成人Ph染色體陽性急性淋巴細胞白血病MICM初步研究

李金榮 王海洋

摘要：目的? 對成人Ph染色體陽性急性淋巴細胞白血病MICM初步的研究。方法? 選取我院2019年1月～2020年12月收治的96例急性淋巴細胞白血病患者進行分析，根據患者的成人Ph染色體陰陽性進行分組。其中，選取Ph染色體陽性急性淋巴細胞性白血病（Ph+all）患者作為觀察組進行分析研究;選取Ph染色體陰性急性淋巴細胞性白血病患者作為對照組進行MICM分析。對比兩組的研究結果，探究成人Ph+ALL的MICM特征。結果? 在96例患者中，成人Ph陽性患者為24例，占比25.00%;陰性患者為72例，占比75.00%。流式免疫分型顯示所有Ph陽性患者均為B-ALL;24例Ph+ALL中20例伴早期髓系細胞（原始粒細胞及早幼粒細胞）;18例患者表達CD13或/和CD33;8例患者染色體除Ph染色體外合并其他染色體異常。結論? 通過研究顯示在成人Ph+ALL具有MICM分型特點。

關鍵詞：成人Ph染色體陽性;急性淋巴細胞;形態(tài)學;細胞遺傳學;免疫分型

急性淋巴細胞白血?。ˋLL）是由于淋巴細胞的T系或B系細胞于骨髓中的異常增生而發(fā)生的，屬于一種惡性腫瘤性疾病[1]。在機體原始細胞的異常增生下，可聚集于骨髓中，對機體中的正常造血功能造成較大的不良影響;同時在病情的進展之下，還會對骨髓外的組織造成侵犯，如胸腺、肝臟、淋巴結及腦膜等。有研究指出，ALL的發(fā)病高峰期為0～8歲的兒童期，發(fā)病約占比70%;在成人白血病中，ALL的發(fā)病率約在20%左右。在ALL中，Ph染色體陽性患者較為常見，近年來關于這種類型的臨床研究也在不斷深入，各學者所得出的臨床特征結論也基本一致。臨床發(fā)現，在Ph+ALL中，患者大多存在肝脾腫大、白細胞水平較高、長期生存率低及治療緩解率低等特點，這類患者的預后大多不佳[2]。但目前關于這種疾病類型MICM特點研究尚較少。本研究就ALL患者的細胞遺傳學、形態(tài)學、免疫學等特征進行分析探究，現報告如下。

1資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2019年1月～2020年12月收治的96例急性淋巴細胞白血病患者進行分析，其中，男性患者56例，女性患者40例;年齡35～56歲，平均年齡（36.25±15.71）歲。根據患者的成人Ph染色體陰陽性進行分組，選取我院收治的成人Ph+ALL患者作為觀察組進行分析研究;并選取同期于我院接受治療的成人Ph-ALL患者作為對照組進行分析。

納入標準：①對本次研究知情，并且簽署知情同意書;②精神正常，能進行正常的溝通交流。

排除標準：①拒絕配合研究，拒絕簽署知情同意書者;②合并惡性腫瘤疾病者;③存在嚴重精神疾病者。

1.2 方法

所有患者在接受治療前均進行MICM檢測。對細胞形態(tài)學特征、免疫表型特征、細胞遺傳學特征及分子生物學進行分析。在細胞形態(tài)學特征中，按照FAB標準作為ALL診斷分型。流式細胞儀以CD45，fsc設門檢測白細胞抗原。髓系 MPO CD117 CD11b CD33 CD13 CD16? CD15 CD14 CD64 CD71 CD123 CD56 ;T系cCD3 CD7? CD3? CD4 CD8 CD9? CD5 CD2? ; B系 CD19 CD10 CD20 CD45CD22 cCD79a cCD22 IgM ; 干（祖）系 CD38? HLA-DR。細胞遺傳學檢查：采用直接法或短期培養(yǎng)法制備骨髓染色體標本，采用RHG技術進行核型分析。

分子生物學：留取治療前肝素抗凝骨髓液2～3ml，分離單個核細胞 ，采用套式逆轉錄聚合酶連反應（RT-PCR）方法檢測融合基因。

2結果

2.1 Ph+ALL的發(fā)病情況以及年齡分布分析

通過分析收治的96例ALL患者中，統計其Ph+的發(fā)病情況。結果顯示，96例患者中，有24例患者是屬于Ph+類型，占比在25.00%;Ph-有72例，占比在75.00%。

2.2 Ph+ALL形態(tài)學特點研究

通過骨髓涂片瑞氏染色進行讀片顯示，Ph+ALL原始淋巴細胞，胞體中等大小，圓形、類圓形，細胞漿量少，無顆粒，細胞核圓形，染色質細致，核仁可見，形態(tài)特點與其他ALL無區(qū)別。但研究發(fā)現，24例Ph+ALL中20例伴早期髓系細胞（原始粒細胞及早幼粒細胞），而72例Ph-ALL中僅有2例伴早期髓系細胞，具有統計學意義。

2.3 免疫學分類及特征研究

通過分析Ph+的免疫學分類，顯示患者的免疫表現有以下幾點：所有Ph+ALL均為B-ALL;在為患者開展的FCM檢測中，18例患者表達CD13或/和CD33，但不夠急性混合細胞白血?。∕PAL）的診斷標準;研究顯示，Ph+ALL相比較于Ph-ALL明顯高表達髓系抗原CD13或/和CD33，具有統計學意義。患者的表達情況見表2。

2.4 Ph+ALL細胞學遺傳特征分析

3討論

急性淋巴細胞白血病主要是起源于淋巴前體細胞，這種疾病在臨床上被劃分于造血系統惡性疾病中的一種類型。并且研究指出，這種疾病大多數都是來源于B淋巴細胞。根據臨床上對該疾病的研究，顯示這種疾病類似于急性髓系白血?。ˋML），其遺傳學的異常是影響這種疾病預后的關鍵所在，而伴有Ph染色體異常的B-ALL就是成人ALL中最為常見的一種。根據相關數據統計，在成人ALL中，Ph染色體陽性率約占據了20%～30%。隨著臨床研究的不斷深入，有學者提出了Ph+ALL是一種起源于白血病干細胞的疾病，而并非過去認為的僅僅來源于淋系祖細胞。

ALL的發(fā)病主要是由于機體中的造血干細胞或組織細胞的惡性病變所導致。根據臨床上對ALL的發(fā)病原因分析顯示，環(huán)境因素、遺傳及家族因素、獲得性基因改變等主要原因[3]。大多數ALL患者起病較急，短時間內會快速進展，首發(fā)癥狀主要表現為出血、貧血、發(fā)熱等。也有一些患者起病較為緩慢，癥狀表現主要為不同程度的貧血、出血、發(fā)熱等。其中，出血癥狀有皮膚瘀點、牙齦出血、瘀斑等，癥狀嚴重者可能出現內臟出血，也可能表現為咯血、尿血、便血、顱內出血等[4]?；颊叩捏w征表現主要為一些臟器異常，如肝、脾、淋巴結腫大等，關節(jié)、骨等疼痛，以及一些其他的浸潤體征表現。通常認為，Ph+ALL約占據成人ALL的12%～32%。有研究指出，Ph+ALL的疾病類型遠遠比其他伴特定遺傳學異常的ALL比例更高，并且發(fā)病率隨患者年齡的不斷增大而上升。

有研究提出，在Ph+ALL初診時，其白細胞數有較大的變化，但并非所有的患病者都屬于高白細胞白血病。在Hervé Dombret等[5]報道中，對157例Ph+ALL患者進行了研究，結果也得出了具有較大的白細胞計數變化，白細胞計數范圍為（0.5～626）×109/L，中位白細胞計數為17×109/L。因而在進行診斷過程中，應注意并非所有Ph+ALL均為高白細胞性白血病。若在ALL的診斷中出現細胞計數正?；蛏愿叩那闆r，也需要適當考慮患者是否為Ph染色體陽性。此外，還有相關文獻指出，大部分Ph+ALL患者免疫學分型為前體B細胞，主要表達CD19、CD10、CD34，伴有髓系抗原表達比例增多。在Hervé Dombret等學者的報道中顯示，在157例Ph+ALL患者中，所有的免疫學表型均提示為B系ALL，其中表達CD34抗原的患者占比高達89%，表達CD33抗原為15%，表達CD13抗原為20%。其中，所研究的患者中有91例不僅存在Ph染色體，同時還伴隨其他異常核型（雙Ph、+7、超二倍體）。還有一些學者研究了安德森癌癥中心從1980～1997年所有初診的67例Ph+成人ALL患者，發(fā)現大多數是B細胞型ALL，伴有髓系抗原共同表達者明顯增多。目前對于Ph染色體在ALL中的價值已經得到了臨床的廣泛認可，但關于Ph+ALL是否具有獨特的免疫表型特征方面研究還不夠深入。雖然部分報道指出，成人ALL可能存在免疫表型方面的異常，但尚存在報道病例數較少、研究結果不完全一致等問題。此外，既往相關研究大多單獨采用CC分析技術檢測Ph染色體，而本研究中Ph染色體的檢測采用CC結合FISH及RQ2PCR技術，明顯提高了Ph+-ALL的檢出率[6]。

本次研究對收治的96例患者開展分析結果顯示，成人Ph染色體結果檢測呈陽性者為24例，占比25.00%;陰性為72例，占比75.00%;所有Ph陽性患者均為B-ALL。在為患者開展的FCM檢測中，18例患者表達CD13或/和CD33，占比為75%;而在72例Ph-ALL中，僅有6例表達CD13或/和CD33。研究顯示，Ph+ALL相比較于Ph-ALL明顯高表達髓系抗原CD13或/和CD33，具有統計學意義[7]。細胞遺傳學方面顯示，單純Ph染色體有16例，占比為66.7%;有8例患者染色體除Ph染色體外合并其他染色體異常，占比33.3%。

Ph+B-ALL患者體內白血病細胞可能處于更早的淋巴細胞分化階段，體內可有大量的白血病干細胞，同時該群細組織黏附能力更強，所獲取的生長、增殖優(yōu)勢較大。CD38是具有酶催化活性的表面標記，能夠對細胞的活化和增殖進行雙向調節(jié)，參與人類淋巴細胞核內皮細胞的活化和黏附等重要過程;CD38在體內主要存在于造血組織中，表達于淋系干/祖細胞和漿細胞。CD13為人體內造血組織常見的髓系抗原，多表達于髓系細胞表面。有研究顯示，在CD34+的造血干/祖細胞向B淋系定向分化的過程中，CD38表達上升，而CD13表達下調。

綜上，Ph+ALL在形態(tài)學方面容易伴隨早期髓系細胞，流式免疫分型易伴隨CD13、CD33表達，染色體核型除Ph染色體外可出現其他染色體異常，具有一定MICM分型特點。

參考文獻

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