583株無(wú)乳鏈球菌的感染分布及藥敏分析

陳 慶 程 烽 邱華紅

福建省婦幼保健院檢驗(yàn)科，福建福州 350001

無(wú)乳鏈球菌（Streptococcus agalactiae，GBS）是一種革蘭氏陽(yáng)性鏈球菌，目前研究證實(shí)[1]，GBS 是造成新生兒感染的主要致病菌，同時(shí)也可引發(fā)老年群體、圍產(chǎn)期孕婦等免疫功能低下人群的侵襲性感染。相關(guān)研究證實(shí)[2]，GBS 感染可導(dǎo)致孕婦出現(xiàn)早產(chǎn)、胎膜早破等不良妊娠結(jié)局。在GBS 感染干預(yù)方面，目前仍以抗生素為主，但近年來(lái)由于耐藥菌株出現(xiàn)的增加，使GBS 感染人群治療效果受到一定影響。充分了解GBS 感染情況，明確其耐藥性，對(duì)于指導(dǎo)臨床合理用藥，改善患者預(yù)后具有重要意義。本研究以此為切入點(diǎn)，對(duì)福建省婦幼保健院GBS 陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行分析，同時(shí)分析GBS 對(duì)常見(jiàn)抗菌藥的藥敏試驗(yàn)，旨在為臨床提供參考。

1 資料與方法

1.1 菌株來(lái)源

584 株無(wú)乳鏈球菌均來(lái)自福建省婦幼保健院2019年1月1日至2020年12月31日住院各科室送檢的生殖道分泌物、血液、臍部、腦脊液、膿液、尿液等標(biāo)本。

1.2 培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法

哥倫比亞血培養(yǎng)基購(gòu)于貝瑞特生物技術(shù)（鄭州）有限責(zé)任公司。按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第4 版）[3]進(jìn)行培養(yǎng)分離。

1.3 細(xì)菌鑒定及藥敏

采用法國(guó)梅里埃公司VITEK2 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏分析系統(tǒng)作鑒定和藥敏試驗(yàn)，藥敏結(jié)果按美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)（Clinical Laboratory Standards Institute，CLSI）標(biāo)準(zhǔn)判定。質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株金黃色葡萄球菌ATCC29213，購(gòu)自衛(wèi)建委臨床檢驗(yàn)中心。

1.4 D 試驗(yàn)

對(duì)紅霉素耐藥而克林霉素中介或敏感的GBS，采用紙片擴(kuò)散法（K-B）法進(jìn)行D 試驗(yàn)。將細(xì)菌按標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法接種，貼上15 μg 紅霉素（英國(guó)Oxoid 公司，生產(chǎn)批號(hào)：3312034）和2 μg 克林霉素（英國(guó)Oxoid 公司，生產(chǎn)批號(hào)：2972599）紙片貼于相鄰位置，紙片間距12 mm，經(jīng)5%CO2在35℃下孵育18～24 h 后，結(jié)果顯示鄰近紅霉素紙片側(cè)克林霉素出現(xiàn)似字母D 的抑菌環(huán)，則提示存在可誘導(dǎo)的克林霉素耐藥，判定為D 試驗(yàn)陽(yáng)性。

1.5 觀察指標(biāo)

①分析GBS 菌株來(lái)源情況，對(duì)各菌株的獲取部位進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算構(gòu)成比。②分析GBS 菌株科室分布情況，對(duì)各菌株報(bào)告科室進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。③分析GBS 的藥敏試驗(yàn)和D 試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果，計(jì)算GBS 對(duì)不同抗菌藥的敏感率、耐藥率、中介率，藥物敏感性、耐藥性、中介由專人根據(jù)CLSI 標(biāo)準(zhǔn)判定[4]。

2 結(jié)果

2.1 標(biāo)本來(lái)源部位分布情況

583 株GBS 標(biāo)本來(lái)源分布以生殖道分泌物和血液為主，各占83.7%和8.1%（表1）。

表1 583 株GBS 的標(biāo)本來(lái)源分布及構(gòu)成比（%）

2.2 標(biāo)本的科室分布情況

583 株GBS 標(biāo)本主要分布于產(chǎn)科病區(qū)，婦科病區(qū)和新生兒科，分別占65.7%，19.2%、12.2%（表2）。

表2 GBS 的科室分布及構(gòu)成比

2.3 GBS 的藥敏試驗(yàn)和D 試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果

分離出的583 株GBS 標(biāo)本對(duì)萬(wàn)古霉素、青霉素G、利奈唑胺、替加環(huán)素、奎奴普汀/達(dá)福普汀及氨芐西林6 種抗菌藥的敏感率為100.0%，無(wú)中介或耐藥現(xiàn)象；對(duì)左氧氟沙星、莫西沙星、紅霉素、克林霉素、四環(huán)素的耐藥率分別為28.0%、27.4%、58.3%、49.1%、75.6%（表3）。583 株GBS 中有116 株對(duì)克林霉素中介或敏感而對(duì)紅霉素耐藥，進(jìn)一步對(duì)這116 株菌進(jìn)行D 試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)共有31 株陽(yáng)性，陽(yáng)性率為26.7%，提示克林霉素誘導(dǎo)耐藥，報(bào)告修正為克林霉素“耐藥”。

3 討論

隨著微生物組學(xué)研究的不斷深入，目前研究證實(shí)[5]，人體中微生物的種類及數(shù)量會(huì)隨著飲食、體重、激素及多種因素的變化而改變。相關(guān)研究顯示[6]，在疾病情況下由于激素水平、體重及免疫系統(tǒng)的改變，人體微環(huán)境隨之改變，導(dǎo)致機(jī)體中定植的微生物比例發(fā)生變化，優(yōu)勢(shì)菌群可能出現(xiàn)改變，出現(xiàn)GBS 的定植，對(duì)于孕婦而言，陰道優(yōu)勢(shì)菌群的改變可對(duì)新生兒及孕婦的健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。

本研究結(jié)果顯示，583 例GBS 陽(yáng)性標(biāo)本來(lái)源分布以生殖道分泌物為最高，其次為血液?？剖曳植家援a(chǎn)科為最高，其次為婦科和新生兒科。而其中血液、臍分泌物、腦脊液、膿液、結(jié)膜的標(biāo)本約90%來(lái)源于新生兒科。女性生殖道分泌物GBS 陽(yáng)性占臨床GBS 陽(yáng)性比例較大，產(chǎn)科是臨床GBS 感染高?？剖?，考慮與女性特殊生殖結(jié)構(gòu)有關(guān)。微生物學(xué)研究顯示，GBS 菌株含有豐富的磷酸酯酶，可對(duì)細(xì)胞膜表面的磷脂酶產(chǎn)生破壞作用，導(dǎo)致細(xì)胞膜裂解，引發(fā)局部炎癥反應(yīng)，在炎癥因子作用下最終可導(dǎo)致胎膜早破[7]。相關(guān)研究表明，GBS 菌株還可上行進(jìn)入子宮腔，引發(fā)宮內(nèi)感染，造成胎兒發(fā)育異常及早產(chǎn)，嚴(yán)重者甚至引發(fā)胎兒窘迫[8]。在分娩過(guò)程中GBS 還會(huì)通過(guò)新生兒口咽部進(jìn)入呼吸道，引發(fā)新生兒肺炎、腦膜炎、新生兒膿毒癥等，對(duì)母嬰結(jié)局產(chǎn)生嚴(yán)重不良影響[9]。

本研究對(duì)583 株GBS 病原體進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，結(jié)果顯示GBS 對(duì)青霉素、氨芐青霉素、替加環(huán)素、奎奴普汀/達(dá)福普汀、利奈唑胺、萬(wàn)古霉素均無(wú)耐藥，敏感率為100%。對(duì)左氧氟沙星、莫西沙星、紅霉素、克林霉素、四環(huán)素耐藥率分別為28.0%、27.4%、58.3%、49.1%、75.6%。為了預(yù)防和減少GBS 定植對(duì)母親和新生兒的危害，歐美一些發(fā)達(dá)國(guó)家非常重視對(duì)孕婦孕晚期GBS 的篩查，美國(guó)疾病控制中心于2010年更新修訂了《圍產(chǎn)期B 族鏈球菌感染篩查及防治指南》[10]，指南中指出，在產(chǎn)程開始或胎膜破裂時(shí)開始給予抗生素治療，首選青霉素G，備選氨芐西林，無(wú)需進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，如果低風(fēng)險(xiǎn)青霉素過(guò)敏可選用頭孢唑啉作為替代藥物。若高風(fēng)險(xiǎn)青霉素過(guò)敏，則需要報(bào)告紅霉素與克林霉素藥敏結(jié)果。對(duì)紅霉素、克林霉素均敏感或克林霉素敏感但紅霉素耐藥者行誘導(dǎo)試驗(yàn)陰性者可用克林霉素。對(duì)克林霉素耐藥、紅霉素耐藥或誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性者選用萬(wàn)古霉素，不再建議使用紅霉素治療[11]。

左氧氟沙星和莫西沙星屬于喹諾酮類抗生素，對(duì)胎兒軟骨有損害，不建議使用[12]。而四環(huán)素的耐藥率高達(dá)75.6%，并且會(huì)引起四環(huán)素牙，影響美觀，不推薦使用[13]。此外如奎奴普汀/達(dá)福普汀、利奈唑胺、替加環(huán)素臨床應(yīng)用也需謹(jǐn)慎[14]。對(duì)GBS 攜菌孕婦在臨產(chǎn)時(shí)或胎膜早破時(shí)進(jìn)行敏感抗生素預(yù)防性治療可使新生兒GBS 敗血癥的發(fā)病率降低，改善妊娠結(jié)局[15-17]。

綜上所述，對(duì)妊娠晚期孕婦進(jìn)行GBS 篩查，對(duì)陽(yáng)性患者進(jìn)行積極有效的干預(yù)治療，可有效降低孕婦的感染率，避免早產(chǎn)、宮內(nèi)感染等產(chǎn)前不良事件的發(fā)生。