長三角三地全血細胞計數(shù)檢測結(jié)果一致性研究

楊 雪，徐 翀，宋 穎，趙 強，繆穎波，王 青，周 靖

（上海市臨床檢驗中心，上海 100126）

醫(yī)療機構(gòu)間檢驗結(jié)果實現(xiàn)可比可減少重復檢查，提高醫(yī)療資源利用效率。上海市青浦區(qū)、江蘇省蘇州市吳江區(qū)和浙江省嘉善縣（以下分別簡稱為青浦、吳江和嘉善）三地作為長三角一體化發(fā)展的示范區(qū)域，醫(yī)保網(wǎng)絡已連通，患者在三地往來就醫(yī)將更頻繁，實現(xiàn)三地檢驗結(jié)果互認刻不容緩。本研究主要針對跨區(qū)域檢驗結(jié)果，以青浦、吳江和嘉善三地醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室作為研究對象，探索三地全血細胞計數(shù)（complete blood cell count，CBC）檢測結(jié)果的一致性和可比性。

1 材料和方法

1.1 調(diào)查對象

本研究于2021年5月對青浦、吳江和嘉善區(qū)域檢驗中心及其下級醫(yī)療機構(gòu)的25家臨床實驗室（表1）進行CBC正確度調(diào)查。調(diào)查項目包括白細胞（white blood cell，WBC）計數(shù)、紅細胞（red blood cell，RBC）計數(shù)、血紅蛋白（hemoglobin，Hb）、血細胞比容（hematocrit，HCT）和血小板（platelet ，PLT）計數(shù)5項。

表1 25家臨床實驗室基本情況

1.2 調(diào)查品制備

使用搖床（4 ℃，80 r/min）將1單位新鮮B型紅細胞懸液混勻后，通過輸液泵按比例同時滴加（120滴/min）磷酸鹽緩沖液、固定劑和活性劑，搖勻，制備成調(diào)查品，分裝至真空采血管，每支2 mL，共2個批號，分別為20211301（批號1）和20211302（批號2）。

1.3 調(diào)查方式

通過冷鏈運輸方式將2個批號調(diào)查品于1 d內(nèi)送達各臨床實驗室。要求實驗室收到調(diào)查品后，按常規(guī)樣本檢測模式檢測，每個批號重復檢測5次，3 d內(nèi)上報檢測結(jié)果（建議實驗室收到調(diào)查品后盡快檢測并上報結(jié)果，每個批號上報5次重復檢測結(jié)果）。

1.4 結(jié)果一致性分析

計算各實驗室CBC 5個項目2個批號5次重復檢測結(jié)果的中位數(shù)（M）、均值（）、標準差（s）、極差（R）和變異系數(shù)（coefficient of variation，CV），依據(jù)《WS/T 406—2012 臨床血液學檢驗常規(guī)項目分析質(zhì)量要求》[1]推薦的標準（WBC計數(shù)4.0%、RBC計數(shù)2.0%、Hb 1.5%、HCT 3.0%、PLT計數(shù)5.0%）進行評價。分析CBC 5個項目實驗室檢測結(jié)果的差異以及不同檢測系統(tǒng)之間檢測結(jié)果的差異。

1.5 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 26.0軟件進行統(tǒng)計分析。不同檢測系統(tǒng)各項目比較采用Kruskal-Wallis H檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 檢測儀器情況

25家實驗室使用的血液分析儀包括日本Sysmex公司（簡稱Sysmex）、深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司（簡稱Mindray）和日本堀場公司（簡稱Horiba）3個品牌11個型號。見表2。

表2 25家臨床實驗室使用的儀器品牌、型號和數(shù)量

2.2 批內(nèi)不精密度

CBC 5個項目2個批號5次重復檢測結(jié)果的批內(nèi)不精密度（CV）范圍分別為：WBC計數(shù)0.32%～3.24%，RBC計數(shù)0.11%～1.11%，Hb 0.00%～1.38%，HCT 0.16%～1.23%，PLT計數(shù)0.32%～3.93%，均滿足《WS/T 406—2012 臨床血液學檢驗常規(guī)項目分析質(zhì)量要求》[1]的要求。見圖1。

圖1 25家實驗室5個項目檢測結(jié)果批內(nèi)不精密度（CV）

2.3 25家臨床實驗室檢測結(jié)果統(tǒng)計

25家實驗室CBC 5個項目2個批號檢測結(jié)果總體與總體M無明顯差異，見表3。但不同項目的CV存在一定的差異。RBC計數(shù)、Hb各實驗室間檢測結(jié)果差異較小，批號1和批號2的CV分別為1.19%、1.35%和1.40%、1.24%；HCT各實驗室間的檢測結(jié)果差異較大，批號1和批號2的CV分別為6.52%和6.05%；WBC計數(shù)批號1和批號2的CV分別為2.10%和4.35%，PLT計數(shù)批號1和批號2的CV分別為3.08%和3.25%。

表3 25家臨床實驗室5個項目檢測結(jié)果統(tǒng)計

2.4 不同檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果比較

25家實驗室共使用了3種檢測系統(tǒng)，分別為Sysmex檢測系統(tǒng)、Mindray檢測系統(tǒng)和Horiba檢測系統(tǒng)。3個檢測系統(tǒng)內(nèi)各項目2個批號檢測結(jié)果總體和總體M無明顯差異。Kruskal-Wallis H檢驗結(jié)果顯示，不同檢測系統(tǒng)間RBC計數(shù)批號2、Hb批號2、HCT 批號1和批號2、PLT計數(shù)批號1和批號2檢測結(jié)果差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。兩兩比較結(jié)果顯示，Sysmex檢測系統(tǒng)與Mindray檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；Horiba檢測系統(tǒng)與Sysmex檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果之間差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），Horiba檢測系統(tǒng)HCT項目和PLT計數(shù)項目的檢測結(jié)果與Sysmex檢測系統(tǒng)和Mindray檢測系統(tǒng)差異較大。見表4、表5、圖2。

圖2 各檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果兩兩比較結(jié)果

表4 各檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果差異（CV）比較 %

表5 各檢測系統(tǒng)5個項目檢測結(jié)果比較

3 討論

本研究CBC正確度調(diào)查品為經(jīng)過弱固定的新鮮全血，基質(zhì)效應小，能客觀反映日常檢驗結(jié)果，有助于發(fā)現(xiàn)不同檢測系統(tǒng)間的偏差。參與本次調(diào)查的青浦、吳江和嘉善三地實驗室覆蓋了不同級別類型醫(yī)療機構(gòu)，包括三級（綜合和?？疲⒍墸ňC合和?？疲?、一級和未分級醫(yī)療機構(gòu)，分別占20%、36%、36%和8%。調(diào)查結(jié)果可在一定程度上反映三地真實水平。25家實驗室使用的檢測儀器包括3個品牌11個型號，全部使用配套試劑，且72%的實驗室儀器為同一品牌機型，有利于檢驗結(jié)果的可比。

本研究結(jié)果顯示，25家實驗室CBC正確度驗證計劃5個項目2個批號調(diào)查品重復檢測結(jié)果精密度較好。25家實驗室5個項目檢測結(jié)果比較結(jié)果顯示，使用Horiba檢測系統(tǒng)的3家實驗室HCT檢測結(jié)果與其他實驗室的差異較大，其余項目檢測結(jié)果的一致性較好。

25家實驗室5個項目批內(nèi)不精密度均滿足文獻[1]推薦的標準（WBC計數(shù)4.0%、RBC計數(shù)2.0%、Hb 1.5%、HCT 3.0%、PLT計數(shù)5.0%），說明25家實驗室室內(nèi)質(zhì)控精密度較好。參與調(diào)查的吳江7家實驗室是吳江區(qū)醫(yī)學會檢驗病理專業(yè)委員會成員單位，嘉善4家實驗室為嘉善縣第一人民醫(yī)院醫(yī)共體成員，均為二級及以上醫(yī)療機構(gòu)；青浦14家實驗室均為區(qū)域醫(yī)聯(lián)體成員單位，實施統(tǒng)一管理，統(tǒng)一考核標準，檢驗人員質(zhì)量意識較強，規(guī)范操作自覺性較好。吳江成員單位之間定期開展質(zhì)控督查及互動交流活動，嘉善成員單位之間定期接受檢驗人員資質(zhì)、儀器管理和室內(nèi)質(zhì)控等考核，青浦醫(yī)聯(lián)體內(nèi)各成員單位CBC檢測室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)是實時監(jiān)控數(shù)據(jù)，各成員單位每季度接受1次質(zhì)控培訓，每6個月接受1次區(qū)內(nèi)質(zhì)控督查。以上措施均有效保證了25家實驗室檢測質(zhì)量的同質(zhì)化，為檢測結(jié)果實現(xiàn)可比奠定了基礎(chǔ)。

本研究不同檢測系統(tǒng)之間檢測結(jié)果存在差異，與王青等[3]、王文娟等[4]和張志雄等[5]的研究結(jié)果一致。HCT在Horiba與Sysmex、Mindray檢測系統(tǒng)間的差異超過了文獻[1]中的可比性要求（相對偏差≤3.5%）：Sysmex與Horiba檢測系統(tǒng)2個水平調(diào)查品檢測結(jié)果的相對偏差分別為22.64%和20.05%，Mindray與Horiba檢測系統(tǒng)2個水平調(diào)查品檢測結(jié)果的相對偏差分別為23.06%和20.52%。這可能與不同檢測系統(tǒng)HCT檢測原理不同有關(guān)，HCT檢測結(jié)果可由儀器直接依據(jù)脈沖信號測出（Sysmex），或依據(jù)紅細胞平均體積和RBC計數(shù)計算得到（Horiba）；也可能與本研究所用調(diào)查品是弱固定新鮮血有關(guān)。HCT是判斷貧血的重要依據(jù)，相關(guān)指南推薦參考區(qū)間為40%～50%（男）、35%～45%（女）[6]，本研究中HCT的2個水平調(diào)查品檢測結(jié)果的分別為41.97%和52.67%，分別為正常值和異常值，Horiba與Sysmex、Mindray 2個檢測系統(tǒng)間的差異可能影響到臨床的決策，進而影響到患者疾病的診斷。建議實驗室按照《WS/T 406—2012 臨床血液學檢驗常規(guī)項目分析質(zhì)量要求》[1]要求定期對儀器進行校準，非配套試劑使用前進行性能驗證。建議相關(guān)質(zhì)量監(jiān)管機構(gòu)定期開展質(zhì)量督查和現(xiàn)場督導工作，如飛行檢查，以幫助臨床實驗室及時發(fā)現(xiàn)問題，提高檢測質(zhì)量。

不同醫(yī)療機構(gòu)檢驗結(jié)果實現(xiàn)可比的關(guān)鍵判斷標準是室內(nèi)質(zhì)控穩(wěn)定性和室間質(zhì)評準確性。室內(nèi)質(zhì)控監(jiān)測指標為各檢測項目累計不精密度水平，如6個月及以上累計數(shù)據(jù)。本研究結(jié)果顯示，25家實驗室批內(nèi)不精密度較好，但尚缺少批間和長期穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，后續(xù)研究將補齊數(shù)據(jù)。本研究選取弱固定新鮮全血質(zhì)控品，雖優(yōu)于常規(guī)室間質(zhì)評用質(zhì)控品，更接近患者樣本，但最理想狀態(tài)仍是使用新鮮全血樣本，以最大程度降低樣本基質(zhì)效應。

室間質(zhì)評主要監(jiān)控各實驗室檢測結(jié)果的差異，以持續(xù)改進檢驗質(zhì)量。但是由于不同檢測系統(tǒng)溯源性差異等問題，當前的室間質(zhì)評通常是按照檢測系統(tǒng)進行分組評價的，得到的結(jié)果是組內(nèi)實驗室之間的比較情況，難以評價不同檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果一致性。因此需要衛(wèi)生行政部門、儀器試劑廠商、實驗室人員共同努力，以促進各檢測系統(tǒng)之間檢驗結(jié)果一致性的工作[7]。通過衛(wèi)生行政部門出臺政策，規(guī)范儀器試劑廠商在產(chǎn)品溯源性和標準化等方面的工作。實驗室使用不同檢測系統(tǒng)檢測同一項目時，首先應驗證不同檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果差異是否在臨床可接受范圍內(nèi)，同時應使用相同的參考區(qū)間，再應用于臨床。正確度驗證計劃通常由參考方法定值，有利于發(fā)現(xiàn)不同檢測系統(tǒng)之間結(jié)果差異，實驗室應盡可能參加，以尋求改進機會，促使各檢測結(jié)果達到一致。

綜上所述，青浦、吳江和嘉善三地CBC 5個項目總體可比性和一致性較好。部分項目不同檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果存在一定的差異，應引起實驗室重視。建議各實驗室嚴格按《WS/T 347—2011 血細胞分析的校準指南》[8]制定校準計劃，修正偏移，進一步提高實驗室檢驗質(zhì)量。建議盡量使用相同品牌檢測系統(tǒng)，以幫助實驗室獲得一致檢測結(jié)果。建議建立參考實驗室，通過新鮮血傳遞方式提高不同檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果的可比性。