染色體核型、性激素、免疫性抗體檢測(cè)在女性生殖異?；颊咧械膽?yīng)用

郝潤(rùn)英 李佳 袁茜 平慧

近年來(lái)，隨著環(huán)境污染、生活和工作壓力加大，女性生殖異常發(fā)生率呈逐年上升趨勢(shì)，對(duì)患者生活質(zhì)量和家庭關(guān)系造成嚴(yán)重影響。研究顯示，染色體核型異常是導(dǎo)致女性生殖異常的重要因素，從而引起自然流產(chǎn)、胚胎停育、畸形胎等不良后果[1,2]。此外，相關(guān)資料表明，神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)及免疫功能失調(diào)導(dǎo)致的性激素分泌紊亂及免疫性抗體產(chǎn)生與女性生殖異常密切相關(guān)[3,4]。本研究探討染色體核型、性激素及免疫性抗體在女性生殖異?；颊咧械臋z測(cè)價(jià)值，旨在為臨床生殖異?；颊叩脑\斷、治療提供可靠依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年7月至2019年12月于我院就診的女性生殖異?；颊?23例作為觀察組，年齡20～43歲，平均年齡(31.91±4.98)歲；其中包括原發(fā)不孕248例，不良孕產(chǎn)史(自然流產(chǎn)、胚胎停育、畸形胎)175例。另選取同期進(jìn)行健康體檢的正常女性150例作為對(duì)照組，年齡22～41歲，平均年齡(31.05±5.00)歲。2組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)：①結(jié)婚>2年，配偶生育功能正常，未采取避孕措施≥1年未孕；②自然流產(chǎn)、死胎、畸形胎等不良孕產(chǎn)史者；③患者均知情同意。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：①重要臟器功能障礙者；②子宮肌瘤、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮切除患者；③免疫缺陷患者；④精神疾病患者。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)及方法

1.3.1 染色體核型分析：抽取患者外周靜脈血2 ml，肝素抗凝，取0.5 ml置于淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)72 h。常規(guī)制片，G顯帶染色。采用染色體分析儀檢測(cè)染色體核型異常情況，每個(gè)患者至少分析5個(gè)核型，計(jì)數(shù)至少20個(gè)核型。存在嵌合體和異常核型者增加計(jì)數(shù)和分析。根據(jù)人類細(xì)胞遺傳學(xué)國(guó)際命名體制(International System for Human Cytogenetic Nomenclature,ISCN 2016)對(duì)染色體核型進(jìn)行命名。

1.3.2 性激素：抽取患者空腹肘靜脈血5 ml，離心取上清，-80℃保存。采用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)的水平。

1.3.3 免疫性抗體：采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)測(cè)定血清抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)、抗精子抗體(AsAb)、抗卵巢抗體(AoAb)。

2 結(jié)果

2.1 2組患者染色體異常檢出率比較 對(duì)照組伴有染色體異常1例，檢出率為0.67%(1/150)，觀察組伴有染色體異常16例，檢出率為3.78%(16/423)，觀察組染色體異常檢出率顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。觀察組根據(jù)病因分為原發(fā)不孕組248例和不良孕產(chǎn)史組175例，其中原發(fā)不孕組伴有染色體異常10例，檢出率為4.03%(10/248)，不良孕產(chǎn)史組伴有染色體異常6例，檢出率為3.43%(6/175)。見(jiàn)表1。

表1 2組患者染色體異常檢出率比較 例(%)

2.2 染色體異常核型分析 觀察組16例染色體異?；颊咧校ㄈ旧w結(jié)構(gòu)異常9例，其中相互易位4例，羅氏易位2例，倒位3例；染色體數(shù)量異常7例，其中數(shù)量增加2例，嵌合體4例，性反轉(zhuǎn)1例。見(jiàn)表2。

表2 染色體異常核型分析 n=16

2.3 不同病因生殖異?；颊呷旧w核型分析 原發(fā)不孕組10例伴有染色體異常，其中染色體結(jié)構(gòu)異常6例，染色體數(shù)量異常3例，性反轉(zhuǎn)1例，臨床表現(xiàn)均為原發(fā)不孕；不良孕產(chǎn)史組6例伴有染色體異常，其中染色體結(jié)構(gòu)異常3例，染色體數(shù)量異常3例，臨床表現(xiàn)為自然流產(chǎn)、胚胎停育、畸形胎。見(jiàn)表3。

表3 不同病因生殖異?；颊呷旧w核型分析 例

2.4 2組患者性激素水平比較 觀察組患者FSH、LH、P水平顯著高于對(duì)照組，E2水平顯著低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表4 2組患者性激素水平比較

2.5 生殖異?；颊咧腥旧w正常、染色體異常者性激素水平比較 生殖異常患者中染色體異常者FSH、LH、P水平顯著高于染色體正常者，E2水平顯著低于染色體正常者(P<0.05)。見(jiàn)表5。

表5 生殖異?；颊咧腥旧w正常、染色體異常者性激素水平比較

2.6 2組患者免疫性抗體陽(yáng)性率比較 觀察組EMAb、AsAb、AoAb陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表6。

表6 2組免疫性抗體陽(yáng)性率比較 例(%)

2.7 生殖異常患者中染色體正常、染色體異常者免疫性抗體陽(yáng)性率比較 生殖異常患者中染色體異常者EMAb、AsAb、AoAb陽(yáng)性率顯著高于染色體正常者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表7。

表7 生殖異?；颊咧腥旧w正常、染色體異常者免疫性抗體陽(yáng)性率比較 例(%)

3 討論

女性生殖異常是由遺傳因素、環(huán)境因素、解剖因素、免疫因素、內(nèi)分泌因素等導(dǎo)致的臨床綜合征，對(duì)患者身心健康和家庭生活均造成嚴(yán)重影響。因此，探索女性生殖異常的可能影響因素對(duì)于疾病臨床診斷、治療具有重要意義。研究表明，染色體異常是導(dǎo)致女性不孕、自然流產(chǎn)、胚胎停育、畸形胎的重要原因[5,6]。因此，染色體核型分析是臨床篩查不孕不育的重要手段。本研究結(jié)果顯示，對(duì)照組伴有染色體異常1例，檢出率為0.67%(1/150)，觀察組伴有染色體異常16例，檢出率為3.78%(16/423)，觀察組染色體異常檢出率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，說(shuō)明染色體異常是導(dǎo)致女性生殖異常的重要原因。

染色體異常分為結(jié)構(gòu)異常和數(shù)量異常，其中結(jié)構(gòu)異常較多見(jiàn)[7,8]。本研究中，觀察組16例染色體異常患者中，包括染色體結(jié)構(gòu)異常9例和染色體數(shù)量異常及其嵌合體6例，提示女性生殖異?；颊叱０橛腥旧w結(jié)構(gòu)異常和數(shù)量異常。染色體結(jié)構(gòu)異常包括易位、倒位、缺失等類型，其中易位、倒位是女性生殖異常最常見(jiàn)的染色體異常類型，與自然流產(chǎn)、習(xí)慣性流產(chǎn)、不良生育等關(guān)系密切[9]。本研究結(jié)果顯示，觀察組16例染色體異?；颊咧?，包括染色體結(jié)構(gòu)異常9例，其中相互易位4例，羅氏易位2例，倒位3例。另外，原發(fā)不孕組染色體結(jié)構(gòu)異常6例，臨床表現(xiàn)均為原發(fā)不孕；不良孕產(chǎn)史組染色體結(jié)構(gòu)異常3例，臨床表現(xiàn)為自然流產(chǎn)、胚胎停育、畸形胎，提示染色體易位、倒位是造成原發(fā)不孕、不良孕產(chǎn)的高危因素。染色體數(shù)量異常包括整倍體和非整倍體數(shù)量異常，常導(dǎo)致胚胎停育、畸形胎等發(fā)生。本研究檢出16例染色體異?；颊咧?，染色體數(shù)量異常及其嵌合體6例，其中45，X及其嵌合體為主要類型，患者以身材矮小、閉經(jīng)、卵巢發(fā)育異常，內(nèi)分泌失調(diào)為主要臨床特征。另外，原發(fā)不孕組染色體數(shù)量異常3例，臨床表現(xiàn)均為原發(fā)不孕；不良孕產(chǎn)史組染色體數(shù)量異常3例，臨床表現(xiàn)為自然流產(chǎn)、胚胎停育、畸形胎。

研究表明，內(nèi)分泌紊亂是不孕不育的重要致病因素，對(duì)女性生殖產(chǎn)生重要影響[10,11]。生理情況下，育齡期女性黃體功能和卵子發(fā)育受下丘腦-垂體-性腺軸調(diào)控，若此通路任何環(huán)節(jié)出現(xiàn)問(wèn)題，均造成性激素分泌紊亂及女性生殖異常。檢測(cè)性激素水平可作為判斷內(nèi)分泌功能及臨床診斷不孕不育的可靠指標(biāo)[12]。FSH、LH是垂體分泌的性激素，二者發(fā)揮協(xié)同作用，共同促進(jìn)卵泡發(fā)育、成熟和排卵，并調(diào)控雌激素和孕激素分泌[13]。P、E2是卵巢分泌的類固醇激素，在維持妊娠及促進(jìn)第二性征發(fā)育方面發(fā)揮重要作用[14]。另外，免疫功能失調(diào)與不孕不育關(guān)系密切，其中免疫性抗體產(chǎn)生是女性生殖異常的重要誘因[15,16]。EMAb是一種以子宮內(nèi)膜為靶抗原的自身抗體，可影響胚胎著床及早期發(fā)育，從而造成不孕不育[17]。AsAb能夠與精子表面抗原結(jié)合，減弱精子活性，嚴(yán)重影響女性受孕能力[18]。AoAb是一種抗卵巢抗體，可誘發(fā)月經(jīng)紊亂和卵巢早衰，影響卵泡發(fā)育、成熟和排卵[19]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，觀察組FSH、LH、P水平及EMAb、AsAb、AoAb陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組，E2水平顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且生殖異?；颊咧腥旧w異常者FSH、LH、P水平及EMAb、AsAb、AoAb陽(yáng)性率顯著高于染色體正常者，E2水平顯著低于染色體正常者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。說(shuō)明女性生殖異常患者存在性激素分泌紊亂和免疫性抗體高表達(dá)，且染色體異常促進(jìn)性激素分泌紊亂和免疫性抗體高表達(dá)。

綜上所述，女性生殖異?；颊叨喟橛腥旧w核型、性激素及免疫性抗體異常，是造成女性不孕和不良孕產(chǎn)的重要原因。因此，聯(lián)合檢測(cè)染色體核型、性激素及免疫性抗體對(duì)于女性生殖異?；颊吲R床診斷和治療具有重要價(jià)值。