鹽酸特比萘芬噴霧劑皮膚用藥安全性評價

張俊明 周艷艷 楊倚天 鄭國安 吳金花 肖小華

摘要：目的 研究鹽酸特比萘芬噴霧劑皮膚用藥的安全性。方法 將噴霧劑多次涂于新西蘭兔完整或破損皮膚處，觀察藥物對皮膚產(chǎn)生的刺激反應(yīng)、反應(yīng)強弱及可逆性;采用 Buehler 試驗，觀察豚鼠皮膚接觸噴霧劑后產(chǎn)生的過敏反應(yīng)及過敏強度;客觀評價鹽酸特比萘芬噴霧劑可能存在的毒性反應(yīng)。結(jié)果 鹽酸特比萘芬噴霧劑經(jīng)皮給藥試驗結(jié)果表明，兔皮膚在給藥期間至停藥后72h，均無明顯的紅斑和水腫等皮膚刺激癥狀，原發(fā)性刺激記分及累計刺激指數(shù)均為0;激發(fā)后，豚鼠皮膚48h內(nèi)均無紅斑和水腫形成，致敏反應(yīng)發(fā)生率均為0%;結(jié)論 鹽酸特比萘芬噴霧劑經(jīng)皮給藥無明顯致敏性、刺激性，具有良好的安全性。

關(guān)鍵詞：鹽酸特比萘芬噴霧劑;皮膚刺激性;皮膚致敏

【中圖分類號】 ?R97【文獻標識碼】A 【文章編號】1673-9026（2022）13--01

1994年開始，鹽酸特比萘芬應(yīng)用于我國臨床，作為廣譜抗真菌藥，可針對各種癬病如手癬、腳癬、股癬、體癬和花斑癬、皮膚念珠菌病和指甲真菌感染病等的治療，抗真菌效果明顯優(yōu)于咪唑類（如硝酸咪康唑、酮康唑）、三唑類藥物（如伊曲康唑、氟康唑）、非多烯類的灰黃霉素等。由于特比萘芬殺菌濃度與抑菌濃度相近，有效濃度是治療真菌病藥物中濃度最低的，故氣霧噴劑應(yīng)運而生，加之無需在感染部位進行操作，這減少了手和感染區(qū)域之間的接觸，從而降低了病原體轉(zhuǎn)移到健康皮膚區(qū)域的風險[1]。鹽酸特比萘芬噴霧劑具有使用方便、療效較好、應(yīng)用范圍廣，患者依從性好等優(yōu)勢[2]。因此，評估該噴劑的用藥安全性至關(guān)重要，下文主要通過皮膚致敏性、刺激性試驗[3]，來評估鹽酸特比萘芬噴霧劑的局部外用安全性。

1 試驗材料

1.1 試驗動物

普通級新西蘭兔：16只雌雄各半，體重 2.1 ～ 2.5 kg，合格證編號：NO.430726210100260854，普通級Dunkin Hartley豚鼠，50只雌雄各半300.0～400.0g，NO.430726210100223712，來源：長沙市天勤生物技術(shù)有限公司，動物生產(chǎn)許可證號：SCXK（湘）2019-0015。動物使用許可證號：SYXK（贛）2018- 0008。環(huán)境控制（實測）：溫度：23～26 ℃;日溫差≤4 ℃;濕度：58%～70%;照明時間：12 h/12 h 明暗交替。每只動物上下午各喂1次，自由飲水。

2 試驗藥物

鹽酸特比萘芬噴霧劑，批號：2104002;鹽酸特比萘芬噴霧劑陰性對照，批號：2106001;均來源：華潤三九（南昌）藥業(yè)有限公司;原研對照品：蘭美抒噴霧劑，批號：H1030，來源：Glaxo Smith Kline Consumer Healthcare GmbH﹠Co.KG;2，4-二硝基氯苯，批號：P436374，成都華夏化學試劑有限公司;橄欖油，分析純，批號：C12004122，上海麥克林生化科技有限公司。

2 試驗方法

2.1 鹽酸特比萘芬噴霧劑兔皮膚刺激性試驗

試驗前24h，將實驗兔脊柱兩側(cè)背部皮膚進行剪毛，范圍為3cm×3cm。破損皮膚制作：一次性無菌注射針頭在脫毛區(qū)皮膚上劃“#”字形，均以損傷角質(zhì)層、表皮滲血為度。采用同體左右側(cè)自身對比法，對兔完整皮膚或破損皮膚給藥，左側(cè)依組別分別給予鹽酸特比萘芬噴霧劑或蘭美抒噴霧劑，右側(cè)均給予鹽酸特比萘芬噴霧劑陰性對照，用兩層紗布加一層透明塑料紙覆蓋，膠布封閉固定。4h后，用溫水清潔給藥部位。給藥量為0.5ml，2次/d，連續(xù)7天。首次給藥前以及每天末次給藥去除藥物后1h、末次給藥去除藥物后1、24、48、72h，在自然光線或全光譜燈光下肉眼觀察皮膚反應(yīng)，記錄紅斑及水腫、涂敷部位是否有色素沉著、出血點、皮膚粗糙或皮膚菲薄情況及消退時間，按表1給出的評分標準對涂敷部位皮膚刺激反應(yīng)進行評分。

2.2 鹽酸特比萘芬噴霧劑皮膚過敏性試驗

試驗前24h，分為陰性對照組、特比萘酚組、蘭美抒組、陽性對照組，采用剪毛法，致敏階段將豚鼠脊柱左側(cè)肋腹部、激發(fā)階段將豚鼠脊柱右側(cè)肋腹部的被毛除去，約為3cm×3cm。在第0、7、14天分3次對豚鼠進行致敏，在豚鼠左側(cè)脫毛區(qū)，依組別分別涂敷0.5ml的鹽酸特比萘芬噴霧劑陰性對照、鹽酸特比萘芬噴霧劑、蘭美抒噴霧劑及1%的2，4-二硝基氯苯，用紗布和透明塑料紙覆蓋，以膠布封閉固定6h后，用溫水清潔給藥部位。第28d進行激發(fā)，在豚鼠脊柱右側(cè)背部皮膚脫毛區(qū)，如上法操作。每次致敏后，在去除藥物1h和24h后觀察;激發(fā)后，在去除藥物0h、24h和48h后觀察皮膚紅斑、水腫和其他異常反應(yīng)，按表2進行皮膚反應(yīng)評分，并計算過敏反應(yīng)發(fā)生率。

3 試驗結(jié)果

3.1 兔皮膚刺激性試驗結(jié)果

在給藥觀察期至末次給藥后72h的觀察期，完整/破損皮膚特比奈芬組、完整/破損皮膚蘭美抒噴霧劑組給藥部位均未見紅斑和水腫，無明顯出血點及皮膚菲薄的異常情況。各組原發(fā)性刺激記分和累積刺激指數(shù)為均0分;各組皮膚刺激強度均為無刺激性，結(jié)果見表3。

3.2 豚鼠皮膚過敏性試驗結(jié)果

在第0h、24h及48h觀察激發(fā)部位，陰性對照組、特比萘酚組、蘭美抒組、均未見明顯的紅斑和水腫，按皮膚反應(yīng)評分標準分值均為0，過敏反應(yīng)發(fā)生率均為0，致敏強度均為無致敏性反應(yīng)。陽性對照組于去除藥物后0h，均出現(xiàn)不同程度的紅斑及水腫，其中1只出現(xiàn)嚴重紅斑;致敏24h后仍各有不同程度的紅斑和水腫，其中雌性更為明顯，部分出現(xiàn)中度水腫;48h時紅斑水腫程度減輕，按皮膚反應(yīng)評分標準紅斑1～3分，水腫1～2，致敏率為100%，致敏強度為極強致敏。

4 討論

鹽酸特比萘芬噴霧劑能高度選擇性地抑制真菌麥角鯊烯環(huán)氧化酶，阻斷真菌細胞膜形成過程中的麥鯊烯環(huán)氧化反應(yīng)而干擾真菌固醇的早期生物合成，從而發(fā)揮抑菌和殺滅真菌的作用[4， 5]。兔皮膚刺激試驗試驗結(jié)果顯示，鹽酸特比萘芬噴霧劑和蘭美抒噴霧劑給藥后，對兔完整皮膚和破損皮膚在給藥期間及停藥后72h的觀察期內(nèi)，與陰性對照皮膚給藥部位比較無明顯區(qū)別，各組原發(fā)性刺激記分及累計刺激指數(shù)均為0，提示給藥部位皮膚均無刺激性;豚鼠皮膚過敏性試驗結(jié)果表明陰性對照組、特比萘酚組、蘭美抒組致敏率均為0%，對豚鼠皮膚均不產(chǎn)生皮膚過敏反應(yīng)，而陽性對照組中豚鼠激發(fā)部位出現(xiàn)中度紅斑水腫，少數(shù)至重度紅斑及中度水腫，致敏率為100%，對豚鼠皮膚具有極強致敏反應(yīng)，說明鹽酸特比萘芬噴霧劑未引起皮膚過敏反應(yīng)。綜上，鹽酸特比萘芬噴霧劑皮膚局部用藥無明顯致敏性、刺激性，具有良好的安全性。

參考文獻：

[1] 邢文善， 路芳， 王秋香. 鹽酸特比萘芬藥物制劑的研究進展[J]. 中國藥房， 2016，27（04）： 553-555.

[2] BROWN M， EVANS C， MUDDLE A， et al. Efficacy， Tolerability and Consumer Acceptability of Terbinafine Topical Spray versus Terbinafine Topical Solution： A Phase IIa， Randomised， Observer-Blind， Comparative Study[J]. American Journal of Clinical Dermatology， 2013，14（5）： 413-419.

[3] 國家食品藥品監(jiān)督管理總局. 藥物刺激性、過敏性和溶血性研究技術(shù)指導(dǎo)原則 [EB/OL]. https：//www.nmpa.gov.cn/xxgk/ggtg/qtggtg/20140513120001448.html.

[4] 蔡云香， 薛小燕， 張克輝， 等. 鹽酸特比萘芬噴霧劑、氟康唑滴液與派瑞松乳膏治療外耳道真菌病的療效對比[J]. 中國醫(yī)藥指南， 2017，15（31）： 49-50.

[5] BALFOUR J A， FAULDS D. Terbinafine. A review of its pharmacodynamic and pharmacokinetic properties， and ?therapeutic potential in superficial mycoses[J]. Drugs， 1992，43（2）： 259-284.