陳艾玲,馬婷婷,鐘雅靜,王育川,鄧 珊,朱少平,黃燕華,3*,付 晶*
(1.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院健康養(yǎng)殖創(chuàng)新研究院,廣東廣州 510225;2.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院動物科技學(xué)院,廣東廣州 510225;3.嶺南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學(xué)與技術(shù)廣東省實(shí)驗(yàn)室,廣東廣州 510640)
鴿子素有“動物人參”的美譽(yù),其鴿蛋含有豐富的蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)和維生素等營養(yǎng)成分,且口感細(xì)嫩爽滑,深受人們喜愛。目前,養(yǎng)鴿業(yè)已經(jīng)成為我國繼雞、鴨、鵝后的第四家禽產(chǎn)業(yè)。但隨著生活水平的提高,人們對鴿蛋品質(zhì)的要求也越來越高。蛋品質(zhì)容易受到遺傳、環(huán)境和運(yùn)輸?shù)榷喾N因素的影響,由于鴿蛋的蛋殼薄,在運(yùn)輸過程中極易破損,容易污染其他蛋,造成蛋品質(zhì)下降、養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益受損。因此,改善蛋品質(zhì)是養(yǎng)鴿生產(chǎn)過程中普遍關(guān)注的問題之一。有研究報(bào)道,植物提取物可以作為改善蛋品質(zhì)的功能性飼料添加劑,已被應(yīng)用于家禽生產(chǎn),但在養(yǎng)鴿生產(chǎn)中的應(yīng)用鮮有報(bào)道。
茶多酚(Tea Polyphenols)是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱,為黃褐色粉狀固體,具有淡淡的茶香味和澀味。茶多酚主要成分包括黃烷醇類(兒茶素類)、花色苷類和黃酮類等化合物,具有抗氧化、提高機(jī)體免疫力和繁殖性能的作用,目前已被作為安全、無毒副作用的功能性飼料添加劑應(yīng)用于畜禽生產(chǎn)。杜潔明等研究表明,在羅曼蛋雞飼糧中添加茶多酚可以提高雞蛋重、蛋白高度和哈氏單位,有利于延長雞蛋的貯存期。王建萍等研究發(fā)現(xiàn),在蛋雞飼糧中添加600、1 000 mg/kg 茶多酚能拮抗重金屬毒性,緩解因釩過量而造成蛋品質(zhì)下降,并提高機(jī)體抗氧化能力。蔣磊等研究表明,在飼糧中添加0.04% 和0.06% 茶多酚能改善肉雞血清生化指標(biāo),增強(qiáng)機(jī)體免疫力。劉寶德等研究表明,在海蘭褐蛋雞飼糧中添加600 mg/kg 茶多酚可以顯著提高32 周齡蛋雞產(chǎn)蛋后期產(chǎn)蛋率,降低料蛋比,改善蛋雞的生產(chǎn)性能。鑒于此,本試驗(yàn)旨在研究飼糧中添加不同劑量的茶多酚對青年種鴿的飼喂效果,以期為茶多酚在養(yǎng)鴿生產(chǎn)中的合理應(yīng)用提供參考數(shù)據(jù)。
1.1 試驗(yàn)動物及材料 試驗(yàn)種鴿和基礎(chǔ)飼糧均由廣州市厚德鴿養(yǎng)殖有限公司提供;茶多酚(純度≥98.0%)購自成都華高生物有限公司。
1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)飼糧 采用單因素隨機(jī)分組設(shè)計(jì)。將216 對體重相近、產(chǎn)蛋批次相同、健康的7 月齡青年種鴿(法國白卡鴿×深王鴿)隨機(jī)分為4 組,每組6個重復(fù),每個重復(fù)9 對種鴿。預(yù)試期1 周,正試期15周。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗(yàn)組飼喂分別含100、200、400 mg/kg 茶多酚的飼糧?;A(chǔ)飼糧中原糧組成為玉米37.50%、高粱31.25%、小麥15.625%、豌豆15.625%,其營養(yǎng)成分為代謝能13.96 MJ/kg、粗蛋白質(zhì)13.82%、粗脂肪2.65%、鈣0.26%、磷0.30%、賴氨酸0.67%、蛋氨酸0.15%。試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧中顆粒料組成及營養(yǎng)成分見表1。
表1 基礎(chǔ)飼糧中顆粒料組成及營養(yǎng)成分(風(fēng)干基礎(chǔ))
1.3 飼養(yǎng)管理 于2020 年7—11 月在廣州市厚德鴿養(yǎng)殖有限公司開展青年種鴿飼養(yǎng)試驗(yàn)。試驗(yàn)采用開放式鴿舍和3 層垂直式鴿籠,每籠飼養(yǎng)1 對種鴿。試驗(yàn)期內(nèi),采用自然光照和人工光照相結(jié)合,每天光照16 h。根據(jù)種鴿采食習(xí)性和養(yǎng)殖生產(chǎn)實(shí)際,基礎(chǔ)飼糧配比模式為80% 原糧+20% 顆粒料。試驗(yàn)采用人工投料,分別于09:00—11:00 和15:00—17:00 投料1 次。所有試驗(yàn)種鴿均自由采食和飲水,自由采食保健砂。定期對鴿舍進(jìn)行消毒和防疫。
1.4 測定指標(biāo)與方法
1.4.1 種鴿產(chǎn)蛋性能 試驗(yàn)期間每天記錄種鴿的總產(chǎn)蛋數(shù)、總蛋重、采食量和產(chǎn)蛋時間,并計(jì)算產(chǎn)蛋量、平均蛋重、平均日采食量、料蛋比和產(chǎn)蛋間隔(種鴿帶仔情況下的產(chǎn)蛋間隔)。
1.4.2 鴿蛋品質(zhì) 于試驗(yàn)結(jié)束前1 周,每組收集54 枚鮮蛋(每個重復(fù)9 枚),用于蛋品質(zhì)的檢測。使用蛋品質(zhì)測定儀(EA-01,ORKA 公司)測定蛋白高度和蛋黃顏色;使用蛋殼強(qiáng)度測定儀(EFR-01,ORKA 公司)測定蛋殼強(qiáng)度;使用分光測色儀(NS800,三恩時科技有限公司)測定蛋殼顏色;使用電子螺旋測微器測量蛋殼厚度;使用電子數(shù)顯游標(biāo)卡尺測量長徑和短徑,并計(jì)算蛋形指數(shù);使用電子天平秤稱量蛋殼重、蛋清重和蛋黃重。按公式計(jì)算哈氏單位:
哈氏單位=100×lg[H-(1.7×W)+7.57]
式中,H 為蛋白高度(mm),W 為蛋重(g)。
1.4.3 鴿蛋抗氧化能力 試驗(yàn)結(jié)束前1 周,每組另外收集6 枚鴿蛋,保存于4℃冰箱,用于檢測鴿蛋全蛋液的抗氧化指標(biāo)。比色法測定谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)活性,硫代巴比妥酸法測定丙二醛(MDA)含量。試劑盒均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。
1.4.4 種鴿血清生化指標(biāo) 試驗(yàn)結(jié)束時,從各重復(fù)中隨機(jī)選取1 只試驗(yàn)?zāi)给?,空?2 h 后于翅下靜脈采血,靜置后分離血清,送往廣州市新海醫(yī)院檢驗(yàn)中心進(jìn)行總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和堿性磷酸酶(ALP)活性測定,并計(jì)算球蛋白(GLB)含量。
1.5 統(tǒng)計(jì)分析 采用SPSS 23.0 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(One-Way ANOVA),并采用Tukey 檢驗(yàn)法進(jìn)行多重比較,線性和二次比較分析評價不同茶多酚水平的作用效果,<0.05 為差異顯著,>0.05 為差異不顯著。結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
2.1 茶多酚對青年種鴿產(chǎn)蛋性能的影響 由表2 可知,與對照組相比,各試驗(yàn)組種鴿產(chǎn)蛋量均提高(<0.05),并隨著茶多酚添加水平的升高呈線性變化(<0.05);各試驗(yàn)組種鴿平均蛋重也提高(<0.05),且呈線性和二次曲線變化(<0.05);料蛋比較對照組分別降低了22.00%、27.90% 和35.00%(<0.05),產(chǎn)蛋間隔均縮短(<0.05),且料蛋比和產(chǎn)蛋間隔隨著茶多酚添加水平的升高呈線性和二次曲線變化(<0.05);200、400 mg/kg 茶多酚組平均日采食量較對照組降低了14.02%和22.26%(<0.05),隨著茶多酚添加水平的升高線性下降(<0.05)。
表2 茶多酚對青年種鴿產(chǎn)蛋性能的影響
2.2 茶多酚對青年種鴿蛋品質(zhì)的影響 由表3 可知,與對照組相比,各試驗(yàn)組蛋殼強(qiáng)度和哈氏單位均提高(<0.05),且呈線性和二次曲線變化(<0.05);200、400 mg/kg 茶多酚組蛋白高度均高于對照組(<0.05),且隨著茶多酚添加水平的升高線性升高(<0.05);400 mg/kg 茶多酚組蛋殼重較對照組提高了20.09%(<0.05),且呈線性和二次曲線變化(<0.05);400 mg/kg 茶多酚組蛋黃顏色較對照組提高了43.75%(<0.05),隨著茶多酚添加水平的升高呈線性升高(<0.05);但各組間蛋形指數(shù)、蛋清重、蛋黃重、蛋殼厚度和蛋殼顏色差異均不顯著。
表3 茶多酚對青年種鴿蛋品質(zhì)的影響
2.3 茶多酚對鴿蛋抗氧化能力的影響 由表4 可知,與對照組相比,200、400 mg/kg 茶多酚組GSH-Px 活性提高(<0.05),隨著茶多酚添加水平升高呈線性升高(<0.05);400 mg/kg 茶多酚組MDA 含量低于對照組(<0.05),并隨著茶多酚添加水平升高呈線性升高(<0.05)。
表4 茶多酚對鴿蛋抗氧化能力的影響
2.4 茶多酚對青年種鴿血清生化指標(biāo)的影響 由表5 可知,與對照組相比,400 mg/kg 茶多酚組血清TP 含量升高了22.58%(<0.05),并隨著茶多酚添加水平升高呈線性升高(<0.05);200、400 mg/kg 茶多酚組血清GLB 含量較對照組升高了23.63% 和24.81%(<0.05),血清ALT 活性降低了33.63% 和27.43%(<0.05),且種鴿血清GLB 含量和ALT 活性隨著茶多酚添加水平升高呈線性和二次曲線變化(<0.05);但各組間血清ALB 含量、AST 和ALP 活性均無顯著影響。
表5 茶多酚對青年種鴿血清生化指標(biāo)的影響
3.1 茶多酚對青年種鴿產(chǎn)蛋性能的影響 營養(yǎng)調(diào)控是畜禽養(yǎng)殖生產(chǎn)中常被用于提高生產(chǎn)性能的方法之一。賴興富等報(bào)道,茶多酚具有改善畜禽生產(chǎn)性能的生理功能。張旭等研究表明,在羅曼褐蛋雞飼糧中添加100 mg/kg 茶多酚能顯著提高雞蛋的平均蛋重,延緩哈氏單位的下降,延長蛋的保鮮期。張玉等研究表明,產(chǎn)蛋后期蛋雞的體內(nèi)代謝能力和生理功能下降,飼糧中添加200 mg/kg 和400 mg/kg 茶多酚可能通過平衡蛋雞的生殖系統(tǒng),顯著提高60 周齡羅曼蛋雞的產(chǎn)蛋率,且隨著試驗(yàn)期的延長效果更顯著。本研究結(jié)果也表明,茶多酚具有顯著提高種鴿的產(chǎn)蛋量和平均蛋重、縮短產(chǎn)蛋間隔的作用,且隨著添加水平升高而作用加強(qiáng)。鴿不同于其他家禽,其生物學(xué)特性比較特殊,不能連續(xù)產(chǎn)蛋,具有產(chǎn)蛋間隔。而種鴿產(chǎn)蛋間隔縮短可以增加種鴿產(chǎn)蛋數(shù)和年產(chǎn)乳鴿數(shù),是加快肉鴿生產(chǎn)的關(guān)鍵因素。另外,茶多酚含有黃酮類物質(zhì),該物質(zhì)具有抗氧化活性和類激素樣作用,可以促進(jìn)家禽對飼料中營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和利用,從而提高家禽的生產(chǎn)性能。何俊金研究表明,65 周齡羅曼蛋雞在產(chǎn)蛋后期的平均采食量隨著茶多酚純度和劑量的互作效應(yīng)加強(qiáng)呈不同程度降低。汪小紅等研究發(fā)現(xiàn),海蘭灰蛋雞飼糧中添加200 mg/kg 茶多酚飼喂4 周后,能夠顯著降低蛋雞的料蛋比。本試驗(yàn)結(jié)果也表明,隨著飼糧中茶多酚添加水平的升高,種鴿的平均日采食量和料蛋比有降低的趨勢??赡苁且?yàn)椴瓒喾雍绪匪岬任镔|(zhì),口感微澀,使飼糧的適口性較差,從而降低種鴿的平均日采食量。蔣慧穎等研究報(bào)道,茶多酚能夠調(diào)節(jié)腸道菌群,還能促進(jìn)機(jī)體對營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收和利用。也有相關(guān)研究報(bào)道,茶多酚能夠促進(jìn)有益菌的生長,調(diào)節(jié)腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)及多樣性,同時能抑制胃腸道中潛在致病菌的增殖。由此可推測,飼糧添加茶多酚可以促進(jìn)種鴿腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和利用,進(jìn)而在采食量下降的情況下,也能維持種鴿的營養(yǎng)狀況,未對產(chǎn)蛋性能造成負(fù)面影響,還可以提高飼料報(bào)酬。
3.2 茶多酚對青年種鴿蛋品質(zhì)的影響 哈氏單位是衡量蛋的新鮮度和蛋白質(zhì)量的指標(biāo)之一,哈氏單位越高,其蛋品質(zhì)越好。夏兵等研究發(fā)現(xiàn),在仙居雞飼糧中添加茶多酚可以顯著提高哈氏單位,保持雞蛋新鮮度。茶多酚通過激活抗氧化酶活性,清除體內(nèi)自由基,阻止蛋白質(zhì)損傷變性,延緩哈氏單位下降可能與茶多酚具有抗氧化功能有關(guān)。杜潔明等研究發(fā)現(xiàn),在處于產(chǎn)蛋高峰期的羅曼蛋雞飼糧中添加茶多酚可以提高平均蛋重、蛋白高度和哈氏單位,推測茶多酚可以通過激活蛋白激酶(MLCK)活性促進(jìn)輸卵管收縮,增加輸卵管膨大部分泌蛋清進(jìn)而提高蛋白高度,其具體的作用機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。
蛋殼重、蛋殼厚度和蛋殼強(qiáng)度是評價蛋殼質(zhì)量的重要指標(biāo),而蛋殼質(zhì)量在養(yǎng)殖過程中會影響種蛋的破損率以及貯存時間。曾李等研究表明,發(fā)酵茶籽粕可提高海蘭褐蛋雞的產(chǎn)蛋率,增強(qiáng)蛋殼硬度和降低破蛋率,可能是茶多酚具有抗氧化和抑菌作用,能夠促進(jìn)蛋雞對飼糧中營養(yǎng)物質(zhì)(蛋白質(zhì)、鈣和磷等)的吸收利用,改善蛋殼質(zhì)量。何俊金報(bào)道,在羅曼蛋雞飼糧中添加2 666 mg/kg 茶多酚(純度為20%)可以提高蛋殼強(qiáng)度,添加1 333 mg/kg 茶多酚能顯著提高雞蛋的蛋黃顏色,滿足消費(fèi)者對蛋黃色澤的需求。家禽本身不能合成色素,家禽產(chǎn)品著色主要依靠于家禽從外界獲取,適宜劑量的茶多酚提高蛋黃顏色的原因可能是其含有葉黃素和類胡蘿卜素等物質(zhì)。汪小紅等研究表明,飼糧中添加茶多酚未顯著影響雞蛋的蛋殼強(qiáng)度和蛋黃顏色。與本研究結(jié)果不同,這可能與茶多酚的組成和來源不同有關(guān)。
3.3 茶多酚對鴿蛋抗氧化能力的影響 正常狀態(tài)下,機(jī)體內(nèi)存在氧化與抗氧化系統(tǒng)的平衡,機(jī)體抗氧化防御系統(tǒng)能夠清除機(jī)體代謝產(chǎn)生的活性氧,維持機(jī)體的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。GSH-Px 是機(jī)體內(nèi)重要的過氧化物分解酶,可以使有毒的過氧化物還原為無毒的羥基化合物,保持細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性。MDA 是脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物,可以反映脂質(zhì)過氧化程度。茶多酚能清除體內(nèi)自由基、減少脂質(zhì)過氧化物的生成,進(jìn)而達(dá)到改善其畜產(chǎn)品品質(zhì)的作用。張旭等研究表明,蛋雞飼糧中添加100、150、200 mg/kg 茶多酚可以使蛋黃中MDA 含量分別降低18.40%、19.76%和31.76%。汪麗偉等研究表明,蛋用仔公雞日糧中添加400 mg/kg 茶多酚可以顯著提高胸肌中GSH-Px 活性,抑制脂質(zhì)過氧化物MDA 含量,改善熱應(yīng)激下蛋用仔公雞的抗氧化性能。本研究結(jié)果也表明,茶多酚有提高畜產(chǎn)品抗氧化能力的作用,且隨著茶多酚添加水平升高,鴿蛋中GSH-Px 活性有升高趨勢,MDA 含量有下降趨勢,且種鴿飼糧中添加200~400 mg/kg 茶多酚的效果較好。茶多酚可提高鴿蛋的抗氧化能力可能與多酚類化合物本身特殊的化學(xué)結(jié)構(gòu)有關(guān)。多酚類化合物結(jié)構(gòu)具有芳香族特性和多個羥基,使其成為良好的氫或電子供體,可以中和自由基和其他活性氧(ROS)。這也與飼糧中添加茶多酚能夠顯著提高鴿蛋哈氏單位、改善鴿蛋的新鮮度相符。
3.4 茶多酚對青年種鴿血清生化指標(biāo)的影響 血清中的免疫球蛋白含量可以反映出機(jī)體蛋白質(zhì)代謝情況。TP和ALB 可以維持血液滲透壓,GLB 參與凝血調(diào)節(jié)和體液免疫,具有抗炎抑菌、修復(fù)損傷和提高機(jī)體免疫力等作用。蔣磊等研究表明,日糧中添加茶多酚通過促進(jìn)免疫球蛋白的分泌,從而提高血清TP 和ALB 含量。汪麗偉研究表明,飼糧中添加茶多酚可以通過提高蛋用仔公雞血清GLB 含量、降低白球比來增強(qiáng)機(jī)體免疫力抵御高溫應(yīng)激。本研究結(jié)果表明,飼糧中隨著茶多酚添加水平的升高,顯著增強(qiáng)了青年種鴿的免疫能力,推測其原因是茶多酚能抑制炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生,刺激B 細(xì)胞的增殖和分化,促進(jìn)免疫球蛋白的分泌,進(jìn)而改善機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫功能。
在臨床上,ALT 和AST 是反映肝功能的重要指標(biāo)。當(dāng)肝功能障礙或肝細(xì)胞受損時,ALT 和AST 活性會明顯升高。李玉等研究發(fā)現(xiàn),在犬飼糧中添加1.00%綠茶粉或0.25% 茶多酚均能顯著降低血清ALT 活性,對犬的肝臟具有保護(hù)作用。本試驗(yàn)結(jié)果與其相似,可能是茶多酚能清除自由基,抑制肝臟的黃嘌呤氧化酶活性,阻止脂質(zhì)過氧化損傷肝細(xì)胞,其具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
本研究結(jié)果表明,飼糧中添加茶多酚可以提高青年種鴿的產(chǎn)蛋性能,改善鴿蛋品質(zhì)及血清生化指標(biāo),提高機(jī)體免疫能力。綜上所述,青年種鴿飼糧中添加茶多酚(純度≥98.0%)推薦劑量為200~400 mg/kg。