漢中市H5亞型禽流感抗體監(jiān)測(cè)與分析

文│鄧蒲媛 楊葉 李寧（陜西省漢中市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心）

禽流感是一種由正黏病毒科流感病毒屬A型流感病毒引起的一種烈性傳染病，幾乎可以感染所有的家禽和野禽。1878年首次發(fā)生于意大利，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織列為A類動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病。禽流感分為非致病性、低致病性、高致病性禽流感三大類，前兩類發(fā)病癥狀較輕，對(duì)養(yǎng)禽業(yè)造成的影響相對(duì)較小，屬于溫和性禽流感，而高致病性禽流感一旦暴發(fā)，發(fā)病率和死亡率很高，會(huì)給養(yǎng)禽業(yè)造成毀滅性打擊，造成極大的經(jīng)濟(jì)損失，同時(shí)還會(huì)危害人類的生命安全。高致病性禽流感是由H7亞型毒株或H5亞型毒株引起的疾病，是危害養(yǎng)禽業(yè)最主要的疫病之一。根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部新聞辦公室發(fā)布的信息，2021年全國(guó)共報(bào)告發(fā)生8起高致病性禽流感疫情，均為野禽，主要以H5N8亞型為主，疫情處于點(diǎn)狀發(fā)生態(tài)勢(shì)，未出現(xiàn)區(qū)域性暴發(fā)流行。2020年全國(guó)共報(bào)告7起高致病性禽流感疫情，其中2起家禽、5起野禽，主要以H5N6亞型為主。2019年全國(guó)共報(bào)告4起高致病性禽流感疫情，其中3起家禽、1起動(dòng)物園飼養(yǎng)的孔雀，主要以H5N6亞型為主。近幾年我國(guó)采取禽流感強(qiáng)制免疫措施，取得了良好的預(yù)防和控制效果，疫苗免疫仍是當(dāng)前最主要、最有效的措施，而免疫抗體監(jiān)測(cè)則是了解疫苗免疫效果最有效的辦法。為掌握陜西省漢中市H5亞型禽流感的抗體水平情況，及時(shí)發(fā)現(xiàn)疫病防控薄弱環(huán)節(jié)，現(xiàn)就2019—2021年漢中市H5亞型禽流感免疫抗體監(jiān)測(cè)情況進(jìn)行總結(jié)和分析。

一、材料與方法

1.樣品來源。2019—2021年春、秋防期間，對(duì)漢中市11個(gè)縣區(qū)的部分規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶開展隨機(jī)抽樣，采集雞翅靜脈全血，待血液凝固后，3000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，吸出血清，冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

2.檢測(cè)試劑。（1）1%雞紅細(xì)胞懸液：用真空抗凝管采集未免疫過的健康公雞翅靜脈血液，輕晃混勻，用pH7.2的0.01摩爾/升磷酸鹽緩沖液（PBS）洗滌后配成1%的紅細(xì)胞懸液，4℃保存?zhèn)溆谩＃?）禽流感H5亞型抗原和陽(yáng)性血清：購(gòu)自哈爾濱國(guó)生生物科技有限公司。

3.檢測(cè)方法。依據(jù)《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T18936-2003），采用血凝（HA）與血凝抑制（HI）實(shí)驗(yàn)進(jìn)行。

4.結(jié)果判定。以完全抑制4個(gè)血球凝集抗原（HAU）的血清最高稀釋倍數(shù)作為血凝抑制（HI）滴度。只有陰性對(duì)照孔血清滴度不大于21og2，陽(yáng)性對(duì)照孔血清誤差不超過1個(gè)滴度，試驗(yàn)結(jié)果才有效。HI價(jià)小于或等于21og2判定HI試驗(yàn)陰性；HI價(jià)等于31og2為可疑，需重復(fù)試驗(yàn)；HI價(jià)大于或等于41og2為陽(yáng)性。

二、結(jié)果

1.不同年份H5亞型禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果比較。由表1可以看出，2019—2021年共計(jì)樣品11442份，合格10894份，合格率95.21%。從時(shí)間上看，2019年春防、秋防免疫抗體合格率分別為96.15%、91.81%，全年總體合格率為93.45%；2020年春防、秋防免疫抗體合格率分別為94.77%、96.8%，全年總體合格率為95.54%；2021年春防、秋防免疫抗體合格率分別為94.48%、95.46%，全年總體合格率為96.18%，均高于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的大于等于70%的標(biāo)準(zhǔn)。

表1 2019—2021年H5亞型禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

2.不同養(yǎng)殖方式H5亞型禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果比較。由表2可以看出，2019年共計(jì)監(jiān)測(cè)樣品3618份，合格3388份，合格率96.64%，其中規(guī)模場(chǎng)監(jiān)測(cè)樣品2363份，合格2256份，合格率95.47%；散養(yǎng)戶監(jiān)測(cè)樣品1255份，合格1132份，合格率90.20%。2020年共計(jì)監(jiān)測(cè)樣品2961份，合格2829份，合格率95.54%，其中規(guī)模場(chǎng)監(jiān)測(cè)樣品2424份，合格2332份，合格率96.2%；散養(yǎng)戶監(jiān)測(cè)樣品537份，合格497份，合格率92.55%。2021年共計(jì)監(jiān)測(cè)樣品4926份，合格4677份，合格率94.95%，其中規(guī)模場(chǎng)監(jiān)測(cè)樣品3030份，合格2906份，合格率95.91%；散養(yǎng)戶監(jiān)測(cè)樣品1896份，合格1771份，合格率93.41%。

表2 不同養(yǎng)殖方式H5亞型禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

三、分析討論

免疫抗體水平逐年遞增。檢測(cè)結(jié)果顯示，2019年全年總體合格率為93.45%，2020年全年總體合格率為95.54%，2021年全年總體合格率為96.18%，可以看出漢中市H5亞型禽流感免疫抗體合格率在逐年遞增，且均遠(yuǎn)高于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的大于等于70%的標(biāo)準(zhǔn)。說明漢中市對(duì)開展高致病性禽流感免疫工作高度重視、防疫扎實(shí)，并且取得了顯著成效。

規(guī)模場(chǎng)免疫抗體水平高于散養(yǎng)戶。檢測(cè)結(jié)果顯示，2019年規(guī)模場(chǎng)合格率95.47%，散養(yǎng)戶合格率90.2%；2020年規(guī)模場(chǎng)合格率96.2%，散養(yǎng)戶合格率92.55%；2021年規(guī)模場(chǎng)合格率95.91%，散養(yǎng)戶合格率93.41%。可以看出來規(guī)模場(chǎng)的免疫抗體水平均略高于散養(yǎng)戶，說明規(guī)模場(chǎng)的免疫意識(shí)更高，免疫工作做得更到位。究其原因，筆者認(rèn)為有以下三點(diǎn)：一是規(guī)模場(chǎng)現(xiàn)代化養(yǎng)殖水平高，防疫意識(shí)強(qiáng)，具有成熟完整的免疫程序，能科學(xué)、規(guī)范開展免疫工作，另外，規(guī)模場(chǎng)的技術(shù)力量強(qiáng)，技術(shù)人員操作熟練，保證了禽流感的抗體合格率。二是不規(guī)范養(yǎng)殖情況依然存在，散養(yǎng)戶養(yǎng)殖量小、養(yǎng)殖基礎(chǔ)設(shè)施條件差，防疫意識(shí)薄弱，生物安全措施不到位，存在免疫漏洞。三是基層人員力量薄弱，防疫工作不到位。近年來，因機(jī)構(gòu)改革，基層獸醫(yī)站撤并，防疫人員逐步削減，部分獸醫(yī)站專業(yè)技術(shù)人員身兼多職，防控力量嚴(yán)重不足，導(dǎo)致部分防控措施落實(shí)不到位。

抗體檢測(cè)是反映疫苗免疫情況的重要依據(jù)，是評(píng)價(jià)和指導(dǎo)動(dòng)物疫病防控工作的重要措施，也是評(píng)估疫苗免疫效果的重要手段。根據(jù)抗體水平，可以準(zhǔn)確掌握疫情動(dòng)態(tài)，從而科學(xué)合理地制定防控措施，及時(shí)有效防止疫情發(fā)生。因此，常態(tài)化開展高致病性禽流感免疫抗體監(jiān)測(cè)是十分有必要的，具有不可代替的作用。同時(shí)，還應(yīng)該加強(qiáng)對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)戶尤其是養(yǎng)殖量較少的散養(yǎng)戶的宣傳教育，普及疫病防控知識(shí)，增強(qiáng)其疫病防控意識(shí)，從而保障養(yǎng)禽業(yè)健康發(fā)展。