感染期血清外泌體在伯氏瘧原蟲紅內(nèi)期肝損傷中的作用

黃麗，張鑫，黎廣智，王永飛，李小波，金小寶，黃博，3*

（1.廣東藥科大學(xué)廣東省生物活性藥物研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510006；2.暨南大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院，廣東 廣州 510632；3.廣東藥科大學(xué)生命科學(xué)與生物制藥學(xué)院，廣東 廣州 510006）

瘧疾是全球三大傳染病之一，廣泛流行于熱帶、亞熱帶及溫帶邊緣等地區(qū)，其嚴(yán)重影響流行區(qū)人口的健康和生命，并長期制約當(dāng)?shù)厣鐣?huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展。據(jù)WHO《World Malaria Report 2021》，2020 年全球瘧疾發(fā)病人數(shù)估計(jì)2.41 億，死亡人數(shù)估計(jì)62.7萬［1］。瘧疾的臨床癥狀復(fù)雜多變，輕者出現(xiàn)發(fā)燒、出汗和寒冷等，重者出現(xiàn)急性腎損傷、肺水腫、黃疸、貧血、甚至死亡［2］。肝臟參與瘧疾感染進(jìn)程，一方面作為紅外期肝細(xì)胞內(nèi)裂體增殖所必需的器官，另一方面作為紅內(nèi)期肝臟中的紅細(xì)胞內(nèi)裂體增殖所致宿主致病和死亡的主要參與器官［3］。瘧疾感染導(dǎo)致的肝損傷是一種發(fā)生率較高、但尚未受到足夠重視的并發(fā)癥［4］。臨床研究發(fā)現(xiàn)，瘧疾患者的肝臟出現(xiàn)不同程度的損傷（包括肝腫大、黃疸、轉(zhuǎn)氨酶升高和門脈內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤等）、甚至肝功能衰竭和肝細(xì)胞壞死等［4-5］。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，感染鼠源性瘧原蟲（P. bergheiANKA）的小鼠肝臟出現(xiàn)充血、瘧色素沉積、肝細(xì)胞空泡樣變性和萎縮以及微血管堵塞等［6］。盡管已有研究提示瘧疾肝損傷與高蟲荷、氧化應(yīng)激、瘧色素沉積、炎癥細(xì)胞浸潤和免疫細(xì)胞功能異常相關(guān)［5］，然而其損傷機(jī)制尚未完全闡明。瘧原蟲具有復(fù)雜的生活史和多種免疫逃避策略等獨(dú)特的生物學(xué)特征，深入研究瘧原蟲-宿主間的相互作用將有助于闡明瘧疾肝損傷的致病機(jī)理，為探索新的治療方案或研發(fā)有效的瘧疾疫苗提供新方向。

外泌體（exosome）是一種細(xì)胞分泌到胞外的、直徑為30～100 nm 的多囊泡體，其攜帶lncRNAs、microRNAs、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等多種成分，介導(dǎo)細(xì)胞間短/長距離的通訊并調(diào)控細(xì)胞功能［7］。越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，包括瘧原蟲、陰道毛滴蟲、弓形蟲和錐蟲等多種寄生蟲均可分泌外泌體［8］。寄生蟲源性外泌體具有傳遞毒力因子、抗藥基因和分化因子功能，在寄生蟲的繁殖和致病，調(diào)控宿主免疫應(yīng)答等方面發(fā)揮重要作用，從而實(shí)現(xiàn)寄生蟲-寄生蟲間和寄生蟲-宿主之間的相互作用等［8］。已有研究表明，惡性瘧原蟲（P.falciparum）感染人體后，感染瘧原蟲紅細(xì)胞（infectedred blood cells，iRBC）分泌的外泌體數(shù)量明顯增加，且與患者的病理損傷程度呈正相關(guān)［9］，提示瘧原蟲源性外泌體可能參與瘧原蟲侵襲和瘧疾發(fā)病過程。然而，Martin-Jaular 等［10］發(fā)現(xiàn)感染約氏瘧原蟲（P. yoelii17X）小鼠血漿外泌體可以誘導(dǎo)小鼠機(jī)體產(chǎn)生高水平的IgG2a和IgG2b，進(jìn)而增強(qiáng)小鼠抵抗P.yoelli17X感染能力?？梢?，瘧原蟲源性外泌體在瘧原蟲-宿主間的相互作用中的生物學(xué)功能復(fù)雜，其在紅內(nèi)期肝損傷中作用的報(bào)道較少。因此，本文利用P.bergheiANKA 感染昆明小鼠模型，研究感染P. bergheiANKA 小鼠血清外泌體對(duì)紅內(nèi)期肝組織病理損傷的調(diào)節(jié)作用，并探討分析其潛在的致病機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和蟲株

雌性昆明小鼠，6 周齡，體質(zhì)量約20 g，由廣東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK（粵）2021-0093。小鼠飼養(yǎng)于廣東藥科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，采用SPF 級(jí)小鼠標(biāo)準(zhǔn)飼料和高壓滅菌水喂養(yǎng)。P. bergheiANKA 株由廣州中醫(yī)藥大學(xué)科技產(chǎn)業(yè)園有限公司惠贈(zèng)，并于液氮中冷凍長期保存。

1.2 感染期血清外泌體的提取和鑒定

共計(jì)12 只雌性昆明小鼠經(jīng)腹腔注射1.0×106個(gè)P.bergheiANKA 寄生紅細(xì)胞（iRBC）/只。當(dāng)紅細(xì)胞原蟲感染率達(dá)約40%時(shí)，乙醚麻醉小鼠，眼球取全血，1000 r/min離心3 min收集血清。按照血清型總外泌體分離試劑盒說明書（No. 4478360#, Invitro‐gen）富集感染小鼠的血清外泌體。具體步驟如下：血清經(jīng)3000 r/min 離心30 min，棄沉淀。將5 mL 外泌體分離試劑加入10 mL 上清液，12000 r/min 離心30 min，收集外泌體沉淀，并加入PBS（50 μL）重懸沉淀。TEM 負(fù)染色觀察外泌體的形態(tài)：將5 μL分離后的感染小鼠血清外泌體重懸于PBS（40 μL）中，渦旋均勻。取10 μL 重懸液滴加銅網(wǎng)上室溫沉淀5 min，接著滴加10 μL 乙酸雙氧鈾溶液銅網(wǎng)上染色2 min，F(xiàn)EI Tecnai G2 Sprit Twin TEM（FEI, USA）觀察。Western blot 檢測感染期血清外泌體表面的CD9 和CD63 表達(dá)：BCA 法測定外泌體或感染紅細(xì)胞裂解物的蛋白濃度，50 μg 蛋白（外泌體或感染紅細(xì)胞裂解物）依次進(jìn)行SDS-PAGE電泳、轉(zhuǎn)膜、5%脫脂奶粉封閉、一抗（anti-mouse CD9，稀釋倍數(shù)1∶1000；antimouse CD63，稀釋倍數(shù)1∶1000；BD Biosciences,USA）4 ℃孵育過夜、二抗（anti-mouse antibodies conjugated with horseradish peroxidase，稀釋倍數(shù)1∶5000；Jackson Immunoresearch Labs Inc., USA）室溫孵育1 h、ECL A/B 混合液顯色、曝光、凝膠圖像保存，應(yīng)用Alpha 軟件分析目標(biāo)蛋白的灰度值。以β-actin蛋白為內(nèi)參照。

1.3 實(shí)驗(yàn)分組

將48 只雌性昆明小鼠隨機(jī)分為4 組：正常對(duì)照組（即Control 組，8 只）、外泌體組（即Exos 組，8 只，每天每只鼠經(jīng)尾靜脈注射50 μg 外泌體）、感染組（即Pb組，16 只，每只鼠經(jīng)腹腔注射106個(gè)iRBC）和感染+外泌體組（即Pb+Exos 組，16 只，每只鼠腹腔感染106個(gè)iRBC，且感染后每天每只鼠經(jīng)尾靜脈注射50 μg 外泌體）。當(dāng)小鼠呈現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)、癱瘓、抽搐、昏迷等神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙的癥狀時(shí)，且在24 h內(nèi)死亡，即可判斷為腦型瘧模型小鼠。記錄各組小鼠的腦型瘧發(fā)生率和生存時(shí)間。薄血膜吉姆薩染色法計(jì)數(shù)紅細(xì)胞原蟲感染率：取尾靜脈血制備薄血膜片，經(jīng)甲醇固定，吉姆薩染色，流水沖洗和自然晾干，在光學(xué)顯微鏡（×1000）下血球計(jì)數(shù)儀檢測紅細(xì)胞原蟲感染率。紅細(xì)胞原蟲感染率=100%×iRBC數(shù)/紅細(xì)胞總數(shù)。

1.4 H&E染色觀察肝臟病理變化

于感染后第9 天，取各組小鼠肝組織，10%（φ）中性多聚甲醛溶液中固定48 h，經(jīng)梯度乙醇脫水、常規(guī)石蠟包埋后，切成5 μm 厚度的切片。經(jīng)蘇木素-伊紅（H&E）染色后光學(xué)顯微鏡下(Leica, Germany)觀察肝組織病理學(xué)變化情況（×100），并計(jì)算肝組織的炎癥點(diǎn)密度（即炎癥點(diǎn)/視野）。

1.5 免疫組化染色與觀察肝組織M1 型巨噬細(xì)胞標(biāo)識(shí)物iNOS表達(dá)

感染后第9 天的肝組織切片依次經(jīng)二甲苯脫蠟，梯度乙醇復(fù)水，檸檬酸鹽緩沖溶液微波爐加熱修復(fù)抗原，3.0%H2O2阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，山羊血清室溫封閉，一抗[兔源iNOS 抗體（Affinity，稀釋比1∶200）]4°C孵育過夜，二抗[山羊抗兔IgG（H+L）HRP（Affinity，稀釋比1∶200）]室溫孵育50 min，DAB 顯色，蘇木素復(fù)染，中性樹膠封片，置于普通光學(xué)顯微鏡下（×400）觀察拍照，計(jì)算iNOS 染色陽性細(xì)胞數(shù)目。

1.6 qPCR 檢測肝組織促炎癥/抑炎癥細(xì)胞因子的mRNA表達(dá)量

取各組感染后第9天的肝組織約100 mg置于1 mL Trizol 液中，按照試劑盒說明書提取組織總RNA（No. 9109#, TaKaRa）。按 照PrimeScriptTM1st Strand cDNA Synthesis Kit 說明書（No.6210B#,TaKaRa）將1 μg RNA 逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，使用SYBR?Premix Ex Taq TM（2×）試劑盒方法在CFX96 Touch實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)（BIO-RAD,USA）中測定肝組織促炎癥/抑炎癥細(xì)胞因子的mRNA表達(dá)量。qPCR反應(yīng)體系：1.0 μL的模板cDNA，5.0 μL2×SYBR PremixExTaq，0.5μL上引物，0.5 μL下引物，并加滅菌蒸餾水至10 μL。qPCR 反應(yīng)條件：95 ℃預(yù)變性30 s；95 ℃變性5 s，60 ℃退火20 s，70 ℃延伸5 s，43 個(gè)循環(huán)；70 ℃延伸10 min。促炎癥/抑炎癥細(xì)胞因子和內(nèi)參β-actin 的引物序列見表1。采用2-ΔΔCt法計(jì)算細(xì)胞因子的mRNA相對(duì)表達(dá)量。

表1 qPCR反應(yīng)的基因及其引物序列Table 1 Primer sequences of target genes used for qPCR assays

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用GraphPad Prism 5 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以表示。兩組間比較采用獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)，多組間比較應(yīng)用one-way ANOVA 檢驗(yàn)。采用Log-Rank test 和a time-series analysis test法分別分析兩組間生存時(shí)間（即半數(shù)生存期）和每天紅細(xì)胞原蟲感染率。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 感染期血清外泌體的提取和鑒定

TEM 結(jié)果顯示（圖1A）：感染期血清外泌體呈典型的“杯盤”形態(tài)特征，其顆粒直徑為30～150 nm，與經(jīng)典外泌體結(jié)構(gòu)高度一致；Western blot檢測到感染期血清外泌體的CD9和CD63表達(dá)呈陽性，而感染紅細(xì)胞裂解物罕見或未見CD9和CD63表達(dá)（圖1B）。上述結(jié)果表明：利用血清型總外泌體分離試劑法成功富集感染期血清外泌體。

圖1 感染期血清外泌體的鑒定Figure 1 Characterization of serum-derived exosomes from infected mice

2.2 感染期血清外泌體對(duì)感染小鼠生存時(shí)間、腦型瘧發(fā)生率和紅細(xì)胞原蟲感染率的影響

Control組和Exos組小鼠正常存活，且未見任何異常癥狀和原蟲血癥。然而，Pb組小鼠在感染后第7 天出現(xiàn)死亡，第22 天全部死亡。感染+外泌體組（Pb+Exos）小鼠在第7 天出現(xiàn)死亡，第18 天小鼠全部死亡（圖2A）。Pb組和Pb+Exos 組均發(fā)生腦型瘧模型小鼠，且小鼠出現(xiàn)腦型瘧癥狀時(shí)間均為感染后第7～9 天。與Pb組相比，Pb+Exos 組小鼠的腦型瘧發(fā)生率顯著上調(diào)（27%vs48%，P=0.002，圖2B），而半數(shù)生存期顯著下調(diào)（17.5 dvs11.5 d，P=0.005，圖2A）。薄血膜吉姆薩染色顯示：與Pb組相比，Pb+Exos 組小鼠紅細(xì)胞原蟲感染率在感染后第3～18 天差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖2C）。

圖2 感染期血清外泌體對(duì)感染小鼠的生存時(shí)間（A）、腦型瘧發(fā)生率（B）和紅細(xì)胞原蟲感染率（C）的影響Figure 2 Effect of serum-derived exosomes from infected mice on the survival time (A), cerebral malaria incidence (B), and para‐sitemia(C)in P.berghei ANKA-infected mice

2.3 感染期血清外泌體對(duì)小鼠肝組織病理變化的影響

H&E 染色顯示（圖3）：Control組和Exos組小鼠肝組織結(jié)構(gòu)清晰、正常，肝細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)完整，肝索以中央靜脈為中心呈放射狀分布，罕見或未見炎性細(xì)胞浸潤。然而，Pb組小鼠肝臟結(jié)構(gòu)紊亂，可見大量炎癥細(xì)胞浸潤和未被降解的瘧色素。與Pb組相比，Pb+Exos組小鼠的肝臟壞死區(qū)域顯著增加，伴隨顯著增多的炎性細(xì)胞聚集和浸潤（～12 個(gè)炎癥點(diǎn)/視野vs～30 個(gè)炎癥點(diǎn)/視野，P=0.002），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

圖3 感染期血清外泌體對(duì)感染小鼠肝組織病理損傷的影響Figure 3 Effect of serum-derived exosomes from infected mice on histopathological change of liver tissues in P. berghei ANKAinfected mice(HE,100×)

2.4 感染期血清外泌體對(duì)小鼠肝組織M1 巨噬細(xì)胞極化的影響

免疫組化結(jié)果顯示（圖4）：Control 組或Exos 組的小鼠肝組織罕見或未見M1 型巨噬細(xì)胞標(biāo)記物iNOS 表達(dá)。Pb組小鼠肝組織的iNOS 表達(dá)呈現(xiàn)陽性，且與Control 組相比顯著增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；此外，Pb+Exos 組肝組織M1 型巨噬細(xì)胞極化標(biāo)記物iNOS的表達(dá)水平與Pb組相比顯著增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。上述結(jié)果表明感染期血清外泌體可促進(jìn)感染小鼠肝組織的巨噬細(xì)胞增殖和M1極化。

圖4 感染期血清外泌體對(duì)感染小鼠肝組織M1型巨噬細(xì)胞標(biāo)識(shí)物iNOS表達(dá)的影響（免疫組化，400×）Figure 4 Effect of serum-derived exosomes from infected mice on the expression of iNOS in liver tissues of P. berghei ANKAinfected mice

2.5 感染期血清外泌體對(duì)小鼠肝組織促炎癥/抑炎癥細(xì)胞因子表達(dá)水平的影響

qPCR 檢測顯示（圖5）：Exos組小鼠肝組織的促炎癥細(xì)胞因子（TNF-α、IL-1β和IL-6）和抑炎癥細(xì)胞因子（IL-4 和IL-10）的mRNA 表達(dá)水平與Control組相比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與Control 組相比，Pb組小鼠肝組織TNF-α（P<0.001）、IL-1β（P<0.001）、IL-6（P=0.003）、IL-4（P<0.001）和IL-10（P<0.001）等基因mRNA 表達(dá)水平均顯著上調(diào)。此外，與Pb組相比，Pb+Exos 組小鼠肝組織TNF-α（P=0.003）、IL-1β（P=0.035）和IL-6（P=0.006）的mNRA表達(dá)水平顯著上調(diào)，而IL-4（P=0.010）和IL-10（P=0.007）表達(dá)水平顯著下調(diào)。

圖5 感染期血清外泌體對(duì)感染小鼠肝組織促炎癥/抑炎癥細(xì)胞因子mRNA表達(dá)水平的影響Figure 5 Effect of serum-derived exosomes from infected mice on the expression of pro-inflammatory/anti-inflammatory cytokine mRNA in liver tissues of P.berghei ANKA-infected mice

3 討論

瘧疾肝損傷是一種發(fā)生率較高、但尚未受到足夠重視的并發(fā)癥，且其損傷機(jī)制尚未完全闡明。作為固有免疫細(xì)胞的重要組成部分，肝組織中的巨噬細(xì)胞嚴(yán)格調(diào)控瘧原蟲的感染進(jìn)程，一方面非特異性吞噬、清除感染瘧原蟲的紅細(xì)胞和抑制瘧原蟲釋放到血液，另一方面因其異常激活誘導(dǎo)過度的炎癥反應(yīng)加重紅內(nèi)期肝組織的病理損傷[11]。已有研究表明肝組織中的CD68+陽性巨噬細(xì)胞可作為子孢子突破竇周屏障實(shí)現(xiàn)侵襲肝臟的主要載體之一[12]。越來越多的研究證實(shí)巨噬細(xì)胞分化為M1 型（促炎癥作用）和M2 型（抑炎癥及促修復(fù)作用），而一旦巨噬細(xì)胞M1/M2 型極化失衡，將導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸[13-14]。感染P.bergheiANKA的小鼠小腸組織的CD68+陽性巨噬細(xì)胞的數(shù)量明顯升高，而巨噬細(xì)胞M1 型極化則加重感染小鼠的小腸組織病理損傷[15]。然而，關(guān)于巨噬細(xì)胞M1 型極化在瘧原蟲紅內(nèi)期肝組織病理損害作用及其調(diào)控因素的相關(guān)報(bào)道較少見。

盡管Martin-Jaular 等[10]發(fā)現(xiàn)感染P. yoelii17X小鼠血漿外泌體誘導(dǎo)BALB/c 小鼠機(jī)體產(chǎn)生較高水平的IgG2a 和IgG2b，發(fā)揮增強(qiáng)BALB/c 小鼠抵抗P.yoelli17XL 感染的作用。然而，本研究結(jié)果顯示尾靜脈注射感染期血清外泌體后，感染P. bergheiANKA 昆明小鼠的存活時(shí)間顯著縮短、腦型瘧發(fā)生率顯著升高，以及肝組織的病理損傷明顯加重?？梢?，瘧原蟲源性外泌體的生物學(xué)功能復(fù)雜，其損傷或保護(hù)宿主作用可能與瘧原蟲蟲種、宿主遺傳背景和外泌體來源有關(guān)。已有研究證實(shí)激活的M1 型巨噬細(xì)胞產(chǎn)生大量TNF-α、IL-1β和IL-6 等促炎癥因子，而激活M2 型巨噬細(xì)胞后可釋放大量的IL-4 和IL-10 等抑炎癥因子[16]。進(jìn)一步的研究表明TNF-α、IL-1β和IL-6等促炎癥因子，盡管在瘧疾感染早期扮演促進(jìn)殺死瘧原蟲的關(guān)鍵作用，但其過度活化則導(dǎo)致瘧疾的病理損傷[17-18]。此外，IL4 和IL-10 被認(rèn)為是一類可抵抗由Th1細(xì)胞因子驅(qū)動(dòng)的致命瘧疾損傷反應(yīng)的抗炎癥因子[19]。本研究結(jié)果顯示，感染期血清外泌體可上調(diào)肝組織M1 型巨噬細(xì)胞數(shù)量和促炎癥因子（TNF-α、IL-1β和IL-6）的mRNA 表達(dá)水平，下調(diào)抑炎癥因子（IL-4 和IL-10）mRNA 表達(dá)水平。同時(shí)，既往研究表明受腦型瘧模型小鼠血漿外泌體刺激后，巨噬細(xì)胞分泌更多的TNF-α 及促進(jìn)其受體超家族蛋白CD40 的表達(dá)[20]。此外，人源性瘧原蟲蟲株（包括P.falciparum、P.vivax和P.malariae等）感染紅細(xì)胞釋放的外泌體或類似物與未感染紅細(xì)胞相比提高10倍多，且其刺激外周血單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞釋放促炎癥因子，呈現(xiàn)出強(qiáng)烈的促炎癥反應(yīng)[21]。Barker 等[22]發(fā)現(xiàn)腦型瘧模型小鼠（即C57BL/6 小鼠感染P.bergheiANKA）血漿外泌體的miR-155表達(dá)量較非腦型瘧模型小鼠（即BALB/c小鼠感染P.bergheiANKA）顯著升高。此外，Cohen 等[23]和Opadokun等[24]發(fā)現(xiàn)腦型瘧模型小鼠（即CBA 小鼠感染P.bergheiANKA）血漿外泌體的miR-146a表達(dá)量較非腦型瘧模型小鼠（即CBA 小鼠感染P. yoelii）顯著上調(diào)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)miR-155 或miR-146a可分別誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞M1 極化和M2 極化[25]。本研究結(jié)果提示，感染期血清外泌體誘導(dǎo)P. bergheiANKA 感染小鼠肝組織出現(xiàn)強(qiáng)烈的促炎癥反應(yīng)和加重紅內(nèi)期肝組織病理損傷，其原因可能與外泌體經(jīng)miR-155 或miR-146a 分別促進(jìn)巨噬細(xì)胞M1 極化或抑制巨噬細(xì)胞M2 極化有關(guān)。然而，感染期血清外泌體靶向調(diào)控M1 極化的作用機(jī)制有待深入研究。本研究存在一些不足之處：（1）本文缺乏正常小鼠血清外泌體對(duì)照組，以及未分離iRBC 源性外泌體；（2）本文未深入研究感染血清外泌體靶向調(diào)控巨噬細(xì)胞M1 極化的作用機(jī)制。因此，本課題組將在后期研究中檢測正常小鼠血清外泌體與感染期血清外泌體的microRNAs 和蛋白表達(dá)的差異，探討外泌體靶向調(diào)控巨噬細(xì)胞M1極化的作用機(jī)制。

綜上所述，本文利用感染期血清外泌體初步探討了瘧原蟲-宿主間的相互作用，研究結(jié)果提示感染期血清外泌體加重紅內(nèi)期肝臟病理損傷，其原因可能與促進(jìn)肝臟組織巨噬細(xì)胞增殖和M1 極化有關(guān)，但其詳細(xì)機(jī)制有待闡明。本研究結(jié)果可能為后續(xù)以感染期血清外泌體為靶點(diǎn)的瘧疾肝損傷治療提供了新思路。