25-羥基維生素D3、腺苷脫氨酶水平在1型自身免疫性肝炎中的臨床價值

李珂，張丹丹，徐峰

（鄭州大學第一附屬醫(yī)院 消化內(nèi)科，河南 鄭州 450052）

自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis，AIH）是一種由免疫因素參與的病因不明確的慢性肝臟炎癥性病變，主要以門脈周圍肝炎、高γ球蛋白血癥和血清特異性抗體陽性為主要特征［1］。根據(jù)特異性自身抗體的性質(zhì)，可將自身免疫性肝炎分為2種不同的類型：1型AIH主要以血清抗核抗體（antinuclear antibody，ANA）和（或）抗平滑肌抗體（anti-smooth muscle antibody，SMA）/抗肌動蛋白抗體陽性為特征，2型AIH主要以抗肝腎微粒體1型抗體陽性為特征［2］。AIH可以在任何年齡和種族發(fā)病，包括兒童和青春期。在歐洲與亞洲人群中，女性患者多見［3］。25-羥基維生素D3是一種類固醇激素，具有調(diào)節(jié)免疫的功能，可通過直接刺激T細胞或間接影響抗原呈遞細胞的表型，促進T細胞成熟分化，抑制炎癥細胞因子的分泌，從而減輕機體的炎癥損傷，影響疾病的發(fā)生、發(fā)展［4］。目前已有研究表明25-羥基維生素D3與多發(fā)性硬化癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕性關節(jié)炎等多種自身免疫性疾病的活動相關［5］。腺苷脫氨酶（adenosine deaminase，ADA）是與嘌呤代謝相關的酶，也可參與機體的免疫調(diào)節(jié)過程。多項研究表明自身免疫性疾病患者中可見血清ADA水平升高［6］。本研究主要探討25-羥基維生素D3和ADA血清學指標變化與1型AIH患者病情變化之間的關系，探尋簡單、便捷、無創(chuàng)的指標評估1型AIH患者病情，了解疾病情況及治療效果。

1 資料和方法

1.1 一般資料回顧性選取2018年1月至2021年5月于鄭州大學第一附屬醫(yī)院確診且有病理診斷的57例1型AIH患者作為研究對象，同時選取同時期的57例健康人群作為對照組。根據(jù)肝臟組織界面性肝炎程度將患者分為輕、中、重度界面性肝炎。1型AIH患者中輕度界面性肝炎組36例，男3例，女33例，中位年齡54.50（47.25，63.50）歲。中度界面性肝炎組16例，男3例，女13例，中位年齡57.00（53.00，64.75）歲。重度界面性肝炎組5例，男1例，女4例，中位年齡57.00（29.00，70.00）歲。

1.2 選取標準（1）納入標準：1型AIH患者符合《自身免疫性肝炎診斷及治療共識（2015）》［7］中的診斷標準，主要包括血清轉(zhuǎn)氨酶水平升高、血清免疫球蛋白G水平升高和（或）1種或多種血清特異性自身抗體陽性以及肝臟組織活檢特征性病理特征（肝匯管區(qū)淋巴細胞-漿細胞浸潤、界面性肝炎等）。（2）排除標準：①合并其他病毒性肝炎、酒精性肝病、藥物性肝病、非酒精性脂肪性肝病及其他自身免疫性肝病；②合并系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多發(fā)性硬化癥等其他自身免疫性疾??；③合并心、肺、腦、腎器官功能異常及精神行為異常。

1.3 資料收集收集所有納入對象入院時的一般資料，包括年齡、性別。研究對象均在晨起空腹狀態(tài)下抽取外周靜脈血，離心（3 000 r·min-1）分離血清后，使用武漢伊萊瑞特生物科技試劑盒檢測血清25-羥基維生素D3；采用羅氏702全自動生化免疫分析儀檢測血清ADA、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（glutamyltransferase，GGT）、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、白蛋白、球蛋白、前白蛋白、總膽紅素、直接膽紅素、間接膽紅素水平，所使用的試劑來自上海華生有限公司。所有研究對象根據(jù)肝臟組織界面性肝炎程度分組：輕度界面性肝炎指肝臟組織局部或少數(shù)的門管區(qū)破壞，中度界面性肝炎指肝臟＜50%的門管區(qū)或纖維間隔破壞，重度界面性肝炎是指肝臟＞50%的門管區(qū)或纖維間隔破壞。

1.4 統(tǒng)計學方法應用SPSS 25.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)。不符合正態(tài)分布的計量資料用中位數(shù)及四分位數(shù)［M（P25，P75）］表示，兩組間比較采用Wilcoxon秩和檢驗，多樣本比較采用Kruskal-Wallis H檢驗；計數(shù)資料以頻數(shù)和構(gòu)成比（%）表示，采用χ2檢驗；采用Spearman進行相關性分析，探尋25-羥基維生素D3、ADA水平與ALT、AST、GGT、ALP、總膽紅素、直接膽紅素、間接膽紅素、界面性肝炎程度之間的相關性。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 1型AIH患者與健康人群血清25-羥基維生素D3、ADA水平1型AIH患者血清25-羥基維生素D3水平低于健康人群，ADA水平高于健康人群，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 1型AIH患者與健康人群血清25-羥基維生素D3、ADA水平比較［M（P25，P75）］

2.2 不同組別1型AIH患者血清學指標水平3組1型AIH患者在性別、年齡上差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），但肝功能（ALT、AST、GGT、ALP、白蛋白、球蛋白、前白蛋白、總膽紅素、直接膽紅素、間接膽紅素）、ADA、25-羥基維生素D3水平之間差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 3組1型AIH患者血清學指標水平比較

2.3 不同組別1型AIH患者25-羥基維生素D3、ADA水平輕度界面性肝炎組1型AIH患者25-羥基維生素D3水平高于中度界面性肝炎患者和重度界面性肝炎患者，ADA水平低于中度界面性肝炎患者和重度界面性肝炎患者（P＜0.05），但血清25-羥基維生素D3、ADA在中度界面性肝炎組患者與重度界面性肝炎患者之間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表3。

表3 不同組別1型自身免疫性肝炎患者25-羥維生素D3、ADA水平比較

2.4 相關性分析經(jīng)Spearman相關性分析可知：25-羥基維生素D3與ALT、AST、GGT、球蛋白、直接膽紅素、間接膽紅素、界面性肝炎程度呈負相關（r＜0，P＜0.05），與白蛋白、前白蛋白呈正相關（r＞0，P＜0.05），與ALP、總膽紅素之間無明顯相關性（P＞0.05）；ADA與ALT、AST、GGT、ALP、球蛋白、總膽紅素、直接膽紅素、間接膽紅素、界面性肝炎程度呈正相關（r＞0，P＜0.05），與白蛋白、前白蛋白呈負相關（r＜0，P＜0.05）。見表4。

表4 25-羥基維生素D3、ADA與1型AIH病情的相關性

3 討論

AIH是由機體自身免疫功能失調(diào)，肝臟慢性長期炎癥浸潤引起的病變。AIH的病因目前尚不清楚，但遺傳和環(huán)境因素可能發(fā)揮重要作用，來自人類白細胞抗原的基因顯示與AIH的發(fā)生發(fā)展有很強的相關性［8］。T、B淋巴細胞分泌的針對自身組織的抗體，可攻擊肝臟自身組織細胞，導致肝細胞發(fā)生病理學改變［9］。AIH病程長，病情具有波動性，治療后容易復發(fā)，長期炎癥刺激可引起肝臟組織逐漸纖維化，進而發(fā)展為肝硬化、肝衰竭甚至死亡［10］。AIH治療的總體目標是誘導并保持對炎癥因子的完全抑制，同時預防疾病發(fā)展為肝硬化、肝衰竭［11］。研究表明，多數(shù)AIH患者在免疫抑制治療過程中肝纖維化程度能夠得到改善甚至逆轉(zhuǎn)。在有效、系統(tǒng)的個體化治療方案制定后需要密切監(jiān)測AIH患者病情，將有助于降低肝臟相關事件的發(fā)生，改善預后［12］。肝臟穿刺活檢是判斷AIH組織學變化的金標準，但其創(chuàng)傷大，難以作為常規(guī)檢查手段應用于臨床。因此，探尋評估AIH患者病情變化的無創(chuàng)便捷指標成為目前研究的新目標，本研究分析了非侵入性的簡單便捷的血清學指標25-羥基維生素D3、ADA水平與1型AIH患者肝功能指標、界面性肝炎程度之間的關系，探討25-羥基維生素D3、ADA水平在1型AIH中的臨床價值。

25-羥基維生素D3是維生素D3在肝臟25-羥化酶作用下形成的具有生物效應的活化維生素D3，可參與機體細胞的增殖、分化以及調(diào)節(jié)免疫功能［12］。25-羥基維生素D3不僅參與機體鈣磷水平調(diào)節(jié)，而且可以抑制免疫細胞活性，抑制炎癥細胞因子的分泌，減輕炎癥刺激損傷。同時可以誘導機體活化的B淋巴細胞凋亡，抑制自身抗體的生成［13］。目前多項研究已經(jīng)證實25-羥基維生素D3與系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多發(fā)性硬化癥等多種自身免疫性疾病相關，但其與1型AIH 的 關 系 尚 不 明 確。Miroliaee等［14］研 究 表 明64%～92%慢性肝病患者血清維生素D水平下降。本研究結(jié)果顯示輕度界面性肝炎組患者25-羥基維生素D3水平高于中度界面性肝炎組和重度界面性肝炎組患者，而且25-羥基維生素D3水平與1型AIH患者肝功能、界面性肝炎程度之間具有相關性。這表明血清中25-羥基維生素D3水平可早期預測1型AIH患者病情變化，提示其可作為評估1型AIH患者病情變化的血清學指標。由于樣本量較小，血清25-羥基維生素D3水平在中度界面性肝炎組患者與重度界面性肝炎患者之間無明顯差異。

ADA在人體嘌呤核苷酸的代謝過程中發(fā)揮重要作用，主要分布于機體的胸腺、脾臟、淋巴組織等。腺苷是人體重要的免疫抑制因子，ADA可以催化人體腺苷轉(zhuǎn)變?yōu)榇吸S嘌呤核苷，從而調(diào)節(jié)機體的免疫穩(wěn)態(tài)［15］。ADA在T淋巴細胞中的活性高于B淋巴細胞，其參與人體前T淋巴細胞轉(zhuǎn)化成淋巴細胞的過程。1型AIH患者體內(nèi)存在T、B淋巴細胞的異常增殖、分化等。本研究結(jié)果顯示輕度界面性肝炎患者體內(nèi)ADA水平低于中度界面性肝炎和重度界面性肝炎患者，ADA隨著肝功能、界面性肝炎程度變化而變化，與病情變化具有一致性，表明ADA可作為監(jiān)測1型AIH病情變化的潛在指標，預測疾病變化。

綜上，25-羥基維生素D3、ADA水平在1型AIH不同界面性肝炎組差異有統(tǒng)計學意義，而且其水平變化與肝功能、界面性肝炎程度之間具有相關性。因此25-羥基維生素D3、ADA可作為1型AIH患者血清生化學、組織學病情評估和預測的新血清學指標。但由于本研究總體樣本量小，尤其是重度界面性肝炎組研究對象較少，中度界面性肝炎患者和重度界面性肝炎患者之間的差異無統(tǒng)計學意義。日后需要更多大樣本的研究來證實結(jié)果并進一步明確中度和重度界面性肝炎組之間的關系，進一步明確25-羥基維生素D3、ADA在1型AIH患者中表達的意義。