血漿Lp-PLA2、抵抗素、脂聯(lián)素水平對急性缺血性腦卒中病人溶栓后出血轉(zhuǎn)化的預(yù)測價(jià)值

王洪科，尹劉杰，李明哲

急性缺血性腦卒中(acute ischemic stroke，AIS)又稱急性腦梗死，是臨床常見的腦卒中類型，是由于腦部供血血管狹窄、閉塞等原因?qū)е碌哪X組織缺血、缺氧及壞死，致殘率、致死率高[1-2]。AIS發(fā)病早期行溶栓治療，是恢復(fù)梗死灶血液供應(yīng)、挽救腦組織的有效方法[3]。然而，部分病人在溶栓后可能會發(fā)生出血轉(zhuǎn)化(hemorrhagic transformation，HT)，這將加重病人腦組織損傷，影響治療的安全性及有效性，嚴(yán)重者甚至導(dǎo)致死亡[4]。因此，準(zhǔn)確預(yù)測AIS病人溶栓后發(fā)生HT的可能性，及時(shí)篩選出溶栓后易發(fā)生HT的病人并進(jìn)行干預(yù)，對幫助病人獲得最佳預(yù)后具有重要價(jià)值。脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2，Lp-PLA2)是淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等經(jīng)炎癥介質(zhì)刺激后產(chǎn)生、分泌的促炎反應(yīng)磷脂酶，能加劇脂質(zhì)沉積、促進(jìn)腦血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷[5]。抵抗素、脂聯(lián)素是由脂肪組織、脂肪細(xì)胞特異性合成、分泌的激素或細(xì)胞因子，與胰島素抵抗、動脈粥樣硬化等關(guān)系密切[6-7]。本研究旨在初步探討Lp-PLA2、抵抗素、脂聯(lián)素對AIS病人溶栓后發(fā)生HT的預(yù)測價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2017年8月—2019年8月在我院就診并接受靜脈溶栓治療的AIS病人110例，根據(jù)溶栓治療后24 h內(nèi)有無HT分為未出血組(94例)與出血組(16例)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①AIS診斷符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2014》[8]診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)顱腦CT或磁共振成像(MRI)檢查確診；②AIS病人符合AIS靜脈溶栓適應(yīng)證并在發(fā)病4.5 h內(nèi)接受靜脈溶栓；③溶栓后24 h內(nèi)復(fù)查頭顱CT評估有無HT；④本研究通過本院倫理委員會審核，且取得研究對象知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并惡性腫瘤、腦出血、冠心病、外周血管疾病、嚴(yán)重肝腎等重要臟器功能障礙、精神疾病、認(rèn)知功能障礙及各種急性期炎癥等；②既往有顱腦外傷病史；③存在AIS靜脈溶栓禁忌證；④孕婦或哺乳期婦女；⑤依從性較差者；⑥資料不全或不真實(shí)者。

1.2 方法

1.2.1 資料收集 收集AIS病人一般資料，包括性別、年齡、高血壓、糖尿病、吸煙、收縮壓、舒張壓、三酰甘油(glycerin trilaurate，TG)、總膽固醇(total cholesterol，TC)、低密度脂蛋白膽固醇(low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C)等。

1.2.2 試劑與儀器 人Lp-PLA2、抵抗素酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)試劑盒(貨號：BJ-0712R、BJ-0441R)購自上海邦景實(shí)業(yè)有限公司；人脂聯(lián)素ELISA試劑盒(貨號：YAD1675s)購自北京雅安達(dá)生物技術(shù)有限公司；化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(型號：Immulite)購自美國DPC Cirrus公司。

1.2.3 血漿Lp-PLA2、抵抗素、脂聯(lián)素水平檢測 溶栓治療前采集AIS病人外周血5 mL于EDTA抗凝管中，常溫下3 000 r/min離心15 min，取上層血漿于無RNase的EP管，將Lp-PLA2、抵抗素或脂聯(lián)素抗體包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本血清的Lp-PLA2、抵抗素或脂聯(lián)素與抗體結(jié)合，加入生物素化的Lp-PLA2、抵抗素或脂聯(lián)素抗體，形成免疫復(fù)合物，用辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯色，最后加終止液，用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測定吸光度(optical density，OD)值，波長為450 nm，重復(fù)3次，取平均值，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、對應(yīng)OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算AIS病人血漿中Lp-PLA2、抵抗素、脂聯(lián)素濃度。

2 結(jié) 果

2.1 兩組臨床資料比較 兩組性別、年齡、高血壓比例、吸煙比例、收縮壓、舒張壓、TG、TC、LDL-C、HDL-C水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與未出血組相比，出血組糖尿病比例較高(P<0.05)。詳見表1。

表1 兩組臨床資料比較

2.2 兩組血漿Lp-PLA2、抵抗素、脂聯(lián)素水平比較 與未出血組相比，出血組血漿Lp-PLA2、抵抗素水平明顯升高，血漿脂聯(lián)素水平明顯降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 兩組血漿Lp-PLA2、抵抗素、脂聯(lián)素水平比較(±s)

2.3 多因素Logistic回歸分析影響AIS病人溶栓后發(fā)生HT的因素 以AIS病人溶栓后是否發(fā)生HT作為因變量，將單因素分析中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)(糖尿病、Lp-PLA2、抵抗素、脂聯(lián)素)作為自變量進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，糖尿病及血漿Lp-PLA2、抵抗素水平升高均為AIS病人溶栓后發(fā)生HT的危險(xiǎn)因素(P<0.05)，血漿脂聯(lián)素水平升高為AIS病人溶栓后發(fā)生HT的保護(hù)因素(P<0.05)。詳見表3。

表3 多因素Logistic回歸分析AIS病人溶栓后發(fā)生HT的影響因素

2.4 血漿Lp-PLA2、抵抗素、脂聯(lián)素水平對AIS病人溶栓后發(fā)生HT的預(yù)測價(jià)值 ROC曲線分析結(jié)果顯示，以血漿Lp-PLA2水平265.84 μg/L為截?cái)嘀?，預(yù)測AIS病人溶栓后發(fā)生HT的ROC曲線下面積為0.865[95%CI(0.750，0.981)]，敏感度為81.3%，特異度為88.3%，約登指數(shù)為0.696；以血漿抵抗素水平18.18 μg/L為截?cái)嘀?，預(yù)測AIS病人溶栓后發(fā)生HT的ROC曲線下面積為0.919[95%CI(0.848，0.990)]，敏感度為81.3%，特異度為86.2%，約登指數(shù)為0.675；以血漿脂聯(lián)素水平15.43 mg/L為截?cái)嘀?，預(yù)測AIS病人溶栓后發(fā)生HT的ROC曲線下面積為0.850[95%CI(0.767，0.934)]，敏感度為87.5%，特異度為77.7%，約登指數(shù)為0.652。詳見圖1。

圖1 血漿Lp-PLA2、抵抗素、脂聯(lián)素水平預(yù)測AIS病人溶栓后發(fā)生HT的ROC曲線

2.5 血漿Lp-PLA2、抵抗素、脂聯(lián)素水平聯(lián)合檢測對AIS病人溶栓后發(fā)生HT的預(yù)測價(jià)值 以血漿Lp-PLA2水平265.84 μg/L、血漿抵抗素水平18.18 μg/L、血漿脂聯(lián)素水平15.43 mg/L為截?cái)嘀?，預(yù)測AIS病人溶栓后發(fā)生HT的ROC曲線下面積為0.989[95%CI(0.973，1.000)]，敏感度為93.8%，特異度為95.7%，約登指數(shù)為0.895。詳見圖2。

圖2 血漿Lp-PLA2、抵抗素、脂聯(lián)素水平聯(lián)合預(yù)測AIS病人溶栓后發(fā)生HT的ROC曲線

3 討 論

AIS是多種因素導(dǎo)致的臨床綜合征，多數(shù)是由于動脈粥樣硬化、腦部血液供給中斷而引起的腦部功能急性喪失，主要發(fā)生于老年人群，臨床上可表現(xiàn)出眩暈、雙眼黑蒙、復(fù)視、共濟(jì)障礙及吞咽困難等癥狀，易導(dǎo)致殘疾及死亡[9]。發(fā)病4.5 h內(nèi)進(jìn)行急診靜脈溶栓治療是目前AIS急性期最有效的治療措施，可顯著降低病人致死、致殘風(fēng)險(xiǎn)，但會使病人的凝血功能減弱[10]。HT是AIS溶栓治療的嚴(yán)重并發(fā)癥，指缺血區(qū)血管重新恢復(fù)血流，導(dǎo)致血液從缺血區(qū)動脈中漏出或在血壓作用下從動脈破裂而出的癥狀，可導(dǎo)致病情進(jìn)一步加重，預(yù)后差。部分AIS病人即使符合溶栓治療條件，在溶栓治療后仍有較大可能發(fā)生HT，對這部分病人來說，溶栓治療的危害遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于益處，應(yīng)及早將其篩選出來，進(jìn)行其他治療干預(yù)。

Lp-PLA2是一種鈣離子非依賴性絲氨酸酯酶，可作為新型炎性標(biāo)志物，由成熟巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞合成并分泌，可產(chǎn)生損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的產(chǎn)物，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷[11]。韓曉霞等[12]研究表明，AIS病人血漿Lp-PLA2水平升高，與病人腦梗死面積、神經(jīng)功能缺損程度、病情嚴(yán)重程度有一定的相關(guān)性。本研究發(fā)現(xiàn)，溶栓后發(fā)生HT的AIS病人血漿Lp-PLA2水平明顯高于溶栓后未發(fā)生HT的AIS病人，表明Lp-PLA2參與AIS病人溶栓后HT的發(fā)生過程。多因素Logistic回歸分析顯示，Lp-PLA2水平升高是AIS病人溶栓后發(fā)生HT的危險(xiǎn)因素，檢測其水平可能對預(yù)測AIS病人溶栓后是否發(fā)生HT具有一定作用。ROC曲線分析結(jié)果顯示，以血漿Lp-PLA2水平265.84 μg/L為截?cái)嘀殿A(yù)測AIS病人溶栓后是否發(fā)生HT的敏感度、特異度分別為81.3%、88.3%，表明血漿Lp-PLA2水平對AIS病人溶栓后發(fā)生HT具有一定預(yù)測價(jià)值。

抵抗素是近年發(fā)現(xiàn)的由脂肪組織、脂肪細(xì)胞分泌的多肽類激素，能降低血管內(nèi)皮細(xì)胞功能，促進(jìn)平滑肌細(xì)胞遷移和動脈粥樣硬化進(jìn)程，可用于AIS的病情評價(jià)[13]。脂聯(lián)素也是由脂肪細(xì)胞合成、分泌的重要因子，在血漿中含量豐富，能調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮功能，是具有抗動脈粥樣硬化、抗胰島素抵抗作用的保護(hù)性細(xì)胞因子[14]。王少穎等[15]研究發(fā)現(xiàn)，AIS病人血清抵抗素水平明顯升高，而脂聯(lián)素水平明顯降低，血清抵抗素水平與頸動脈不穩(wěn)定性斑塊及頸動脈內(nèi)膜-中膜厚度密切相關(guān)，而脂聯(lián)素可能通過發(fā)揮抗炎功能而抑制粥樣硬化形成。本研究結(jié)果顯示，與溶栓后未發(fā)生HT的AIS病人相比，溶栓后發(fā)生HT的AIS病人血漿抵抗素水平明顯升高，脂聯(lián)素水平明顯降低，且血漿抵抗素水平升高為AIS病人溶栓后發(fā)生HT的危險(xiǎn)因素，脂聯(lián)素水平升高為AIS病人溶栓后發(fā)生HT的保護(hù)因素，提示抵抗素、脂聯(lián)素可能均與AIS病人溶栓后HT有密切聯(lián)系。以血漿抵抗素水平18.18 μg/L為截?cái)嘀殿A(yù)測AIS病人溶栓后是否發(fā)生HT的敏感度、特異度分別為81.3%、86.2%，以血漿脂聯(lián)素水平15.43 mg/L為截?cái)嘀殿A(yù)測的敏感度、特異度分別為87.5%、77.7%，提示血漿抵抗素、脂聯(lián)素水平對AIS病人溶栓后發(fā)生HT均具有一定預(yù)測價(jià)值。

本研究采用血漿Lp-PLA2、抵抗素、脂聯(lián)素水平聯(lián)合預(yù)測AIS病人溶栓后是否發(fā)生HT，敏感度可提升至93.8%，特異度可提升至95.7%，提示血漿Lp-PLA2、抵抗素、脂聯(lián)素水平聯(lián)合檢測對AIS病人溶栓后發(fā)生HT具有更好的預(yù)測價(jià)值，可用于預(yù)測AIS病人溶栓后HT的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，溶栓后發(fā)生HT的AIS病人血漿Lp-PLA2、抵抗素水平升高，脂聯(lián)素水平降低，血漿Lp-PLA2、抵抗素、脂聯(lián)素水平對AIS病人溶栓后是否發(fā)生HT均具有較好的預(yù)測價(jià)值，且三者聯(lián)合預(yù)測價(jià)值更高，對AIS病人靜脈溶栓治療具有重要的參考價(jià)值。