• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    仙人掌多糖提取、純化、結(jié)構(gòu)表征及生物活性研究進(jìn)展

    2022-06-02 08:45:12陳華國(guó)
    食品與機(jī)械 2022年5期
    關(guān)鍵詞:仙人掌多糖小鼠

    楊 艷 周 欣,2 陳華國(guó),2

    (1. 貴州師范大學(xué)貴州省山地環(huán)境信息系統(tǒng)與生態(tài)環(huán)境保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,貴州 貴陽(yáng) 550001;2. 貴州師范大學(xué)貴州省藥物質(zhì)量控制及評(píng)價(jià)技術(shù)工程實(shí)驗(yàn)室,貴州 貴陽(yáng) 550001)

    仙人掌(OpuntiadilleniiHaw.)是仙人掌科縮刺仙人掌的變種,具有行氣活血、清熱解毒、消腫止痛、健脾止瀉、安神利尿等功效,是一種藥食兩用植物[1-2]。仙人掌含有多種化學(xué)物質(zhì),如生物堿、黃酮類、多糖、酚類、微元素等[3],其中多糖作為仙人掌的主要活性成分之一,可從仙人掌莖和果實(shí)中獲取。根據(jù)提取方法不同,仙人掌多糖得率會(huì)有差異。近年來,仙人掌多糖因具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗炎、保肝、抗腫瘤、降血脂血糖等生物活性備受科技工作者的關(guān)注。文章擬對(duì)仙人掌多糖提取、純化、結(jié)構(gòu)表征及生物活性等方面的研究情況進(jìn)行綜述,以期為其深度開發(fā)與利用提供依據(jù)。

    1 仙人掌多糖的提取與分離純化

    多糖是一類大分子物質(zhì),具有良好的生物活性,且無明顯毒副作用,因而具備良好的開發(fā)利用潛質(zhì),是新型保健食品和醫(yī)藥產(chǎn)品的潛在優(yōu)質(zhì)原料源[4]。仙人掌多糖提取方法主要有熱水法[5]、酸法[6]、酶法[7]、超聲波法[8]、微波輔助法[9]、微生物法[10]等,各類提取方法的得率和優(yōu)缺點(diǎn)見表1。熱水法與酸法的提取原理相似,通過熱水或者酸性溶液使細(xì)胞壁破裂,釋放多糖[14]。焦偉艷等[15]采用熱水法浸提野生仙人掌多糖成分,冷凍干燥后多糖得率為6.61%。酶法、超聲波法及微波輔助法分別是通過酶破環(huán)細(xì)胞壁和細(xì)胞膜、超聲波破壁及微波加熱破壁的原理提取仙人掌多糖[16]。

    通過表1中方法提取的仙人掌粗多糖中常含蛋白質(zhì)、色素及小分子物質(zhì)等雜質(zhì),需對(duì)其分別除去。仙人掌粗多糖中的蛋白常用Sevag法(氯仿—正丁醇)、三氯乙酸法、酶法、等電點(diǎn)法等除去[17]。三氯乙酸法是仙人掌粗多糖中最常用的提取方法,具有效率高、用量少等優(yōu)點(diǎn),但高濃度的三氯乙酸會(huì)加快多糖的降解,破壞其結(jié)構(gòu),因此一般選擇質(zhì)量濃度為3%~5%比較合適。當(dāng)使用3%的三氯乙酸時(shí),多糖損失率僅為5.98%;Sevag法雖成本低、適用范圍廣,但需要重復(fù)多次才能除去多糖中的蛋白質(zhì),隨著次數(shù)的增加多糖損失率也隨之增加,處理7次多糖損失率高達(dá)36.92%,此時(shí)蛋白僅除去了58.30%,且氯仿有毒,溶劑殘留物可能會(huì)造成多糖活性的下降;與前兩種方法相比,等電點(diǎn)法反應(yīng)條件較溫和,當(dāng)pH 3.5時(shí)多糖損失率僅為1.67%,但仙人掌多糖的抗氧化活性卻不及Sevag法和三氯乙酸法[18]。相較其他3種方法,酶法雖然耗時(shí),但其作用條件溫和,不易破環(huán)多糖活性,無有機(jī)試劑造成的危害,且隨著酶濃度的增加,多糖損失變化不大[19],是一種較為理想的脫蛋白手段。仙人掌粗多糖脫色素一般可用雙氧水脫色法和樹脂脫色法,而不用活性炭,因?yàn)榛钚蕴坎粌H吸附色素也會(huì)吸附多糖[20];石油醚一般用于脫脂,但也可除去部分色素;利用樹脂可以除去仙人掌粗多糖中的色素,主要是因?yàn)槠渚哂休^強(qiáng)的吸附力,且多糖損失較少[21]。

    表1 仙人掌多糖不同提取方法及其優(yōu)缺點(diǎn)Table 1 Different extraction methods of Opuntia dillenii Haw.polysaccharides and their advantages and disadvantages

    為了能夠更準(zhǔn)確分析仙人掌多糖的分子量、單糖組成及糖苷鍵構(gòu)型等信息,在上述純化的基礎(chǔ)上需對(duì)仙人掌粗多糖進(jìn)一步分離純化,以獲得均一多糖。通常情況下,仙人掌多糖可用離子交換層析法和凝膠層析分離法獲取均一多糖。離子交換層析法主要是以DEAE-52、DEAE-Sepharose Fast Flow、DEAE-Sepharose A-25等為固定相,NaOH溶液或者NaCl溶液為流動(dòng)相,按1 mL/min的流速進(jìn)行洗脫,使仙人掌多糖溶液中殘留的蛋白、色素等雜質(zhì)與多糖溶液分離,獲得純度較高的仙人掌多糖[22];凝膠層析分離法是以SephadexG-75、SephadexG-100、SephadexG-200、Sephadex S-400等為固定相,NaOH溶液或者NaCl溶液為流動(dòng)相,18 mL/h進(jìn)行洗脫,使多糖大分子與無機(jī)鹽等小分子進(jìn)行分離,得到純度更高的仙人掌多糖。朱苗[17]采用水提法獲得野生仙人掌粗多糖,通過DEAE-Sepharose Fast Flow(2.5 cm×30 cm)的離子交換層析柱,利用NaCl溶液進(jìn)行連續(xù)梯度洗脫和分布洗脫的方式,得到多糖純度高的仙人掌多糖溶液,濃縮,醇沉,沉淀冷凍干燥,得到多糖組分ODP-Ⅱ;ODP-Ⅱ溶液通過Sephadex S-400(1.6 cm×100 cm)凝膠層析柱,0.05 mol/L NaCl溶液分步洗脫后,得到分子量均一的多糖。林愛琴等[23]將已脫蛋白的多糖溶液過DEAE-Sepharose A-25柱(1.5 cm×30 cm),采用0.1 mol/L NaCl溶液等度洗脫后再進(jìn)行梯度洗脫,得到OPA、OPB兩個(gè)級(jí)分,將其透析、醇沉后,沉淀經(jīng)過無水乙醇和丙酮洗滌,干燥,得到純度為92.20%和86.91%的OPA、OPB兩個(gè)多糖組分。陶美華等[24]將仙人掌粗多糖溶液先經(jīng)過離子交換柱分離后,又利用SephadexG-75、SephadexG-200凝膠濾過柱再次分離,得到ODP1、ODP2、ODP3、ODP4、ODP5 5個(gè)多糖組分,通過醋酸纖維薄膜電泳法對(duì)其進(jìn)行鑒定,發(fā)現(xiàn)電泳結(jié)果均為單一區(qū)帶。仙人掌多糖提取與分離純化的基本思路與流程圖見圖1。

    圖1 仙人掌多糖的提取純化Figure 1 Extraction and purification of Opuntia dillenii Haw.polysaccharides

    2 仙人掌多糖的結(jié)構(gòu)表征

    多糖結(jié)構(gòu)分為初級(jí)結(jié)構(gòu)和高級(jí)結(jié)構(gòu),初級(jí)結(jié)構(gòu)主要關(guān)注主鏈和支鏈的組成,而高級(jí)結(jié)構(gòu)則涉及主鏈間的構(gòu)象及多糖間非共價(jià)鍵作用[25-26]等。目前,由于受分析手段與技術(shù)的限制,仙人掌多糖結(jié)構(gòu)表征主要是從初級(jí)結(jié)構(gòu)方面開展相關(guān)研究,即從總糖含量、雜質(zhì)測(cè)定、分子量大小及分布、單糖組成及摩爾比、糖苷鍵類型等角度展開。涉及的方法和技術(shù)主要包括紅外光譜(IR)、核磁共振波譜(NMR)、高效液相色譜(HPLC)、氣相色譜(GC)、氣相色譜—質(zhì)譜(GC-MS)、甲基化分析、完全酸水解、部分酸水解和Smith降解[27-28]等。高級(jí)結(jié)構(gòu)主要涉及超分子結(jié)構(gòu)、在溶液中構(gòu)象、網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)等方面,測(cè)定方法主要有X射線衍射法、熒光相關(guān)光譜、分子模型的構(gòu)建、原子力顯微鏡法[29-30]等。目前,關(guān)于仙人掌多糖高級(jí)結(jié)構(gòu)的研究鮮有報(bào)道,為了更好、更全面地發(fā)揮仙人掌多糖的潛在價(jià)值,后續(xù)可對(duì)其進(jìn)一步深入探討。

    2.1 含量測(cè)定

    目前,多糖含量測(cè)定方法主要有蒽酮—硫酸法、苯酚—硫酸法、比色量法、原子吸收法、HPLC法、酶法、DNS(還原)法、離子交換色譜法[31]等。苯酚—硫酸法和蒽酮—硫酸法具有操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)速度快等特點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于各種研究中[32-33]。何火聰?shù)萚34]研究表明,苯酚—硫酸法的穩(wěn)定性、精密度及回收率均高于蒽酮—硫酸法,是測(cè)定仙人掌多糖含量的理想方法,但苯酚易氧化,操作時(shí)應(yīng)快速且避光保存。趙龍巖等[8]采用雙酶法提取仙人掌多糖,苯酚—硫酸法測(cè)定多糖含量,為83.02%。Wu等[35]對(duì)熱水法提取的仙人掌多糖除蛋白后,利用5 000 Da 濾膜對(duì)仙人掌粗多糖進(jìn)行過濾,苯酚—硫酸法測(cè)得其總糖含量為91.46%。

    2.2 雜質(zhì)測(cè)定

    仙人掌多糖常含有蛋白質(zhì)、多酚、氨基酸、多肽、低聚糖、色素、生物堿、核酸等雜質(zhì),不僅對(duì)其質(zhì)量和純度有影響,還會(huì)影響后續(xù)的純化、結(jié)構(gòu)測(cè)定及生物活性。多糖中蛋白質(zhì)含量一般可采用考馬斯亮藍(lán)G-250法和紫外檢測(cè)法進(jìn)行定量和定性測(cè)定,朱苗[17]采用離子柱層析法除去仙人掌粗多糖中蛋白質(zhì)后,經(jīng)SephacrylS-400凝膠柱后,得到分子量均一的ODP-Ⅱa和ODP-Ⅱb兩個(gè)多糖組分,且260,280 nm處均無特征峰出現(xiàn),說明不含氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽等雜質(zhì)。多酚作為仙人掌的主要活性成分之一,常采用溶劑提取法獲得,仙人掌多糖提取過程中,石油醚脫脂時(shí)可除去大部分色素和多酚類物質(zhì),剩余部分多酚類物質(zhì)可用分光光度法對(duì)其測(cè)定;嚴(yán)贊開[36]采用分光光度法測(cè)得仙人掌中多酚含量為71 mg/kg,目前,有關(guān)仙人掌多糖中多酚含量的測(cè)定尚未見報(bào)道;張郁松[37]利用活性炭、Sevag法、透析對(duì)仙人掌粗多糖中的色素、蛋白質(zhì)及小分子物質(zhì)進(jìn)行處理,經(jīng)淀粉試驗(yàn)、雙縮脲試驗(yàn)、茚三酮試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn),該樣品中不含淀粉、多肽、氨基酸等雜質(zhì),含少量蛋白質(zhì),通過生物堿鑒定和甾體化合物鑒定后,發(fā)現(xiàn)不含生物堿和甾體化合物。陶美華等[38]對(duì)仙人掌粗多糖進(jìn)行雜質(zhì)定性和定量測(cè)定,其蛋白質(zhì)含量為9.86%,核酸含量為7.35%。

    2.3 分子量測(cè)定

    目前,測(cè)定多糖分子量的方法主要有HPLC、高效凝膠色譜法(HPGPC)、高效凝膠過濾色譜法(HPGFC)、聚丙烯酰胺凝膠電泳法、超濾截留法[39]等。金鑫等[40]利用SephacrylS-400柱對(duì)水提仙人掌粗多糖進(jìn)行純化后,通過HPGPC測(cè)定其相對(duì)分子量為1.25×105Da;郭燕嬌等[41]采用DEAE-纖維素離子交換層析柱對(duì)水提醇沉的多糖溶液進(jìn)行分離純化,得到OPS-1、OPS-2、OPS-3 3個(gè)多糖組分,經(jīng)HPGFC檢測(cè)到分子量分別為1.25×105,1.98×105,4.31×104Da;林愛琴等[23]通過DEAE-SephadexA-25分離得到兩個(gè)級(jí)分OPA、OPB,經(jīng)高效液相色譜和聚丙烯酰胺凝膠電泳發(fā)現(xiàn)兩個(gè)級(jí)分均為單一組分,且分子量分別為3.64×105,1.68×105Da;Cai等[42]利用離子交換層析柱和凝膠層析柱分離純化得到3個(gè)多糖組分,經(jīng)HPGFC檢測(cè)到WSP-1、WSP-2a、WSP-3重均分子量分別為2.32×106,1.24×106,7.92×106Da。

    2.4 單糖組成及摩爾比

    單糖組成常用的測(cè)定方法有HPLC、GC、毛細(xì)管電泳法等;其中GC和HPLC是確定單糖組成和含量最有效的方法[43]。仙人掌多糖主要由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、果糖、葡萄糖、糖醛酸及鼠李糖等聚合而成[42,44]。郭燕嬌等[41]通過DEAE-纖維素柱分離仙人掌粉末得到OPS-1、OPS-2、OPS-3 3個(gè)多糖組分,其中OPS-1主要由葡萄糖、木糖、阿拉伯糖組成,其比例為1.5∶12.9∶1.0;OPS-2由甘露糖、鼠李糖、葡糖糖醛酸、半乳糖醛酸、木糖、阿拉伯糖、葡糖糖組成,比例為1.0∶15.6∶1.0∶2.4∶8.2∶41.6∶36.3;OPS-3由葡糖糖、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖組成,比例為1.0∶2.4∶1.4∶1.4。趙倩[45]通過熱水浸提法提取梨果仙人掌莖粗多糖,經(jīng)HPLC發(fā)現(xiàn)梨果仙人掌多糖主要由葡糖糖、阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、巖藻糖、甘露糖、葡糖糖醛酸、核糖、甘露糖醛酸、氨基葡糖糖、半乳糖胺、木糖組成。

    2.5 結(jié)構(gòu)測(cè)定

    與其他植物多糖的測(cè)定類似,仙人掌多糖水解衍生化后,可利用HPLC、UV、IR、GC-MS、1H-NMR、原子力顯微鏡(AFM)等現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)[46],對(duì)其單糖組成、糖苷鍵構(gòu)型及連接方式等結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征。郭燕嬌等[41]發(fā)現(xiàn)仙人掌多糖的單糖組成和分子量受產(chǎn)地、提取方法以及純化柱料影響,但通過PMP柱前衍生化HPLC法后,不同組分的仙人掌多糖中均含有葡萄糖、木糖、阿拉伯糖3種單糖。朱苗[17]將分離純化后的仙人掌多糖-Ⅱa進(jìn)行碘—碘化鉀反應(yīng),發(fā)現(xiàn)仙人掌多糖中分支少且側(cè)鏈較短,剛果紅試驗(yàn)表明,仙人掌多糖-Ⅱa不具有三螺旋結(jié)構(gòu)。Xlsabc等[30]通過IR、NMR及GC-MS等儀器分析,得到WSP2a的糖苷鍵構(gòu)型主要是b型,單糖中以1→2或1→4鍵的糖基較多,鼠李糖則以1→3糖基存在,通過AFM觀察到仙人掌粗多糖呈聚焦?fàn)顟B(tài),部分呈絲網(wǎng)狀,且具有良好的成膜性能。目前,針對(duì)仙人掌多糖結(jié)構(gòu)表征的相關(guān)研究不多,但整體而言,多糖結(jié)構(gòu)的測(cè)定仍處于探索階段,手段還不夠成熟,存在諸多不足,如多糖自身分子量較大,紫外吸收困難,純化后缺乏定性定量分析的對(duì)照品等,這在一定程度上限制了仙人掌多糖的開發(fā)與利用。

    3 仙人掌多糖的生物活性

    近年來,多糖在食品、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)和化妝品行業(yè)的發(fā)展中有著重要的應(yīng)用前景。仙人掌作為一種可食用和藥用的植物,其多糖成分具有多種重要的藥用和食用價(jià)值。目前,對(duì)其關(guān)注的焦點(diǎn)主要在免疫調(diào)節(jié)[47-48]、抗氧化[11,49]、降血糖[50]、降血脂[51]、抗腫瘤[52]、抑菌[10]、抗炎[53]及保肝[54]等方面。由于受當(dāng)前提取技術(shù)的限制,仙人掌多糖純度不高,即使是通過不同技術(shù)手段純化后仍有少量雜質(zhì)存在,這類雜質(zhì)的存在是否影響仙人掌多糖的生物活性尚不明確。仙人掌多糖生物活性及其作用機(jī)制見圖2。

    3.1 免疫調(diào)節(jié)作用

    仙人掌多糖可以通過提高胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率來增強(qiáng)免疫功能[47],李恒等[48]以RAW264.7細(xì)胞為研究對(duì)象,對(duì)TLR4-My88信號(hào)通路進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),仙人掌多糖可以促進(jìn)TLR4高表達(dá),活化TRAF6、IKKb、MyD88蛋白因子的表達(dá),從而增強(qiáng)機(jī)體免疫力。張松蓮等[55]通過對(duì)糖尿病小鼠灌胃野生仙人掌多糖發(fā)現(xiàn),野生仙人掌多糖能夠通過減少小鼠血清NO含量,提高IgM、IgG含量和促進(jìn)T、B淋巴細(xì)胞增殖,避免胰島b細(xì)胞損傷,使CD4+/CD8+T細(xì)胞恢復(fù)正常比值,從而提高糖尿病小鼠免疫力。Schepetkin等[56]發(fā)現(xiàn),多刺仙人掌多糖不僅無細(xì)胞毒性,還能激活巨噬細(xì)胞,將多刺仙人掌多糖作用于小鼠和人單核/巨噬細(xì)胞后,細(xì)胞活化產(chǎn)生的TNF-α和iNOS可進(jìn)一步激活NF-κB通路,通過激活NO、活性氧及NF-κB,從而增強(qiáng)免疫能力。

    Zhao等[57]通過免疫抑制小鼠模型發(fā)現(xiàn)仙人掌多糖是一種良好的免疫調(diào)節(jié)劑,可以促進(jìn)IgM、IgG的生成和降低CD4+/CD8+的比值,使T、B淋巴細(xì)胞增殖能力恢復(fù)正常,增強(qiáng)小鼠的特異性免疫能力。

    3.2 抗氧化作用

    生物體代謝過程中會(huì)產(chǎn)生各種氧自由基,過多的氧自由基及其誘導(dǎo)的氧化反應(yīng)會(huì)損害各個(gè)組織器官,誘導(dǎo)糖尿病、阿爾茨海默病和心臟病等疾病產(chǎn)生[58-59]。目前,大部分抗氧化劑都是合成的,具有潛在的副作用,仙人掌多糖作為一種天然抗氧劑,毒副作用小,深受研究者的歡迎。Yang等[11]利用DPPH法評(píng)價(jià)不同純度仙人掌多糖的抗氧化能力,隨著多糖純度從27.36%增加到90.12%,其IC50值顯著下降,說明仙人掌多糖具有顯著的抗DPPH自由基能力。Li等[49]證實(shí)了仙人掌多糖不僅可以顯著清除DPPH自由基,對(duì)超氧陰離子自由基和羥自由基的清除效果也非常顯著,且呈劑量關(guān)系。徐叢玥等[60]對(duì)酶提取法、熱水提取法及超聲波提取法得到的仙人掌多糖進(jìn)行體外抗氧化試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),不同提取方法間抗氧化能力差異較大,其中酶提取法的粗多糖得率為10.14%,是超聲波提取法和熱水提取法的5倍;其抗肝組織自發(fā)性脂質(zhì)過氧化能力、清除羥基自由基能力、清除超氧陰離子能力、清除DPPH自由基能力、總還原能力、總抗氧化能力均高于后兩種方法,可能是不同提取方法獲得的仙人掌多糖的單糖組成和結(jié)構(gòu)存在差異性,導(dǎo)致多糖結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,進(jìn)而影響其活性作用。

    3.3 降血糖作用

    糖尿病是現(xiàn)代社會(huì)最常見的代謝性疾病之一。中國(guó)糖尿病的預(yù)防及控制狀況仍較為嚴(yán)峻[61],用于治療糖尿病的藥物不僅昂貴還有潛在的副作用。近年來,許多天然植物源藥物由于毒副作用小被廣泛用于糖尿病的治療中[62]。馬東升等[50]以2型糖尿病大鼠為試驗(yàn)對(duì)象,灌胃仙人掌多糖后,大鼠攝食量和飲水量顯著減少,隨著多糖濃度增加,其體重與其他組存在顯著性差異,通過對(duì)肝臟系數(shù)測(cè)定后發(fā)現(xiàn),大鼠肝糖原分解代謝增加,肝臟系數(shù)相對(duì)減低,說明仙人掌多糖可能通過改善腸道的菌落生態(tài)環(huán)境,延遲腸道對(duì)碳水化合物的吸收和利用,從而顯著降低糖尿病大鼠的血糖。Gao等[63]利用鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)糖尿病小鼠,仙人掌多糖干預(yù)后,活性氧清除能力和抗氧化酶活性顯著提高,保護(hù)肝組織免受過氧化損傷,顯著控制小鼠的血糖和血脂水平。Li等[64]發(fā)現(xiàn)仙人掌多糖可以通過上調(diào)Nrf2及其下游蛋白的表達(dá),降低氧化應(yīng)激,使INS-1細(xì)胞活力和SOD、GSH活性顯著恢復(fù),乳酸脫氫酶(LDH)釋放量和活性氧(ROS)、NO、MDA水平顯著降低,阻止了b細(xì)胞凋亡,有效預(yù)防與糖尿病相關(guān)的氧化應(yīng)激。綜上,仙人掌多糖是一種潛在的預(yù)防和治療高血糖的天然藥物源和功能食品。

    3.4 降血脂作用

    高血脂是人體內(nèi)脂質(zhì)代謝失常,血漿中某些脂質(zhì)成分異常升高的一種疾病,嚴(yán)重可引起高血壓、冠心病、腦血管病等[65]。目前,西藥已成為治療高血脂疾病的常用藥物,這些藥物短時(shí)間內(nèi)會(huì)有良好的治療效果,但長(zhǎng)期服用會(huì)出現(xiàn)抗藥性、毒副作用等。而傳統(tǒng)中草藥卻很少存在這樣的問題,且在治療高血脂癥方面已有一定成就。Zhao等[51]對(duì)高血脂大鼠灌胃不同劑量的仙人掌多糖,當(dāng)劑量為400 mg/kg時(shí),抗氧化酶的活性顯著提高,MDA含量顯著降低,可調(diào)節(jié)膽固醇?;D(zhuǎn)移酶(LCAT)和HMG-CoA還原酶活性使膽固醇降低,大鼠肝臟總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平顯著降低,推測(cè)仙人掌多糖降低大鼠血脂主要是通過提高抗氧化酶和還原酶的作用實(shí)現(xiàn)的。李莉梅等[43]發(fā)現(xiàn)仙人掌多糖降血脂的機(jī)制可能是通過抑制3-羥基-3-甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-COA還原酶)活性,減少機(jī)體對(duì)脂類的吸收和脂質(zhì)過氧化,從而達(dá)到降血脂作用。目前,針對(duì)仙人掌多糖降血脂的作用機(jī)制處于試驗(yàn)階段,隨著對(duì)仙人掌多糖結(jié)構(gòu)的深入研究,可更深入研究其降血脂機(jī)理,拓展其應(yīng)用領(lǐng)域。

    3.5 抗腫瘤作用

    目前,癌癥的治療主要通過手術(shù)和放射性治療兩種手段,這嚴(yán)重?fù)p害人體健康。天然藥物因毒副作用小成為治療腫瘤的研究熱點(diǎn),不同種類科屬植物的抗腫瘤機(jī)制具有多面性,不同種屬之間無顯著差異[66]。仙人掌作為天然藥物歷史悠久,其多糖對(duì)腫瘤具有較好的活性。殷姿等[52]將仙人掌多糖對(duì)卵巢癌大鼠進(jìn)行干預(yù)后,Bcl-2、PI3K、Akt、PTEN、p-Akt、mTOR表達(dá)明顯受到調(diào)控,當(dāng)多糖劑量升至60 mg/kg時(shí),可顯著促進(jìn)卵巢癌組織細(xì)胞凋亡,阻滯癌組織周期。車加祥等[67]將仙人掌多糖作用于人肺癌A549細(xì)胞,測(cè)定IC50值和生長(zhǎng)曲線發(fā)現(xiàn),癌細(xì)胞凋亡數(shù)目有明顯變化,當(dāng)多糖質(zhì)量濃度為597.549 μg/mL時(shí),抑制A549細(xì)胞作用最強(qiáng),能夠顯著誘導(dǎo)其發(fā)生細(xì)胞凋亡。孫超等[68]發(fā)現(xiàn)仙人掌多糖還可以顯著抑制胃癌SGC-7901細(xì)胞和大腸癌Lovo細(xì)胞增殖,當(dāng)仙人掌多糖質(zhì)量濃度為20 μg/mL時(shí)對(duì)其生長(zhǎng)抑制率最高。李濤等[69]通過MTT法測(cè)定仙人掌多糖對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖的抑制率,隨著仙人掌多糖濃度增加,抑制率隨之提高,當(dāng)質(zhì)量濃度為40 mg/L時(shí),抑制率達(dá)78.7%。吳迪等[70]發(fā)現(xiàn)仙人掌多糖對(duì)SK-MES-1肺磷癌細(xì)胞具有一定的抑制作用。仙人掌多糖對(duì)SK-MES-1肺磷癌細(xì)胞抑制效率不高,可能與仙人掌多糖純度、作用機(jī)制及細(xì)胞性質(zhì)有關(guān)。大量研究表明,植物多糖對(duì)癌癥患者具有較好的治療效果,是目前較為理想的一種抗癌藥物,與其他植物多糖相比,仙人掌擁有較長(zhǎng)的藥用歷史,且其多糖成分對(duì)肺癌[67,70]、胃癌[68]、乳腺癌[69]等癌細(xì)胞凋亡具有顯著促進(jìn)作用。

    3.6 抑菌、抗炎作用

    在民間,仙人掌常被用于外服消炎,而《本草綱目拾遺》中也有記載,其具有消腫止痛的功效。袁海娜[71]采用水提醇沉法制備仙人掌多糖,通過管蝶法和混合涂布法發(fā)現(xiàn),仙人掌多糖對(duì)食品中常見的大腸桿菌(E.coli)、金黃色葡萄球菌(S.aureus)、釀酒酵母(S.cerevisiae)、青霉(P.frequentans)具有抑制作用,受仙人掌形態(tài)的影響,抑制效果無差異。整體而言,仙人掌多糖可顯著抑制S.aureus和S.cerevisiae的生長(zhǎng)和發(fā)展,但對(duì)E.coli效果不明顯。郭慶啟等[10]利用微波輔助提取仙人掌多糖發(fā)現(xiàn),其對(duì)E.coli具有明顯的抑制作用。不同的提取方式可能會(huì)使仙人掌多糖組成和結(jié)構(gòu)存在差異,導(dǎo)致多糖抑菌機(jī)制不同,故出現(xiàn)了兩者試驗(yàn)結(jié)果相反的情況,具體抑菌機(jī)制還需進(jìn)一步闡明。戴小華等[72]通過小鼠耳腫脹法和大鼠足腫脹法發(fā)現(xiàn),仙人掌粗多糖可以顯著抑制炎癥反應(yīng),且高劑量的作用效果更加明顯。程秀峰等[53]將梨果仙人掌莖多糖作用于炎癥小鼠,通過對(duì)小鼠足腫脹及血漿中炎癥因子含量的測(cè)定發(fā)現(xiàn),隨著多糖劑量從100 mg/kg升至400 mg/kg,IL-1β、IFN-γ、TNF-α炎癥因子的表達(dá)水平降低,說明梨果莖多糖能有效抑制炎癥發(fā)展,且呈一定的量效關(guān)系。

    3.7 保肝作用

    肝臟對(duì)機(jī)體尤為重要,長(zhǎng)期的肝損傷可導(dǎo)致肝纖維化、肝癌,甚至肝功能衰竭。目前,治療肝損傷的藥物主要是核苷類、護(hù)肝降酶藥等化學(xué)藥物,患者服用后容易形成依賴且存在一定的副作用[73]。因此,尋找一種安全、無毒副作用的藥物成為目前治療肝損傷的重點(diǎn)和難點(diǎn)。喻寧華等[54]對(duì)CCl4造成的急性肝損傷小鼠灌胃仙人掌多糖,通過血清和肝組織病理學(xué)檢測(cè),小鼠血清中ALT和AST活性顯著降低,可減輕肝組織的病理變化;肝勻漿后,仙人掌多糖可以提高 GR、GST、GSH-Px等酶活性,維持細(xì)胞膜的正常結(jié)構(gòu),阻止脂質(zhì)過氧化反應(yīng),從而有效發(fā)揮護(hù)肝作用。目前雖有報(bào)道稱仙人掌多糖有顯著的護(hù)肝功效[74],但其作用機(jī)制不夠成熟,后續(xù)可以增加肝損傷的其他模型,從多方面、多角度對(duì)仙人掌多糖進(jìn)行研究,發(fā)展仙人掌多糖潛在的藥理和功能食品的價(jià)值。

    3.8 其他作用

    仙人掌多糖除了具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗腫瘤等作用外,在保護(hù)神經(jīng)組織和DNA損傷領(lǐng)域也發(fā)揮重要作用。王海濤等[75]通過血紅細(xì)胞(RBC)溶血試驗(yàn)及彗星試驗(yàn)對(duì)細(xì)胞膜和DNA損傷度進(jìn)行測(cè)定,米邦塔仙人掌多糖干預(yù)后,抑制十二烷基硫酸鈉(SOD)致?lián)p細(xì)胞膜和DNA損傷的作用與劑量呈明顯的量效關(guān)系。楊鈞勇等[76]發(fā)現(xiàn)米幫塔仙人掌多糖對(duì)小鼠認(rèn)知功能損傷有一定的改善作用,通過不同劑量的仙人掌多糖作用于小鼠慢性應(yīng)激組,隨著濃度增加,小鼠認(rèn)知功能明顯改善,同時(shí)BDNF蛋白的表達(dá)也明顯增加,說明仙人掌多糖干預(yù)后,通過上調(diào)BDNF蛋白的表達(dá)可改善認(rèn)知功能損傷。唐焜等[77]對(duì)缺血—再灌注損傷的大鼠模型灌注仙人掌多糖,當(dāng)仙人掌多糖劑量為200 mg/kg 時(shí),大鼠腦梗死體積減少,海馬神經(jīng)元丟失顯著減少,減輕腦組織的形態(tài)學(xué)損傷,從而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。陳揚(yáng)[78]建立了整體腦缺血復(fù)灌模型和離體原代培養(yǎng)神經(jīng)元氧糖剝奪(OGD)模型,仙人掌多糖干預(yù)后,對(duì)ODG引起的神經(jīng)元損傷有一定的減輕作用;經(jīng)神經(jīng)行為學(xué)和組織學(xué)評(píng)價(jià)發(fā)現(xiàn)小鼠學(xué)習(xí)障礙得到改善,且NMDAR2B、NMDAR1和BDNF蛋白表達(dá)水平提高,從而對(duì)缺血性腦損傷起到保護(hù)作用。

    4 結(jié)論及展望

    近年來,仙人掌被國(guó)內(nèi)外研究者日益重視,其多糖成分的許多生物活性及功能也逐漸進(jìn)入大眾視野。隨著對(duì)仙人掌多糖的提取、分離純化、結(jié)構(gòu)表征及生物活性的深入研究,取得了很大的進(jìn)展,同時(shí)也存在很多亟待解決的問題:① 目前仙人掌多糖的提取技術(shù)形式單一,不同提取方法得到的多糖分子量及單糖組成差異明顯。② 仙人掌多糖的空間結(jié)構(gòu)與其生物活性密切相關(guān),其多糖結(jié)構(gòu)與生物活性的構(gòu)效關(guān)系尚需揭示。③ 盡管仙人掌多糖在體內(nèi)、體外研究模型中表現(xiàn)出免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗腫瘤、降血糖、血脂、保肝等多種生理功能,但其作用的量效關(guān)系及作用機(jī)制仍需深入研究。

    猜你喜歡
    仙人掌多糖小鼠
    仙人掌
    幼兒畫刊(2022年8期)2022-10-18 01:43:50
    堅(jiān)韌挺拔的仙人掌
    小鼠大腦中的“冬眠開關(guān)”
    米胚多糖的組成及抗氧化性研究
    仙人掌
    西江月(2018年5期)2018-06-08 05:47:37
    熟三七多糖提取工藝的優(yōu)化
    中成藥(2018年3期)2018-05-07 13:34:45
    米小鼠和它的伙伴們
    Avp-iCre轉(zhuǎn)基因小鼠的鑒定
    加味四逆湯對(duì)Con A肝損傷小鼠細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用
    酶法降解白及粗多糖
    中成藥(2014年11期)2014-02-28 22:29:50
    欧美成人一区二区免费高清观看 | 日日爽夜夜爽网站| 成人国语在线视频| 一级作爱视频免费观看| 啦啦啦韩国在线观看视频| 在线a可以看的网站| 国产精品久久久av美女十八| 午夜福利免费观看在线| 老司机午夜十八禁免费视频| 免费在线观看日本一区| 一区二区三区激情视频| 亚洲国产精品999在线| 舔av片在线| 精品欧美国产一区二区三| 日韩欧美国产在线观看| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 日本免费a在线| 精品一区二区三区四区五区乱码| 中文在线观看免费www的网站 | 黄片大片在线免费观看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 精品福利观看| 色综合亚洲欧美另类图片| 人成视频在线观看免费观看| 国产精品亚洲av一区麻豆| 亚洲午夜理论影院| 村上凉子中文字幕在线| 亚洲欧美一区二区三区黑人| e午夜精品久久久久久久| 人人妻人人看人人澡| 国产爱豆传媒在线观看 | 国产精品亚洲美女久久久| 日韩欧美国产一区二区入口| 久久久水蜜桃国产精品网| 制服诱惑二区| 一区二区三区国产精品乱码| 午夜视频精品福利| videosex国产| 欧美3d第一页| 成人永久免费在线观看视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 淫秽高清视频在线观看| 欧美3d第一页| 超碰成人久久| 婷婷六月久久综合丁香| 1024视频免费在线观看| 精品久久久久久久久久久久久| 婷婷精品国产亚洲av| 久久这里只有精品中国| 日韩大码丰满熟妇| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 不卡av一区二区三区| 成人三级黄色视频| 18禁美女被吸乳视频| 后天国语完整版免费观看| 久久香蕉激情| 最近在线观看免费完整版| 国产日本99.免费观看| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 亚洲成人久久爱视频| 欧美色视频一区免费| 午夜激情福利司机影院| 国产麻豆成人av免费视频| 99久久国产精品久久久| 99久久精品国产亚洲精品| 性欧美人与动物交配| 亚洲avbb在线观看| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲人成网站高清观看| 久久伊人香网站| 看片在线看免费视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 男人舔女人的私密视频| 美女免费视频网站| 国产欧美日韩一区二区三| 亚洲无线在线观看| 久久久久国内视频| 欧美日韩一级在线毛片| 精品一区二区三区四区五区乱码| 亚洲成人久久爱视频| 欧美国产日韩亚洲一区| 免费一级毛片在线播放高清视频| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 啦啦啦韩国在线观看视频| 中文字幕av在线有码专区| 亚洲av成人一区二区三| 欧美精品啪啪一区二区三区| av免费在线观看网站| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲片人在线观看| 日本精品一区二区三区蜜桃| 丝袜人妻中文字幕| 精品国产乱子伦一区二区三区| 999精品在线视频| 国产午夜精品久久久久久| 黄色片一级片一级黄色片| 在线国产一区二区在线| 国产不卡一卡二| 国产精品 国内视频| 日韩欧美国产在线观看| 久久久久久久久久黄片| 很黄的视频免费| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | e午夜精品久久久久久久| 亚洲欧美日韩东京热| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 老鸭窝网址在线观看| 级片在线观看| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产精品精品国产色婷婷| 少妇的丰满在线观看| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 美女大奶头视频| cao死你这个sao货| 看免费av毛片| 国产在线观看jvid| 成年人黄色毛片网站| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 亚洲精品在线观看二区| 1024视频免费在线观看| 天堂av国产一区二区熟女人妻 | 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 亚洲国产中文字幕在线视频| 中文字幕高清在线视频| 国产精品乱码一区二三区的特点| 日韩中文字幕欧美一区二区| 久久久久久九九精品二区国产 | 桃红色精品国产亚洲av| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久久国产精品人妻蜜桃| 午夜日韩欧美国产| 成年人黄色毛片网站| 亚洲欧美激情综合另类| 午夜精品一区二区三区免费看| 在线观看免费视频日本深夜| 十八禁网站免费在线| 黄色片一级片一级黄色片| 国产免费男女视频| 天堂动漫精品| 91麻豆av在线| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 叶爱在线成人免费视频播放| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 日本黄色视频三级网站网址| 亚洲国产欧美人成| 精品午夜福利视频在线观看一区| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 欧美成狂野欧美在线观看| 成人18禁在线播放| 午夜激情av网站| 久久国产乱子伦精品免费另类| 国产黄色小视频在线观看| 在线观看日韩欧美| 成人精品一区二区免费| 欧美+亚洲+日韩+国产| 久久久久久久午夜电影| 亚洲欧美日韩高清专用| 亚洲精品国产一区二区精华液| 99精品在免费线老司机午夜| 国产精品1区2区在线观看.| 久久久国产欧美日韩av| 国产成年人精品一区二区| 69av精品久久久久久| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产成+人综合+亚洲专区| 国产精品综合久久久久久久免费| 午夜a级毛片| 99国产综合亚洲精品| 黄色片一级片一级黄色片| 99精品在免费线老司机午夜| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲成av人片在线播放无| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美色视频一区免费| 又黄又粗又硬又大视频| 99在线人妻在线中文字幕| 国产精品亚洲av一区麻豆| 一边摸一边做爽爽视频免费| 免费高清视频大片| 免费看美女性在线毛片视频| 久久久久亚洲av毛片大全| 亚洲美女黄片视频| 免费在线观看完整版高清| 免费看美女性在线毛片视频| 男女视频在线观看网站免费 | 夜夜躁狠狠躁天天躁| 亚洲最大成人中文| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲美女黄片视频| 深夜精品福利| 日日干狠狠操夜夜爽| 久久久久性生活片| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 天天一区二区日本电影三级| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 香蕉av资源在线| a在线观看视频网站| 欧美大码av| 亚洲专区国产一区二区| 国产精品久久久久久精品电影| 大型av网站在线播放| x7x7x7水蜜桃| 丁香六月欧美| 此物有八面人人有两片| 天堂√8在线中文| 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲欧美精品综合久久99| 麻豆一二三区av精品| 日本黄色视频三级网站网址| 久久亚洲精品不卡| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 精品无人区乱码1区二区| 天堂av国产一区二区熟女人妻 | 国产亚洲欧美在线一区二区| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 最近最新中文字幕大全免费视频| 久久久久久大精品| 两个人看的免费小视频| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 欧美日韩黄片免| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 香蕉av资源在线| 亚洲成a人片在线一区二区| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 一个人免费在线观看电影 | 亚洲精品在线美女| 日韩av在线大香蕉| 搞女人的毛片| 亚洲国产欧美人成| 国内精品久久久久精免费| av国产免费在线观看| 久99久视频精品免费| av福利片在线观看| 一个人免费在线观看电影 | 精品电影一区二区在线| 国产精华一区二区三区| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 最近视频中文字幕2019在线8| 伦理电影免费视频| 亚洲国产看品久久| 桃色一区二区三区在线观看| 999久久久精品免费观看国产| 久久香蕉国产精品| 午夜激情福利司机影院| 久久人妻av系列| 婷婷亚洲欧美| 国产真人三级小视频在线观看| 成人午夜高清在线视频| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 精品午夜福利视频在线观看一区| 曰老女人黄片| 99久久精品热视频| 日本a在线网址| 欧美中文日本在线观看视频| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲熟女毛片儿| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 床上黄色一级片| 后天国语完整版免费观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲国产精品合色在线| 久久国产乱子伦精品免费另类| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲成人久久爱视频| 观看免费一级毛片| 色老头精品视频在线观看| 国产精品久久久人人做人人爽| 俺也久久电影网| 亚洲国产欧美网| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲五月婷婷丁香| 国产1区2区3区精品| 成人av一区二区三区在线看| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚洲国产欧美一区二区综合| 欧美大码av| 国产精品免费视频内射| АⅤ资源中文在线天堂| 女人被狂操c到高潮| 午夜两性在线视频| 国产精品精品国产色婷婷| 欧美成人免费av一区二区三区| 麻豆成人av在线观看| 久久中文字幕人妻熟女| 午夜精品一区二区三区免费看| 波多野结衣高清无吗| 一夜夜www| 91大片在线观看| 久久人人精品亚洲av| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 日日爽夜夜爽网站| 亚洲乱码一区二区免费版| 青草久久国产| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 日本 av在线| 给我免费播放毛片高清在线观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 色综合亚洲欧美另类图片| xxxwww97欧美| 又紧又爽又黄一区二区| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产在线观看jvid| 可以在线观看的亚洲视频| 激情在线观看视频在线高清| 国产主播在线观看一区二区| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 怎么达到女性高潮| 国产精品久久久av美女十八| 男插女下体视频免费在线播放| 制服人妻中文乱码| 欧美成人午夜精品| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲激情在线av| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲中文日韩欧美视频| 色噜噜av男人的天堂激情| 午夜免费激情av| 韩国av一区二区三区四区| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚洲人成伊人成综合网2020| 男人舔女人的私密视频| 99热6这里只有精品| 久久久久久九九精品二区国产 | 国语自产精品视频在线第100页| 黄频高清免费视频| www日本在线高清视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 天堂√8在线中文| 久久国产精品人妻蜜桃| 99精品欧美一区二区三区四区| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| avwww免费| 老司机福利观看| 一级a爱片免费观看的视频| av片东京热男人的天堂| 在线视频色国产色| 91麻豆av在线| 午夜a级毛片| 很黄的视频免费| 在线a可以看的网站| a级毛片a级免费在线| 成人国语在线视频| 成人特级黄色片久久久久久久| 极品教师在线免费播放| 精品无人区乱码1区二区| 搞女人的毛片| 久久亚洲精品不卡| 午夜福利在线观看吧| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产精品亚洲一级av第二区| 男女床上黄色一级片免费看| 欧美丝袜亚洲另类 | 免费在线观看日本一区| 天堂动漫精品| 黄色毛片三级朝国网站| 90打野战视频偷拍视频| 不卡av一区二区三区| 亚洲性夜色夜夜综合| netflix在线观看网站| 久久久国产精品麻豆| 一区二区三区国产精品乱码| 淫秽高清视频在线观看| 亚洲一区二区三区不卡视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 国产伦在线观看视频一区| 91av网站免费观看| 婷婷亚洲欧美| 免费看十八禁软件| 国产一级毛片七仙女欲春2| 亚洲五月婷婷丁香| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 久99久视频精品免费| 亚洲全国av大片| 午夜激情福利司机影院| 嫩草影视91久久| 无人区码免费观看不卡| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产成人欧美在线观看| 亚洲成人中文字幕在线播放| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 一区福利在线观看| 伦理电影免费视频| 十八禁网站免费在线| 成人一区二区视频在线观看| 国产午夜精品久久久久久| 一级毛片高清免费大全| 免费观看人在逋| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 日本一区二区免费在线视频| 此物有八面人人有两片| 成年女人毛片免费观看观看9| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国产激情久久老熟女| 国产av一区二区精品久久| 正在播放国产对白刺激| 波多野结衣高清作品| 丁香六月欧美| 嫩草影院精品99| 无限看片的www在线观看| 岛国在线免费视频观看| 一级黄色大片毛片| 久9热在线精品视频| 999久久久国产精品视频| 免费在线观看亚洲国产| 欧美在线黄色| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 天堂动漫精品| 亚洲午夜理论影院| 国产成人精品无人区| 国产精品免费视频内射| 好男人在线观看高清免费视频| ponron亚洲| 国产日本99.免费观看| 国产成人系列免费观看| 国产高清videossex| 亚洲,欧美精品.| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲性夜色夜夜综合| 不卡av一区二区三区| av超薄肉色丝袜交足视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 久久香蕉激情| 最好的美女福利视频网| 日韩欧美在线二视频| 99热只有精品国产| 国产成人精品久久二区二区免费| 性色av乱码一区二区三区2| 国产乱人伦免费视频| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产爱豆传媒在线观看 | 免费av毛片视频| 精品一区二区三区av网在线观看| 老司机午夜福利在线观看视频| 搡老岳熟女国产| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 中文资源天堂在线| 亚洲精品色激情综合| 婷婷丁香在线五月| 人人妻人人澡欧美一区二区| 成人av在线播放网站| 老司机深夜福利视频在线观看| 五月玫瑰六月丁香| 99热这里只有精品一区 | 日日摸夜夜添夜夜添小说| 啦啦啦免费观看视频1| 真人一进一出gif抽搐免费| 欧美精品啪啪一区二区三区| 国产精品精品国产色婷婷| 久久人妻av系列| 国产真人三级小视频在线观看| 真人一进一出gif抽搐免费| 超碰成人久久| 亚洲中文av在线| 国产高清videossex| 午夜福利18| 成人av在线播放网站| 亚洲成人免费电影在线观看| 99久久无色码亚洲精品果冻| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 制服丝袜大香蕉在线| 亚洲一区二区三区不卡视频| 听说在线观看完整版免费高清| 看片在线看免费视频| 亚洲国产欧美人成| 国产激情偷乱视频一区二区| 88av欧美| 日本在线视频免费播放| 国产精品久久久久久精品电影| 久久人妻av系列| 亚洲18禁久久av| 中文字幕最新亚洲高清| 亚洲美女视频黄频| 精品久久蜜臀av无| 亚洲美女黄片视频| 久99久视频精品免费| 日本黄大片高清| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 亚洲最大成人中文| 精品国产乱码久久久久久男人| netflix在线观看网站| a级毛片a级免费在线| 一区二区三区国产精品乱码| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 又粗又爽又猛毛片免费看| 国产v大片淫在线免费观看| 黄片小视频在线播放| 一级毛片高清免费大全| 夜夜爽天天搞| 精品电影一区二区在线| 精品久久久久久成人av| 久久香蕉国产精品| 手机成人av网站| 久久香蕉激情| 国产又色又爽无遮挡免费看| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产爱豆传媒在线观看 | 免费高清视频大片| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 欧美乱妇无乱码| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 亚洲在线自拍视频| 搡老妇女老女人老熟妇| 国产一区二区三区视频了| 国产精品亚洲av一区麻豆| 精品乱码久久久久久99久播| 国产亚洲精品av在线| 久久精品成人免费网站| 嫩草影视91久久| svipshipincom国产片| 黄色视频不卡| 精品福利观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产不卡一卡二| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 叶爱在线成人免费视频播放| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 国产精品亚洲av一区麻豆| 岛国视频午夜一区免费看| 国产成+人综合+亚洲专区| 久久性视频一级片| 国产精品久久久av美女十八| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 久久精品国产亚洲av高清一级| 麻豆久久精品国产亚洲av| 久久久久国产一级毛片高清牌| 亚洲av成人av| 亚洲av五月六月丁香网| 午夜老司机福利片| 免费av毛片视频| 国产熟女xx| 成人手机av| 亚洲成人中文字幕在线播放| 欧美最黄视频在线播放免费| 大型av网站在线播放| 久久久久久九九精品二区国产 | 19禁男女啪啪无遮挡网站| 亚洲av五月六月丁香网| 三级毛片av免费| 一进一出好大好爽视频| 国产伦一二天堂av在线观看| 久久午夜亚洲精品久久| 国产不卡一卡二| 一级毛片高清免费大全| 99riav亚洲国产免费| 亚洲精品一区av在线观看| 日韩欧美在线二视频| 欧美性猛交黑人性爽| 女同久久另类99精品国产91| 最新在线观看一区二区三区| 波多野结衣高清作品| 欧美乱色亚洲激情| 久9热在线精品视频| av欧美777| 久久久久久久久中文| a在线观看视频网站| 99国产极品粉嫩在线观看| 中出人妻视频一区二区| 少妇被粗大的猛进出69影院| 日本一本二区三区精品| 岛国视频午夜一区免费看| 亚洲 欧美一区二区三区| 99国产综合亚洲精品| 日本熟妇午夜| 免费观看人在逋| 欧美激情久久久久久爽电影| 一级片免费观看大全| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 人成视频在线观看免费观看| 日韩精品中文字幕看吧| 最近最新中文字幕大全免费视频| 曰老女人黄片| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 国产一级毛片七仙女欲春2| 一进一出抽搐动态| 少妇人妻一区二区三区视频| 欧美中文综合在线视频| 岛国视频午夜一区免费看| 看黄色毛片网站| 51午夜福利影视在线观看| 欧美日韩精品网址| 国产麻豆成人av免费视频| 久久中文看片网| 又黄又爽又免费观看的视频| 99热6这里只有精品| 岛国视频午夜一区免费看| 曰老女人黄片| 夜夜夜夜夜久久久久| 久久久水蜜桃国产精品网| 小说图片视频综合网站| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 视频区欧美日本亚洲| 欧美三级亚洲精品| www.精华液| 我要搜黄色片| 午夜福利高清视频| 观看免费一级毛片| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产三级在线视频| 亚洲 欧美一区二区三区| 日韩大码丰满熟妇|