現(xiàn)場固相萃取方法快速測定魚塘水8 種農(nóng)藥

金培海 徐健君 張 亮

（1.云浮市公安局刑偵支隊刑科所，廣東 云浮527300；2.珠海市公安局刑警支隊，廣東 珠海519000；3.廣東省公安廳刑事技術(shù)中心，廣東 廣州510050）

廣東省具有良好的地理條件，水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)達，但魚塘農(nóng)藥投毒案件時有發(fā)生，給養(yǎng)殖戶造成巨大的經(jīng)濟損失。由于一般魚塘面積較大，水體中農(nóng)藥的濃度很低，這就給毒物的提取和檢驗帶來很多困難。本課題采用國產(chǎn)現(xiàn)場固相萃取裝置，選擇廣東省投毒案件常見的8種農(nóng)藥，建立了在魚塘投毒案件現(xiàn)場農(nóng)藥快速提取方法，實驗室采用高效液相三重四極質(zhì)譜聯(lián)用儀（LC-MS/MS）進行檢測。經(jīng)實驗驗證，甲胺磷、甲拌磷、樂果、殘殺威、呋喃丹、五氯酚、甲氰菊酯、氯氰菊酯的檢出限、線性等指標均滿足水體投毒案件的檢驗要求，本方法可以應用于魚塘水農(nóng)藥投毒案件的快速檢測工作。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

愛博能ABN-EXT-01 型水體農(nóng)藥投毒案件現(xiàn)場快速提取裝置，固相萃取柱采用Agilent Bond Elut Plexa 和 Agilent Bond Elut PPL 按 上 下順序串聯(lián)，用乙醇進行充分活化，以7.0mL/min流速上樣，單次提取時間約15min。

Agilent Technologies 1290-6470 三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)，SIGMA?3-18K 高速離心機，氮吹儀BF-2000。

8 種農(nóng)藥標準品（天津阿爾塔），濃度均為1000mg/mL 甲醇或丙酮溶液：甲胺磷、甲拌磷、樂果、殘殺威、呋喃丹、五氯酚、甲氰菊酯、氯氰菊酯。實驗用乙腈、甲酸、乙酸銨均為質(zhì)譜純，乙酸乙酯為分析純。

1.2 儀器條件

色譜條件：色譜柱EclipsePlus C18（1.8μm，3.0mm×150mm）色譜柱，柱溫40℃，進樣量1μL，流動相：0.1%甲酸+5mmol/L乙酸銨水溶液（A）-甲醇（B）-梯度洗脫（見表1），流速0.4mL/min。

表1 梯度洗脫條件

質(zhì)譜條件：采用電噴霧離子源（ESI），Dy?namic MRM（正、負）模式分析，9種農(nóng)藥的優(yōu)化采集參數(shù)（見表2）。

表2 8種農(nóng)藥的MRM條件

1.3 樣品制備

在空白魚塘水中添加8 種農(nóng)藥標準品，配制成甲胺磷、樂果、呋喃丹、殘殺威濃度為0.1ng/mL，甲拌磷、氯氰菊酯、甲氰菊酯、五氯酚濃度為1ng/mL的待測水樣。

1.4 現(xiàn)場水樣采集

應用現(xiàn)場快速提取裝置采集標準添加的水樣。取樣結(jié)束后，將固相萃取柱取下，兩端密封送驗。

1.5 實驗樣品處理

現(xiàn)場提取的固相萃取柱，先脫水干燥，用5mL 乙酸乙酯通過固相萃取柱洗脫，洗脫液在45℃室溫下用氮氣將洗脫液吹至近干，再用甲醇定容至1000mL備檢。

2 結(jié)果和討論

2.1 待測農(nóng)藥及質(zhì)譜監(jiān)測離子的選擇

根據(jù)全省投毒案件毒物統(tǒng)計情況，選擇四大類（有機磷、氨基甲酸酯、菊酯、有機氯）常見的8種農(nóng)藥建立LC-MS/MS檢測方法。

2.2 線性方程和檢出限

在空白魚塘水中加入8 種農(nóng)藥的系列濃度標準溶液，按1.4和1.5的方法進行樣品前處理。在選定的色譜和質(zhì)譜條件下測定，以目標農(nóng)藥的濃度為橫坐標，以定量離子對的峰面積為縱坐標建立標準曲線，得到8 種農(nóng)藥的線性方程、相關系數(shù)和檢出限，結(jié)果（見表3）。所有農(nóng)藥的相關系數(shù)都在0.99 以上，線性關系良好，檢出限在 0.0001～0.01ng/mL （S/N=3） 范圍內(nèi)。本方法五氯酚、樂果、甲胺磷、呋喃丹的檢出限遠遠低于GB11607—1989《漁業(yè)水質(zhì)標準》規(guī)定（該標準規(guī)定漁業(yè)水質(zhì)要求：五氯酚鈉≤10ng/mL，樂果≤100ng/mL，甲胺磷≤1000ng/mL，呋喃丹￡10ng/mL）［1］。

2.3 案列應用

2020 年 7 月 24 日，羅 定市羅 平鎮(zhèn)陳 XX 魚塘養(yǎng)殖的蝦大量死亡，辦案民警使用愛博能ABN-EXT-01 型裝置在現(xiàn)場兩處不同的地點提取魚塘水，兩份固相萃取柱密封保存1 天后送檢，均檢出農(nóng)藥甲氰菊酯成分。

表3 8種農(nóng)藥的線性范圍、回歸方程和檢出限