癲癇持續(xù)狀態(tài)患者血清NSE、TNF-α及GAL水平與腦電圖異常程度的關(guān)系

趙安容 王圣之 崔利君 李波★

癲癇是臨床常見的神經(jīng)系統(tǒng)疾??；其發(fā)病機制復(fù)雜，至今認(rèn)為明確，但醫(yī)學(xué)界普遍認(rèn)為神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)失衡是導(dǎo)致其發(fā)生的主要原因之一［1］。癲癇持續(xù)狀態(tài)是患者癲癇發(fā)作時間持續(xù)5 分鐘以上無法停止，在臨床中致死率、致殘率極高，而且部分得到救治患者可因此出現(xiàn)不可逆腦損傷［2］。炎癥狀態(tài)會刺激神經(jīng)元持續(xù)性放電會導(dǎo)致大腦膠質(zhì)細胞功能障礙，細胞凋亡速度加快加重癲癇發(fā)作頻率與時間。神經(jīng)元特異烯醇化酶（neuron-specific enolase，NSE）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor α，TNF-α）與甘丙肽（Galanin，GAL）在臨床中被認(rèn)為與癲癇的發(fā)生有密切關(guān)系；而腦電圖是目前臨床中診斷癲癇的首選方法，也是最有價值的方式［3-4］。臨床中對于癲癇持續(xù)狀態(tài)患者腦電圖異常情況的研究較少，而癲癇持續(xù)狀態(tài)患者腦電圖結(jié)果與NSE、TNF-α 與GAL 水平存在何種關(guān)系，目前也未闡明。本文旨在探討NSE、TNF-α 與GAL 水平與患者腦電圖的關(guān)系，為癲癇持續(xù)狀態(tài)患者的診斷及后續(xù)治療提供相應(yīng)幫助。報告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取巴中市中心醫(yī)院2019年3月至2021年4月癲癇持續(xù)狀態(tài)患者進行篩選，符合標(biāo)準(zhǔn)者共136例將其設(shè)置為觀察組；另選本院同期體檢健康者65例為對照組。觀察組男性70 例、女性66 例；平均年齡（48.3±15.2）歲；病程平均（6.0±1.0）年。對照組男性38 例、女性27 例；平均年齡（47.8±15.3）歲。兩組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①觀察組患者臨床資料完整無缺失；②對照組均為巴中市中心醫(yī)院同期體檢健康者無各類急慢性疾?。虎塾^察組符合國際抗癲癇聯(lián)盟制定的癲癇發(fā)作與癲癇綜合征診斷指南標(biāo)準(zhǔn)［5］；④觀察組患者均在癲癇發(fā)作時意識尚未恢復(fù)又再次發(fā)作癲癇或是發(fā)作時間＞5 min 無法自行停止。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有各類急慢性病者；②心、肝、腎患有嚴(yán)重疾病或是各項對應(yīng)檢查結(jié)果≥2 項指標(biāo)與正常值存在明顯差異；③患有精神抑郁類疾病者且長期服用治療藥物者；④繼發(fā)性癲癇者；⑤近3 個月內(nèi)服用過免疫制劑、激素類藥物者；⑥內(nèi)分泌功能紊亂；⑦有腦卒中、腦出血、腦部手術(shù)史者；⑧神經(jīng)系統(tǒng)疾病。本研究已通過單位倫理委員會通過。所有入試者及家屬均知情并簽署同意書。

1.2 方法

抽取兩組研究對象外周血5 mL（觀察組抽取其癲癇發(fā)作后2 h 內(nèi)與24 h 后血液），3 000 r/min 離心5 min，r=13.5 cm，留取血清放入-70℃環(huán)境中保存，采用酶聯(lián)免疫吸附法對NES、TNF-α 與GAL 水平。試劑盒生產(chǎn)商為上海恒遠生物科技有限公司。

腦電圖檢查：采用16 導(dǎo)數(shù)字化無紙記錄腦電圖儀對觀察組患者進行檢查，根據(jù)國際10/20 系統(tǒng)安置頭皮電極，使用平均參考導(dǎo)聯(lián)與雙極導(dǎo)聯(lián)進行掃描記錄。檢查過程中讓患者作出睜眼、閉眼等行為，同時進行閃光刺激與過度換氣誘發(fā)實驗，患者腦電圖記錄時間需＞30 min。

1.3 觀察指標(biāo)

異常腦電圖評定標(biāo)準(zhǔn)［6］：輕度異常：α 節(jié)律呈現(xiàn)規(guī)則或是不穩(wěn)定表現(xiàn)，患者睜眼時無明顯消失或是抑制反應(yīng)表現(xiàn)，β 波出現(xiàn)高波幅，且Q 波在各區(qū)活動增加，也可表現(xiàn)為主要活動區(qū)活動增加，在過度喚起時Q 波出現(xiàn)高幅波動。中度異常：α 節(jié)律出現(xiàn)明顯不對稱，甚至出現(xiàn)消失，Q 波活動呈現(xiàn)彌散性，Q 波可出現(xiàn)活動陣發(fā)性發(fā)作，過度換氣后高波幅δ 波成群出現(xiàn)。重度異常：Q 波、δ 波的活動出現(xiàn)彌散性發(fā)作，α波變慢或是消失，δ 波陣發(fā)性出現(xiàn)或是自發(fā)并伴有高波幅棘波、棘慢綜合波、尖波；偶爾出現(xiàn)暴發(fā)性活動。

對觀察組患者進行隨訪2年，采用Engel 分級［7］對不同類型患者預(yù)后情況進行判斷，Ⅰ級：患者藥物或是手術(shù)治療后到隨訪結(jié)束癲癇未發(fā)作，Ⅱ級：癲癇發(fā)作次數(shù)顯著減少，1年內(nèi)發(fā)作次數(shù)≤2 次，Ⅳ級：發(fā)作次數(shù)＞3 次/年，但發(fā)作頻率減少75%；Ⅳ級患者發(fā)作次數(shù)無減少，甚至出現(xiàn)增加。預(yù)后良好：Ⅰ級，預(yù)后不良：Ⅱ～Ⅳ級；記錄不同預(yù)后患者NES、TNF-α 與GAL 水平，并分析不同腦電圖結(jié)果患者預(yù)后情況。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 26.0 軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，計數(shù)資料用n（%）表示，采用χ2檢驗，符合正態(tài)分布的計量資料用（±s）表示，NES、TNF-α 與GAL 水平采用獨立樣本t檢驗與單因素方差分析，相關(guān)性分析采用kendall，以P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組NES、TNF-α 與GAL 水平比較

觀察組發(fā)作2、24 h時的NES、TNF-α與GAL水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組NES、TNF-α 與GAL 水平比較（±s）Table 1 nes and TNF in two groups-α Comparison with gal level（±s）

表1 兩組NES、TNF-α 與GAL 水平比較（±s）Table 1 nes and TNF in two groups-α Comparison with gal level（±s）

注：與對照組比較，aP＜0.05。

組別觀察組時間點發(fā)作2 h 內(nèi)發(fā)作24 h 后n對照組F 值P 值136 136 65 NES（μg/L）65.71±7.98a 64.88±8.02a 12.30±1.03 1418.819＜0.05 TNF-α（μg/L）68.79±8.62a 67.39±8.73a 4.01±7.87 1482.402＜0.05 GAL（ng/L）123.36±23.45a 122.65±25.30a 106.85±7.82 13.930＜0.05

2.2 不同腦電圖結(jié)果患者NES、TNF-α 與GAL 水平比較及相關(guān)性

不同腦電圖結(jié)果患者NES、TNF-α、GAL 水平在發(fā)作2 h 內(nèi)、24 后比較結(jié)果：重度異常組＞中度異常組＞輕度異常組。差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2、圖1A～C。

表2 不同腦電圖結(jié)果患者NES、TNF-α 與GAL 水平比較及相關(guān)性（±s）Table 2 nes and TNF in patients with different EEG results-α Comparison and correlation with gal level（±s）

表2 不同腦電圖結(jié)果患者NES、TNF-α 與GAL 水平比較及相關(guān)性（±s）Table 2 nes and TNF in patients with different EEG results-α Comparison and correlation with gal level（±s）

注：與重度組比較，aP＜0.05；與中度組比較，bP＜0.05。

發(fā)作2 h 內(nèi)發(fā)作24 h 后組別輕度異常組中度異常組重度異常組F 值P 值n 15 69 52 NES（μg/L）51.64±4.87ab 63.10±3.10a 73.23±4.92 190.949＜0.001 TNF-α（μg/L）57.58±9.63ab 68.17±5.53a 72.85±8.73 25.341＜0.001 GAL（ng/L）96.73±26.50ab 119.23±17.32a 136.53±21.31 25.943＜0.001 NES（μg/L）53.60±8.12ab 64.16±5.15a 69.09±7.79 32.779＜0.05 TNF-α（μg/L）55.21±11.86ab 67.87±6.26a 70.27±7.65 23.359＜0.05 GAL（ng/L）98.31±27.03ab 119.80±19.82a 133.45±25.81 14.548＜0.05

圖1 本文典型輕度患者腦電圖檢查結(jié)果Figure 1 EEG results of typical mild patients in this paper

2.2.1 NES、TNF-α 與GAL 水平與腦電圖相關(guān)性

腦電圖與NES、TNF-α 與GAL 水平相關(guān)性分別為（r=0.767，0.311，0.372，P均＜0.05）。

2.3 不同預(yù)后患者NES、TNF-α 與GAL 水平比較

觀察組136 例患者均得到隨訪，其中預(yù)后良好者60 例、不良者76 例；分析其就診時發(fā)作2 h 內(nèi)、24 h 后NES、TNF-α 與GAL 水平預(yù)后良好者明顯低于預(yù)后不良者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；發(fā)作2 h 內(nèi)預(yù)后良好、預(yù)后不良者NES 水平與發(fā)作24 h比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 不同預(yù)后患者NES、TNF-α 與GAL 水平比較（±s）Table 3 Nes and TNF in patients with different prognosis-α Comparison with gal level（±s）

表3 不同預(yù)后患者NES、TNF-α 與GAL 水平比較（±s）Table 3 Nes and TNF in patients with different prognosis-α Comparison with gal level（±s）

注：與發(fā)作24 h 預(yù)后良好比較比較，aP＜0.05；與發(fā)作24 h 預(yù)后不良比較，bP＜0.05。

發(fā)作24 h 內(nèi)發(fā)作24 h 后預(yù)后預(yù)后良好預(yù)后不良t 值P 值n 60 76 NES（μg/L）58.86±5.17a 71.11±5.15b 13.750＜0.001 TNF-α（μg/L）65.41±8.23 71.46±8.01 4.316＜0.001 GAL（ng/L）112.59±22.38 131.87±20.73 5.199＜0.001 NES（μg/L）61.69±7.80 67.40±7.31 4.387＜0.05 TNF-α（μg/L）64.94±9.78 69.33±7.30 2.998＜0.05 GAL（ng/L）114.01±24.22 129.47±24.16 3.700＜0.05

3 討論

近年來根據(jù)統(tǒng)計研究我國癲癇發(fā)病率得到了明顯上升，且呈現(xiàn)年輕化趨勢，部分患者因?qū)拱d癇治療存在錯誤理解，拒絕服用藥物或是服藥依從性較差，病情控制較差，且癲癇發(fā)作存在突然性，若患者在公共場合或是獨處時發(fā)病，對其心理、生理造成的損害無法量化預(yù)估［8］。而癲癇持續(xù)狀態(tài)的發(fā)作時因時間長，在公共場所發(fā)生時不僅對患者造成嚴(yán)重影響對他人造成的視覺、心理沖擊較大，圍觀群眾想幫助患者也可能因不知正確的方法，造成自身或是患者受傷，引起社會輿論關(guān)注；若患者獨處時發(fā)病，因未得到及時救治可造成患者腦部不可逆損傷，嚴(yán)重可因此造成患者終身殘疾或是死亡的發(fā)生［9-10］。

癲癇發(fā)作的主要特征為神經(jīng)元重復(fù)過度異常放電，且經(jīng)過多年研究，炎癥因子與神經(jīng)元內(nèi)分泌細胞與其發(fā)病存在密切關(guān)系。發(fā)病時因神經(jīng)元異常發(fā)病誘使神經(jīng)出現(xiàn)損傷，進而破壞血腦屏障與周圍神經(jīng)膠質(zhì)細胞［11-12］。NES、TNF-α 與GAL 已被多類研究證實在癲癇患者疾病中的價值，本文分析其在癲癇持續(xù)狀態(tài)患者中的水平發(fā)現(xiàn)：在發(fā)病2 h 內(nèi)與24 h 后，上述指標(biāo)水平并不存在明顯差異，但遠高于對照組；隨后根據(jù)患者腦電圖結(jié)果對異常程度分組再度觀察發(fā)現(xiàn)腦電圖異常程度越高2 h 內(nèi)與24 h 后NES、TNF-α 與GAL 水平也越高。分析原因：癲癇發(fā)作時巨噬細胞會產(chǎn)生大量自由基，血腦屏障被破壞后血液中NSE、TNF-α 濃度隨之上升，且研究表明兩者與神經(jīng)細胞損傷存在正相關(guān)，腦電圖結(jié)果異常程度越高則表明患者腦部異常放電情況越嚴(yán)重，因此當(dāng)患者腦電圖結(jié)果為重度異常時，神經(jīng)元內(nèi)細胞受損程度不斷提升，抑制NSE、TNF-α分泌能力逐漸下降，上述指標(biāo)無法得到制衡，會進一步分泌損害大腦神經(jīng)，所以表達水平會更高［13-14］。GAL 作為一種神經(jīng)遞質(zhì)物，其具有對海馬區(qū)錐體細胞興奮后突觸電位抑制作用，當(dāng)腦部神經(jīng)元放電頻率過高時，GAL 會大量分泌來組織神經(jīng)元興奮，當(dāng)其呈現(xiàn)高水平表達時，是在降低神經(jīng)元興奮度起到緩解癲癇的作用［15］。本文分析NES、TNF-α與GAL 水平與腦電圖結(jié)果的相關(guān)性發(fā)現(xiàn)，其相互之間為正相關(guān)關(guān)系，這表明當(dāng)上述指標(biāo)水平升高時腦電圖異常程度也將隨之升高；反之則下降。

本文對患者進行了2年隨訪，根據(jù)其預(yù)后結(jié)果對發(fā)作2 h 時、發(fā)作24 h 后NES、TNF-α 與GAL 水平進行觀察發(fā)現(xiàn)：預(yù)后良好與預(yù)后不良者兩個時點NES、TNF-α 與GAL 水平均存在明顯差異，其中預(yù)后良好、不良者發(fā)作2 h 時NES 與發(fā)作24 h 后水平存在明顯差異；另外兩項指標(biāo)卻不存在差異。主要原因為：癲癇發(fā)生時NSE 在人體腦脊液中也異常興奮，并通過受損血腦屏障進入人體血液中，癲癇持續(xù)狀態(tài)發(fā)作時神經(jīng)元與神經(jīng)膠質(zhì)細胞壞死持續(xù)時間長，細胞漿內(nèi)蛋白外泄進一步刺激了NSE 表達，NSE 不斷分泌誘使神經(jīng)元細胞持續(xù)興奮放電頻率、時間增加，腦部神經(jīng)刺激不斷提升，所以腦電圖檢查與NSE 相關(guān)程度會更高［16］。

本文雖得出了相關(guān)的研究結(jié)果與結(jié)論，但本研究為回顧性分析，納入樣本量較少且未對其他影響結(jié)果的因素以及患者治療藥物的使用進行考慮，同時觀察組患者NES、TNF-α 與GAL 水平為疾病發(fā)作2 h內(nèi)與24 h 后所測結(jié)果，無穩(wěn)定期結(jié)果，在對預(yù)后的判定上可能存在一定局限。因此，后續(xù)要加大樣本量并對影響結(jié)果的各類因素予以考量進一步分析。

綜上所述，血清NES、TNF-α 與GAL 水平與癲癇持續(xù)狀態(tài)患者腦電圖結(jié)果間存在顯著相關(guān)關(guān)系，且可能參與患者疾病預(yù)后。但因本文存在一定局限性不足，后續(xù)要進一步分析研究為該病患者的治療康復(fù)提供更全面的數(shù)據(jù)理論支持。