卡維地洛聯(lián)合托拉塞米對(duì)慢性充血性心力衰竭病人CX3CR1、miR-423-5p表達(dá)的影響

劉旭光，陳 晨，譚安安，吳 斌，胡家蕓，項(xiàng) 娜

近年來(lái)，隨著我國(guó)人口老齡化現(xiàn)象的不斷發(fā)展，心血管疾病發(fā)病率逐年上升，已成為威脅老年群體生命安全的重要原因[1-2]。心血管疾病病人若得不到及時(shí)有效的治療，病情發(fā)展至終末階段即為慢性充血性心力衰竭，慢性充血性心力衰竭病人主要臨床表現(xiàn)為渾身乏力、呼吸困難，具有神經(jīng)內(nèi)分泌激活、心臟功能異常等特征，嚴(yán)重威脅病人身體健康甚至生命安全[3-4]。有研究表明，慢性充血性心力衰竭病人預(yù)后較差，病死率較高[5-6]。卡維地洛、托拉塞米是常用的治療慢性充血性心力衰竭的藥物，但是關(guān)于二者聯(lián)合應(yīng)用的研究較少。本研究旨在觀察卡維地洛聯(lián)合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭的效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年10月—2019年12月湖北省中醫(yī)院收治的慢性充血性心力衰竭病人150例，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為卡維地洛組與聯(lián)合治療組，各75例?？ňS地洛組，男40例，女35例；年齡62～73(67.5±4.4)歲；病程1～8(4.5±2.8)年。聯(lián)合治療組，男42例，女33例；年齡60～71(65.5±4.3)歲；病程1～9(5.1±3.2)年。兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究病人及家屬均知情同意。

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)制訂的充血性心力衰竭的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]，經(jīng)我院檢查確診為慢性充血性心力衰竭，心功能Ⅱ～Ⅳ級(jí)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①病歷資料不全者；②卡維地洛、托拉塞米過(guò)敏或不耐受者；③惡性腫瘤病人；④肝、腎、肺等臟器功能障礙者；⑤溝通障礙者。

1.2 方法 兩組均給予維持水電解質(zhì)平衡、擴(kuò)張血管、強(qiáng)心、吸氧等常規(guī)治療。卡維地洛組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上使用卡維地洛(生產(chǎn)廠家：齊魯制藥有限公司，規(guī)格：每片10 mg，批號(hào)：20210326)治療，每次3.125 mg，每日2次，于早、晚飯后使用溫水進(jìn)行吞服，連續(xù)用藥14 d后將劑量調(diào)整為每次6.250 mg、每日2次，并逐漸提升用藥劑量，以85 kg為界，體重≤85 kg病人最高用藥劑量為每次25 mg、每日2次，體重>85 kg病人最高用藥劑量為每次50 mg、每日2次。聯(lián)合治療組在卡維地洛組治療基礎(chǔ)上給予托拉塞米(生產(chǎn)廠家：湖北亨迪藥業(yè)股份有限公司，規(guī)格：每片5 mg，批號(hào)：2100104)，初始劑量為每次10 mg、每日1次，于清晨使用溫水吞服，可根據(jù)病人病情發(fā)展情況對(duì)劑量進(jìn)行調(diào)整，最高劑量為200 mg，卡維地洛用法、用量與卡維地洛組保持一致。兩組均連續(xù)治療3個(gè)月。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 心功能 采用多普勒超聲檢測(cè)儀檢測(cè)病人心功能指標(biāo)，病人取左側(cè)臥位，M3S探頭頻率設(shè)置為2.0～4.0 MHz，進(jìn)行多平面掃查。觀測(cè)指標(biāo)包括心排血量(CO)、左室后壁厚度(LVPWT)、左室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)。

1.3.2 散射比濁法檢測(cè)肌鈣蛋白I(cTnI)、高敏肌鈣蛋白I(hs-TNI)、N末端B型鈉尿肽前體(NT-proBNP)水平 采集病人空腹靜脈血5 mL，離心處理后-80 ℃環(huán)境中保存。根據(jù)提取凝固的待測(cè)標(biāo)本在凝固的過(guò)程中散射光的變化來(lái)確定終點(diǎn)，在光探檢測(cè)器為90°的單色光源中向血清樣本加凝血激活劑，在樣品凝塊的過(guò)程中，散射光的強(qiáng)度會(huì)慢慢增加，當(dāng)血清樣本完全凝固后，光探測(cè)器會(huì)發(fā)生變化，會(huì)送到檢測(cè)器上處理并且描出凝固曲線后檢測(cè)cTnI、hs-TNI、NT-proBNP水平的變化。

1.3.3 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法檢測(cè)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、氧化氫酶(CAT)、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)、內(nèi)皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)水平 將血清置于室溫后，標(biāo)記酶標(biāo)板，制作標(biāo)準(zhǔn)品，然后取出試劑盒，以1∶2的稀釋液稀釋樣品；在反應(yīng)孔上依次加入稀釋好的待測(cè)血清和標(biāo)準(zhǔn)品，每孔100 μL，放置37 ℃恒溫孵育箱中濕育2 h；然后用專用的洗滌液將反應(yīng)板清洗3次以后，再加入抗體工作液(1∶100倍稀釋后)，每孔100 μL，放置于37 ℃恒溫孵育箱中濕育45 min；繼續(xù)清洗反應(yīng)板4次后，在反應(yīng)孔內(nèi)加入TMB溶液，每孔100 μL，置于37 ℃恒溫孵育箱中濕育45 min后在反應(yīng)孔內(nèi)加入終止液，每孔100 μL，終止反應(yīng)；在450 nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度，顏色反應(yīng)深淺與GSH-Px、ox-LDL、CAT、AngⅡ、ET-1、NO水平成正比，經(jīng)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算GSH-Px、ox-LDL、CAT、AngⅡ、ET-1、NO水平。

1.3.4 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)CX3趨化因子受體1(CX3CR1)、miR-423-5p表達(dá) 提取細(xì)胞總RNA，檢測(cè)RNA純度、含量，逆轉(zhuǎn)錄處理后獲得cDNA，使用Primer5.0軟件設(shè)計(jì)引物，內(nèi)參U6，采用2-△△Ct方法計(jì)算需要檢測(cè)的CX3CR1、miR-423-5p表達(dá)量。

1.4 療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 顯效：心功能改善2級(jí)，臨床癥狀基本消失；有效：心功能改善1級(jí)，臨床癥狀減輕或有所好轉(zhuǎn)；無(wú)效：心功能無(wú)改善，臨床癥狀未緩解甚至加重。總有效率=(顯效例數(shù)+有效例數(shù))/總例數(shù)×100%。

2 結(jié) 果

2.1 兩組CO、LVPWT、LVEDD比較 治療前，兩組CO、LVPWT、LVEDD比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，與卡維地洛組相比，聯(lián)合治療組CO水平升高，LVPWT、LVEDD降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見(jiàn)表1。

表1 兩組CO、LVPWT、LVEDD比較(±s)

2.2 兩組cTnI、hs-TNI、NT-proBNP水平比較 治療前，兩組cTnI、hs-TNI、NT-proBNP水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，與卡維地洛組相比，聯(lián)合治療組cTnI、hs-TNI、NT-proBNP水平均降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見(jiàn)表2。

表2 兩組cTnI、hs-TNI、NT-proBNP水平比較(±s)

2.3 兩組治療前后GSH-Px、ox-LDL、CAT水平比較 治療前，兩組GSH-Px、ox-LDL、CAT水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，與卡維地洛組相比，聯(lián)合治療組血清GSH-Px、CAT水平升高，ox-LDL水平降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見(jiàn)表3。

表3 兩組治療前后GSH-Px、ox-LDL、CAT水平比較(±s)

2.4 兩組AngⅡ、ET-1、NO水平比較 治療前，兩組AngⅡ、ET-1、NO水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，與卡維地洛組相比，聯(lián)合治療組血清AngⅡ、ET-1水平降低，NO水平升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見(jiàn)表4。

表4 兩組AngⅡ、ET-1、NO水平比較(±s)

2.5 兩組治療前后CX3CR1、miR-423-5p表達(dá)比較 治療前，兩組CX3CR1、miR-423-5p表達(dá)比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，與卡維地洛組相比，聯(lián)合治療組CX3CR1、miR-423-5p表達(dá)降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見(jiàn)表5。

表5 兩組治療前后CX3CR1、miR-423-5p表達(dá)比較(±s)

2.6 兩組臨床療效比較 聯(lián)合治療組治療總有效率高于卡維地洛組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見(jiàn)表6。

表6 兩組臨床療效比較

3 討 論

慢性充血性心力衰竭是一種由心血管疾病導(dǎo)致的心肌缺血性功能障礙、心室充盈以及射血障礙疾病，具有病情嚴(yán)重程度較高、臨床治療難度較大、病死率較高的特點(diǎn)，嚴(yán)重威脅病人生命安全[8-10]?？ňS地洛能夠靶向阻斷鈣離子通路，具有調(diào)血脂、降血壓及較為理想的心臟保護(hù)作用[11-12]。托拉塞米是一種高效髓袢利尿劑，也常用于慢性充血性心力衰竭的治療[13]。但是，目前關(guān)于卡維地洛聯(lián)合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭的臨床研究鮮有報(bào)道。

慢性充血性心力衰竭的發(fā)生、發(fā)展伴隨著機(jī)體心功能異常。有研究表明，提升病人心功能是改善慢性充血性心力衰竭病人預(yù)后的關(guān)鍵[14-15]。CO、LVPWT、LVEDD是常用的心功能指標(biāo)，檢測(cè)CO、LVPWT、LVDED水平，能夠?qū)β猿溲孕牧λソ卟∪诵墓δ軤顩r、病情嚴(yán)重程度及臨床治療效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。本研究結(jié)果顯示，卡維地洛聯(lián)合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭病人，可明顯調(diào)控CO、LVPWT、LVEDD水平，說(shuō)明二者聯(lián)合治療能夠通過(guò)改善慢性充血性心力衰竭病人心功能而起到改善預(yù)后的作用。

慢性充血性心力衰竭癥狀嚴(yán)重程度與心肌組織細(xì)胞損傷程度具有密切聯(lián)系，改善心肌組織細(xì)胞損傷程度對(duì)慢性充血性心力衰竭癥狀緩解具有重要作用。cTnI、hs-TNI是敏感性的心肌損傷標(biāo)志物，檢測(cè)cTnI、hs-TNI水平能夠?qū)π募p傷程度進(jìn)行評(píng)價(jià)[16-17]。NT-proBNP也常用于評(píng)價(jià)機(jī)體心功能狀況、心力衰竭嚴(yán)重程度[18]。本研究結(jié)果顯示，卡維地洛聯(lián)合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭，可明顯降低病人cTnI、hs-TNI、NT-proBNP水平，說(shuō)明二者聯(lián)合能夠減輕慢性充血性心力衰竭病人心肌損傷嚴(yán)重程度，緩解心力衰竭癥狀，從而發(fā)揮治療效果。

大量臨床研究表明，心力衰竭癥狀的發(fā)生發(fā)展與氧化應(yīng)激反應(yīng)具有密切聯(lián)系，GSH-Px、ox-LDL、CAT是常用的評(píng)價(jià)抗氧化防御系統(tǒng)狀況的指標(biāo)，三者水平變化與機(jī)體抗氧化防御系統(tǒng)狀況、氧化應(yīng)激損傷嚴(yán)重程度密切相關(guān)，能夠反映機(jī)體氧化應(yīng)激損傷狀況。本研究結(jié)果顯示，卡維地洛聯(lián)合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭病人能調(diào)控GSH-Px、ox-LDL、CAT水平，改善慢性充血性心力衰竭病人抗氧化防御系統(tǒng)狀況，減輕氧化應(yīng)激損傷。

慢性充血性心力衰竭癥狀發(fā)生、發(fā)展與血管內(nèi)皮功能障礙有密切聯(lián)系[19-20]。武子舉[21]研究表明，改善慢性充血性心力衰竭病人血管內(nèi)皮功能對(duì)病人病情恢復(fù)具有重要意義。本研究結(jié)果顯示，卡維地洛聯(lián)合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭病人能夠調(diào)控AngⅡ、ET-1、NO水平，改善血管內(nèi)皮功能。

有研究表明，CX3CR1、miR-423-5p在慢性充血性心力衰竭中呈現(xiàn)異常表達(dá)，參與慢性充血性心力衰竭的發(fā)生發(fā)展[22-23]。本研究結(jié)果顯示，卡維地洛聯(lián)合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭病人，可使CX3CR1、miR-423-5p表達(dá)下調(diào)，說(shuō)明二者聯(lián)合能夠調(diào)控CX3CR1、miR-423-5p表達(dá)，緩解慢性充血性心力衰竭病人病情。

綜上所述，卡維地洛聯(lián)合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭病人，可改善心功能、血管內(nèi)皮功能，減輕心肌損傷、氧化應(yīng)激損傷，下調(diào)CX3CR1、miR-423-5p表達(dá)，治療效果較好，為慢性充血性心力衰竭的治療提供了一定的參考價(jià)值。