導(dǎo)致子宮肌瘤的發(fā)生、發(fā)展[16]。本研究中，GnRHa聯(lián)合超聲射頻可有效降低子宮肌瘤患者血清指標(biāo)MCP-1、Survivin、TSGF水平，抑制子宮肌瘤進(jìn)展，其原因可能為兩種治療方式聯(lián)合使用可下調(diào)MCP-1、Survivin、TSGF，激活單核巨噬細(xì)胞功能，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞增殖，抑制腫瘤血管增生，進(jìn)而縮小肌瘤體積，延緩了子宮肌瘤的發(fā)展。

綜上所述，本文研究結(jié)果顯示，GnRHa聯(lián)合超聲射頻可有效改善子宮肌瘤患者肌瘤體積，降低血清MCP-1、Survivin、TSGF水平，升高微小RNA指標(biāo)，是治療子宮肌瘤的有效方法，值得臨床推廣應(yīng)用，但應(yīng)該嚴(yán)格遵守射頻消融的適應(yīng)證、禁忌證及手術(shù)時的操作規(guī)范。