膽堿對產(chǎn)蛋期種鵝繁殖性能、血液生殖激素及蛋品質(zhì)的影響

李曉坤，王寶維*，張名愛，凡文磊，孔 敏，岳 斌，汪 超

（1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)優(yōu)質(zhì)水禽研究所，國家水禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系營養(yǎng)與飼料研究室，山東青島 266109；2.重慶市畜牧科學(xué)院，重慶 402460）

膽堿又稱維生素B、增蛋素等，屬水溶性維生素，在動植物組織中分布廣泛。在飼糧中添加適宜水平的膽堿不僅能增強畜禽體質(zhì)、防止由于脂肪在肝臟和腎臟中過度沉積所引發(fā)的各類疾病，還可以提高生產(chǎn)能力、改善畜禽產(chǎn)品質(zhì)量。因此，研究膽堿對產(chǎn)蛋期種鵝繁殖性能、生殖激素及蛋品質(zhì)的影響具有重要意義。張文旭等研究表明，飼糧中添加膽堿可顯著提高生長期青農(nóng)灰鵝的生長性能、屠宰性能及表觀利用率。研究表明，過高的膽堿攝入會導(dǎo)致蛋雞產(chǎn)蛋率降低，并提高料蛋比。翟欽輝等研究表明，當?shù)半u飼糧中缺少膽堿時，會出現(xiàn)脫腱病、產(chǎn)蛋比例降低及蛋重減小等。倪玉嬌研究表明，在蛋雞產(chǎn)蛋高峰期的基礎(chǔ)飼糧中添加膽堿對蛋雞平均采食量及料蛋比具有顯著影響。馬維英等研究表明，當基礎(chǔ)飼糧中膽堿添加500 mg/kg 時，蛋殼強度及蛋形指數(shù)達到最大值，同時蛋白高度及哈氏單位都呈提高趨勢。目前，我國關(guān)于種禽膽堿的研究主要集中于雞和鴨，對于種鵝的膽堿需要量研究尚處于空白。本試驗旨在研究飼糧中添加不同水平膽堿對產(chǎn)蛋期種鵝繁殖性能、蛋品質(zhì)及血液生殖激素的影響，篩選種鵝產(chǎn)蛋期飼糧中膽堿的適宜添加量，為豐富我國種鵝營養(yǎng)需求量數(shù)據(jù)庫提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計及飼糧 選擇34 周齡體況相似的種鵝（五龍鵝）180 只，隨機分為6 組（0、200、400、600、800、1 000 mg/kg 膽堿），每組6 個重復(fù)，每個重復(fù)中4 只母鵝1 只公鵝。預(yù)試期1 周，正試期10 周，采用開放式鵝舍分欄飼養(yǎng)。所有試驗種鵝均由青島農(nóng)業(yè)大學(xué)優(yōu)質(zhì)水禽研究所育種基地提供，氯化膽堿采購于山東巨佳生物科技有限公司（有效成分含量70%）。試驗用基礎(chǔ)飼糧以玉米和豆粕為主要原料，將氯化膽堿換算成純量添加，參照NRC（1994）家禽營養(yǎng)需要量中推薦的種鵝飼糧營養(yǎng)水平設(shè)計配方。種鵝的飼糧組成和營養(yǎng)成分見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧糧組成及營養(yǎng)成分（風干基礎(chǔ)）

1.2 飼養(yǎng)管理 試驗種鵝皆采用地面開放式飼養(yǎng)方式，不限飲水，自主采食，每日07:00 和16:00 各喂料1 次（可以依據(jù)采食情況臨時調(diào)整飼糧添加量）。試驗前要保證種鵝鵝舍及水槽料槽干凈衛(wèi)生，且進行嚴格的刷洗并消毒；正試期內(nèi)，每隔3 d 殺菌消毒1 次。

1.3 繁殖性能的測定 每日08:00 撿蛋，記錄當日產(chǎn)蛋數(shù)量、合格蛋數(shù)、種蛋重量以及采食量。每組隨機挑選新鮮種蛋（10 d 內(nèi)產(chǎn)出）70 個，6 組共420 個，每30 d孵化1 次，試驗期間總共進行2 次孵化，分別記錄孵化指標。

1.4 血清生殖激素的測定 試驗期結(jié)束時，隨機選取每組各個重復(fù)體況近似的母鵝2 只，翅靜脈取血10 mL，3 000 r/min 離心10 min 后，制得血清樣品，分裝后進行冷凍保存。采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）測定血清孕酮、睪酮、黃體生成素、雌二醇含量，相關(guān)指標的試劑盒為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。

1.5 蛋品質(zhì)的測定 蛋重、蛋白高度、蛋形指數(shù)、蛋殼強度、蛋殼厚度、蛋黃顏色、蛋殼顏色、哈氏單位及蛋黃比率均按照《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量統(tǒng)計方法》（NY/T 823-2004）測定與計算。

1.6 統(tǒng)計分析 采用SPSS 22.0 軟件進行單因素方差分析（One-Way ANOVA，LSD）、雙變量相關(guān)性分析和Duncan's 多重比較檢驗方法，分析種鵝飼糧中不同膽堿添加水平的影響及各指標間的差異性；對不同膽堿水平下的繁殖性能進行二次曲線擬合，獲得最適添加量。

2 結(jié)果

2.1 不同膽堿水平對種鵝繁殖性能的影響 由表2 可知，飼糧中添加不同膽堿添加水平對鵝種蛋受精率和健雛率的影響均不顯著。200～800 mg/kg 組料蛋比低于0 mg/kg組（＜0.05）；400～800 mg/kg 組種蛋合格率高于200 mg/kg組和1 000 mg/kg 組（＜0.05）、0 mg/kg 組（＜0.01），200、800 mg/kg 組種蛋合格率高于0 mg/kg 組（＜0.05）；600 mg/kg 組產(chǎn)蛋率高于0、200 mg/kg 組（＜0.05）；400 mg/kg 組孵化率高于0、800 mg/kg 組（＜0.05）。

表2 不同膽堿水平對產(chǎn)蛋期種鵝繁殖性能的影響 %

建立回歸方程：

=28.720+0.048-3.779E（=0.227，P=0.014）

=89.358+0.033-2.702E（=0.737，P＜0.01）

=87.836+0.039-3.806E（=0.337，P＜0.01）

由上述回歸曲線方程可知，飼糧中膽堿添加水平610.659 mg/kg 時，種蛋合格率較高；當飼糧中膽堿添加量為600 mg/kg 時，料蛋比、產(chǎn)蛋率、受精率、孵化率及健雛率均達最佳，此時種鵝繁殖性能較為良好。從繁殖性能方面分析，建議在產(chǎn)蛋期種鵝飼糧中添加600 mg/kg 膽堿。

2.2 不同膽堿水平對產(chǎn)蛋期種鵝血清生殖激素的影響由表3 可見，飼糧中不同膽堿添加水平對血清中孕酮、睪酮、雌二醇含量有極顯著影響，對黃體生成素含量無顯著影響。600、800 mg/kg 組孕酮含量高于0～400 mg/kg組（＜0.01）；600、800 mg/kg 組睪酮含量高于0 mg/kg組（＜0.01）、200～600 mg/kg 組（＜0.05）；600、800 mg/kg 組雌二醇含量高于0 mg/kg 組（＜0.01）、200～600 mg/kg（＜0.05）。綜上結(jié)果可知，在飼糧中膽堿添加水平為600 mg/kg 時，種鵝血清中孕酮、睪酮、雌二醇含量均能達到最高。

表3 不同膽堿水平對產(chǎn)蛋期種鵝生殖激素的影響

2.3 不同膽堿水平對種蛋蛋品質(zhì)的影響 由表4 可知，飼糧中添加不同水平的膽堿對于種蛋哈氏單位、蛋白高度、蛋殼強度和蛋形指數(shù)有顯著影響，對蛋重、蛋殼顏色、蛋黃比率、蛋殼厚度、蛋黃顏色無有顯著影響。600 mg/kg 蛋形指數(shù)高于0、1 000 mg/kg 組（＜0.05）。600 mg/kg 組蛋殼強度高于0 mg/kg 組（＜0.01）、200 mg/kg組（＜0.05），而200～800 mg/kg 這4 組高于0 mg/kg組（＜0.05）。200、600 mg/kg 組哈氏單位高于0、1 000 mg/kg 組（＜0.01），400、800 mg/kg 組高于0 mg/kg組（＜0.05）。以上結(jié)果表明，種鵝產(chǎn)蛋期飼糧中膽堿添加水平為600 mg/kg 時，種蛋蛋形指數(shù)、哈氏單位、蛋白高度、蛋殼強度均可達到最大值。

表4 不同膽堿水平對種蛋品質(zhì)的影響

2.4 膽堿干預(yù)條件下種鵝繁殖性能與血清生殖激素相關(guān)性分析 由表5 可知，孕酮與種蛋合格率顯著相關(guān)；睪酮與種蛋合格率及產(chǎn)蛋率極顯著相關(guān)，與孵化率顯著相關(guān)；雌二醇與產(chǎn)蛋率、種蛋合格率及孵化率極顯著相關(guān)。

表5 飼糧中膽堿添加水平對產(chǎn)蛋期種鵝繁殖性能與血清生殖激素的相關(guān)性

3 討 論

3.1 不同膽堿水平對產(chǎn)蛋期種鵝繁殖性能的影響 有研究表明，在低水平蛋白型或玉米-豆粕型飼糧中，或者飼糧中缺乏含硫氨酸時，適宜的補充膽堿可以顯著提高產(chǎn)蛋率和料蛋率，達到最佳生產(chǎn)狀態(tài)。馬維英等對紹興鴨的研究表明，膽堿對產(chǎn)蛋期種鴨的繁殖性能有一定影響，尤其顯著影響平均蛋重、產(chǎn)蛋率，當飼糧膽堿添加量為500 mg/kg 時，種鴨的生產(chǎn)性能指標較為良好。秦永平等研究表明，飼糧中添加膽堿可顯著提高產(chǎn)蛋率，提高飼料報酬，當膽堿實際添加量換算成純量為600 mg/kg 時最佳。廖杰研究表明，在蛋雞基礎(chǔ)飼糧中加入1 042 mg/kg 膽堿能顯著提高飼料轉(zhuǎn)化率及產(chǎn)蛋量，降低畸形破殼蛋的比例。崔明明研究顯示，飼糧中添加氯化膽堿能夠減少破殼蛋和沙皮蛋的比例，提高雞蛋合格率。倪玉嬌研究表明，在處于產(chǎn)蛋高峰期蛋雞的低能量基礎(chǔ)飼糧中添加膽堿，對商品蛋雞平均采食量及料蛋比有顯著影響，當飼糧中膽堿添加水平為300 mg/kg 時，商品蛋雞的經(jīng)濟收益為最佳。本研究結(jié)果顯示，在種鵝的基礎(chǔ)飼糧中加入膽堿對種蛋受精率和健雛率沒有顯著影響，當飼糧中膽堿添加水平為600 mg/kg 時，可顯著減低種鵝的料蛋比例，顯著提高了種鵝的產(chǎn)蛋率、蛋合格率以及孵化率。綜合本研究結(jié)果，添加膽堿對種鵝的繁殖性能有一定影響，但膽堿添加水平與前人研究結(jié)果差異較大，可能與膽堿純度、家禽種類或飼養(yǎng)模式相關(guān)。

3.2 不同膽堿水平對產(chǎn)蛋期種鵝血液生殖激素的影響有研究表明，生殖激素通過下丘腦-垂體-性腺軸的調(diào)控在雞蛋的產(chǎn)生過程中發(fā)揮著重要作用。郭禹等研究表明，在下丘腦-垂體-性腺軸的調(diào)控系統(tǒng)中存在正反饋和負反饋調(diào)節(jié)，而下丘腦及垂體的受體表達水平與其負反饋調(diào)節(jié)相關(guān)。王芳等研究表明，許多中藥及西藥都可提高受體表達或者增強激素水平，從而達到提高產(chǎn)蛋性能。劉禹辰等研究表明，下丘腦-垂體-性腺軸可以受維生素、激素等刺激以提高產(chǎn)蛋率以及種蛋合格率。趙曉鈺等研究結(jié)果顯示，家禽繁殖性能受血液中生殖激素含量的影響。當血液中黃體生成素與雌二醇含量較高時，種禽產(chǎn)蛋性能較好。Reddy 等研究指出，血液中孕酮濃度與蛋雞產(chǎn)蛋率具有相關(guān)性，當血清孕酮濃度高時，蛋雞產(chǎn)蛋率也較高。本研究結(jié)果顯示，隨著飼糧膽堿添加水平的提高，血液中睪酮、孕酮、雌二醇、黃體生成素濃度基本呈先升高后降低的趨勢，當膽堿的添加水平為600 mg/kg 時，上述激素濃度皆達到最高值；其中睪酮、孕酮、雌二醇與產(chǎn)蛋率和孵化率有顯著相關(guān)性。膽堿是B 族維生素的一種，其作用機理可能是參與下丘腦-垂體-性腺軸的調(diào)控系統(tǒng)中的正反饋或負反饋調(diào)節(jié)，提高受體水平或直接提高激素水平，從而影響種鵝生產(chǎn)性能。

3.3 不同水膽堿水平對產(chǎn)蛋期種蛋品質(zhì)的影響 劉松等研究顯示，在蛋雞飼糧中加入氯化膽堿可以提高雞蛋蛋殼厚度、強度及蛋黃顏色，綜合繁殖性能考慮，蛋雞飼糧中氯化膽堿最適量為1 000 mg/kg。蛋黃顏色受禽種類以及飼糧中著色物質(zhì)含量影響。董淑楠等研究顯示，蛋禽本身不能合成色素，蛋黃顏色與飼糧中類胡蘿卜素含量有關(guān)，蛋黃顏色的改變可以體現(xiàn)蛋的營養(yǎng)價值。Ruiz 等研究表明，蛋黃顏色未受到飼糧中膽堿的影響。王晶研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中膽堿添加水平為2 960 mg/kg 時，能夠極顯著降低蛋黃顏色。秦永平等研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加膽堿后能夠顯著提高產(chǎn)蛋率及蛋殼品質(zhì)，但對蛋重沒有顯著影響。馬維英等研究表明，膽堿可能通過提高甲基代謝間接參與肉堿合成進而影響哈氏單位和蛋白高度來提高鴨蛋的新鮮程度。本研究結(jié)果顯示，膽堿對蛋殼強度、蛋形指數(shù)、蛋白高度、哈氏單位有顯著影響，可能與膽堿被氧化后最終以S-腺苷甲硫氨酸為活性甲基供體參與甲基代謝活動相關(guān)；添加膽堿對蛋黃顏色的影響不顯著，可能因為蛋黃顏色主要受遺傳及飼糧中所含著色物質(zhì)有關(guān)。

4 結(jié) 論

本研究結(jié)果表明，600 mg/kg 膽堿可以顯著降低種鵝料蛋比，顯著提高產(chǎn)蛋率、種蛋合格率及孵化率，顯著改善蛋形指數(shù)、蛋白高度、蛋殼強度和哈氏單位；適宜膽堿水平能顯著提高產(chǎn)蛋期種鵝血清生殖激素中孕酮、睪酮、雌二醇含量，并且生殖激素水平與繁殖性能具有顯著相關(guān)性。建議產(chǎn)蛋期種鵝飼糧中的膽堿添加水平為600 mg/kg。