尾側(cè)同源盒轉(zhuǎn)錄因子2在胃粘膜腸上皮化生及腸型胃癌中的表達(dá)研究

張赟 陳祎 馬亮 文建力 王劍 曹穎△

(1.貴州省人民醫(yī)院病理科，貴州 貴陽 550002； 2.四川大學(xué)華西醫(yī)院消化內(nèi)科,四川 成都 610041)

胃癌(GC)是消化系統(tǒng)常見惡性腫瘤之一。臨床采用Lauren分型方法將GC分為腸型、彌漫型、混合型和不確定型四種病理組織學(xué)類型，我國以腸型GC為主[1]。目前認(rèn)為，腸型GC可能是通過慢性萎縮性胃炎、胃粘膜腸上皮化生(IM)、胃粘膜上皮異型增生等一系列前期病變構(gòu)成的Correa氏級聯(lián)反應(yīng)發(fā)展而來[2]。異型增生是GC重要且明確的癌前病變，當(dāng)胃粘膜上皮細(xì)胞發(fā)生異型增生后，表現(xiàn)出與GC相似細(xì)胞形態(tài)學(xué)及功能代謝學(xué)特征[3]；胃粘膜上皮細(xì)胞可通過異型增生進(jìn)展為腸型GC[4]。尾側(cè)同源盒轉(zhuǎn)錄因子2(CDX2)是維持腸道表型的重要轉(zhuǎn)錄因子[5]。有研究顯示，CDX2 可能參與了 IM 的發(fā)生及腸型GC的發(fā)生發(fā)展[6]。本研究通過檢測CDX2在IM及腸型GC組織中的表達(dá)，探索其在Correa氏級聯(lián)進(jìn)展中的可能作用，為腸型GC的發(fā)病機(jī)制提供有用的實驗依據(jù)。

1 資料與方法

1.1臨床患者及相關(guān)臨床病理特征 選擇我院2014年至2017年胃鏡活檢標(biāo)本和手術(shù)切除的腸型GC根治術(shù)標(biāo)本共67例。所有腸型GC患者術(shù)前均未接受放療和化療。復(fù)查HE切片后分為胃粘膜組、IM組、上皮異型增生組和腸型GC組。粘蛋白組織化學(xué)染色后將IM分為I、II和III型[7]；采用悉尼評分系統(tǒng)對IM及異型增生進(jìn)行分級[8]。本研究經(jīng)本醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2CDX2免疫組織化學(xué)染色及半定量分析 免疫組織化學(xué)染色采用Envision二步法，CDX2陽性定位于細(xì)胞核，結(jié)果判定方法如下：(1)陽性細(xì)胞數(shù)百分比評分，百分比≤5%計為0分，6%～25%計為1分，26%～50%計為2分，51%～75%計為3分，>75%計為4分；(2)染色強度評分，無色計為0分，淡黃色計為1分，棕黃色計為2分，棕褐色計為3分；(3)將陽性細(xì)胞數(shù)百分比評分×染色強度評分=總得分，總得分0～1定為陰性，2～3分定為弱陽性，4～8分定為中等陽性，9～12分定為強陽性；本研究將陰性和弱陽性表達(dá)定為低表達(dá)病例，中等陽性和強陽性定為高表達(dá)病例。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 20.0軟件分析數(shù)據(jù)，組間比較采用 Fisher精確檢驗，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性分析，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1CDX2在胃粘膜、IM、上皮異型增生和腸型GC組織中的表達(dá) 與胃粘膜組相比，IM組CDX2高表達(dá)病例百分率顯著增高(P<0.01)；異型增生組CDX2高表達(dá)病例百分率低于IM組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與IM組和異型增生組相比，腸型GC組CDX2高表達(dá)病例百分率均降低(P<0.01,P<0.05)。見表1。

表1 CDX2在胃粘膜組、IM組、異型增生組及腸型GC組中的表達(dá)[n(%)]

2.2CDX2表達(dá)與IM分型及分級、異型增生分級、腸型GC分化的相關(guān)性 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，CDX2表達(dá)與腸型GC癌細(xì)胞分化相關(guān)(Rho= 0.3491，P<0.01)，癌細(xì)胞的分化越低，CDX2表達(dá)也越低， CDX2的表達(dá)與IM分型及分級、異型增生分級均不相關(guān)。見表2。

表2 CDX2表達(dá)與IM分型及分級、異型增生分級以及腸型GC分化相關(guān)性研究[n(%)]

3 討 論

CDX是一類在腸道細(xì)胞增殖、分化和發(fā)育等生理過程中發(fā)揮重要作用的轉(zhuǎn)錄因子，含有CDX1、CDX2 、CDX4 三種同源體。其中，CDX1 和CDX2在腸道上皮細(xì)胞的發(fā)育、分化以及腸道表型的維持中有重要意義，而CDX2更為重要。目前認(rèn)為，IM主要由幽門螺桿菌(H.pylori)感染和CDX表達(dá)誘導(dǎo)。CDX2 被認(rèn)為是胃 IM 發(fā)生發(fā)展的觸發(fā)因子，過表達(dá) CDX2 的轉(zhuǎn)基因小鼠可引起了胃部廣泛的 IM 的發(fā)生[9]。本文結(jié)果顯示，絕大多數(shù)胃粘膜上皮細(xì)胞未見CDX2表達(dá)，67例中有4例胃粘膜上皮細(xì)胞呈現(xiàn)CDX1弱陽性表達(dá)；然而所有IM組均觀察到CDX2陽性表達(dá)，且大多數(shù)呈中等陽性或強陽性表達(dá)，提示 IM 的發(fā)展中存在CDX2 基因的異位表達(dá)，CDX2在IM的形成中起到一定的作用。本文結(jié)果還顯示，CDX2在IM組、異型增生組到腸型GC組中高表達(dá)病例百分率呈逐漸下降趨勢；與IM組和異型增生組相比，腸型GC組CDX2表達(dá)顯著降低。說明Correa氏級聯(lián)反應(yīng)中由IM向異型增生及腸型GC的發(fā)展過程中，CDX2可能作為腫瘤抑制基因參與了IM向腸型GC發(fā)生及發(fā)展。相關(guān)性研究結(jié)果顯示，CDX2表達(dá)與腸型GC癌細(xì)胞分化相關(guān)，癌細(xì)胞分化越低，CDX2表達(dá)則越低，提示CDX2可能在腸型GC的發(fā)展過程中起到負(fù)向調(diào)節(jié)作用，CDX2可作為判斷腸型GC惡性程度及預(yù)后判斷的分子標(biāo)志物。然而，本組研究數(shù)據(jù)顯示CDX2表達(dá)與IM的分型分級、異型增生分級均不相關(guān)性。劉貴生等[10]通過免疫組化染色檢測不同亞型 IM 中 CDX2 的表達(dá)結(jié)果卻顯示CDX2 在Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型IM 中表達(dá)率逐漸減低，其中Ⅲ型 IM 中 CDX2 的表達(dá)率明顯低于Ⅰ型。他人流行病學(xué)研究[11]也顯示，不完全性IM 進(jìn)展為 GC 的速度快于完全性 IM，Ⅱ型和Ⅲ型 IM 發(fā)生腸型GC風(fēng)險明顯高于Ⅰ型 IM。因本研究病例數(shù)量偏少，在今后的研究中需要增加病例數(shù)量后進(jìn)一步明確CDX2與IM分型分級及異型增生分級之間的關(guān)系。

綜上，本研究結(jié)果提示CDX2蛋白可能參與了IM向腸型GC的惡性轉(zhuǎn)化，在腸型GC發(fā)生發(fā)展中可能發(fā)揮了抑制作用，但確切機(jī)制尚需要進(jìn)一步深入研究。