江倉礦區(qū)高加索三葉草引種試驗(yàn)

賈 萍，牟 丹，陳善晶，曾 心，王 娟，謝久祥，歐為友

(1.青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院，青海 西寧 810016；2.青海省草原總站，青海 西寧 810008)

青海省木里江倉礦區(qū)位于青海省海西州天峻縣和海北州剛察縣境內(nèi)，是青海省最大的煤礦，也是優(yōu)質(zhì)焦煤和可燃冰資源整裝勘查礦區(qū)。江倉礦區(qū)的植被類型以天然高寒草地和濕地為主，畜牧業(yè)是當(dāng)?shù)氐闹鲗?dǎo)產(chǎn)業(yè)，是青海省發(fā)展牧業(yè)生產(chǎn)自然環(huán)境條件較好地區(qū)之一[1]。近年來隨著國(guó)民經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，該地區(qū)地下儲(chǔ)存的煤炭資源遭到掠奪式、粗放型開發(fā)，導(dǎo)致當(dāng)?shù)氐脑脖辉獾絿?yán)重破壞，加劇惡化了當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)環(huán)境，同時(shí)也讓被譽(yù)為“中華水塔”的青藏高原寶貴的濕地資源流失，這與國(guó)家近年來提出的“綠水青山就是金山銀山”的生態(tài)文明建設(shè)不符。2014年以來國(guó)家和青海省政府加大資金扶持力度，對(duì)該地區(qū)的露天煤礦區(qū)進(jìn)行大規(guī)模的渣山植被恢復(fù)，已經(jīng)得到了初步成效。高寒礦區(qū)海拔高，年積溫低，極端的生態(tài)環(huán)境對(duì)于植物的生長(zhǎng)極為不利，目前有關(guān)礦區(qū)渣山植被恢復(fù)的研究報(bào)道較少[2]。

在2014年至2021年進(jìn)行的對(duì)青海木里和江倉煤田渣山進(jìn)行的植被修復(fù)中，所使用的草種為同德短芒披堿草(Elymusnutans)、青海草地早熟禾(Poapratensis)、青海冷地早熟禾(Poacrymophila)和青海中華羊茅(Festucasinensis)等4種禾本科牧草[3]。以垂穗披堿草、冷地早熟禾、中華羊茅等禾本科牧草為主的多年生人工草地具有1年建植多年受益的特點(diǎn)，是青藏高原主要的多年生人工草地推廣栽培方式。但是，生產(chǎn)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，這種草地普遍存在建植3～5年后急速退化的現(xiàn)象[4～8]，成為進(jìn)一步示范推廣的嚴(yán)重障礙。建植人工草地是恢復(fù)“黑土灘”草地的重要措施，但是由于管理和利用不當(dāng)，3～5年后再次成為“黑土灘”[9]。原因在于垂穗披堿草等人工引進(jìn)牧草，極大的消耗了土壤肥力，人工草地在退化后并沒有改善“黑土灘”的土壤質(zhì)量，可能造成“黑土灘”二次發(fā)生[9，10]。改建黑土灘所用草種單一，也是引起黑土灘人工草地退化的原因之一。多年生人工草地建植和管理中，豆禾混播是最理想的組合[11]。不過，青藏高原高寒牧區(qū)適宜栽培的豆科牧草極度缺乏[12]，外來草種的引進(jìn)又難以成功[13]。

近20年來，科學(xué)家在青海高寒地區(qū)進(jìn)行了大量的豆科牧草引種試驗(yàn)，在海拔2500 ～3000 m的地區(qū)，引種成功的報(bào)道很多，如紫花苜蓿[14～17]、截形苜蓿和波斯三葉草[18]、黃花草木樨[11]、紅豆草和甘農(nóng)1號(hào)雜花苜蓿[19]等；在海拔3000～3300 m的地方，引種成功的報(bào)道很少，如甘肅紅豆草和甘農(nóng)1號(hào)雜花苜蓿[19，20]，青大1號(hào)紫花苜蓿(王曉勇等，2012)；在海拔3300 m以上的地方，雖有幾次嘗試，均以失敗告終。2015年以來，青海大學(xué)在河南縣柯生鄉(xiāng)和優(yōu)干寧鎮(zhèn)海拔3600～3700 m的高寒草地引種高加索三葉草，發(fā)現(xiàn)其可在當(dāng)?shù)爻晒υ蕉⒁揽康叵虑o實(shí)現(xiàn)擴(kuò)繁而多年存活[21]。本研究中，我們將高加索三葉草引種到江倉礦區(qū)，并觀察其越冬和擴(kuò)繁情況，為高寒礦區(qū)植被恢復(fù)過程中的草種選擇提供參考依據(jù)。

1 研究區(qū)概況與試驗(yàn)材料

1.1 研究區(qū)概況

青海木里江倉礦區(qū)地處青藏高原東北端的祁連山中段南部地區(qū)，是大通河的上游盆地，因此該地區(qū)露天煤礦的開采嚴(yán)重影響大通河(湟水重要支流)的水質(zhì)。該地區(qū)年最高氣溫為19.8 ℃，最低氣溫可達(dá)-34 ℃，年平均氣溫為-4.2～-5.1 ℃。年平均降水量為314 mm，蒸發(fā)量為1 418 mm，降雨主要集中在7～9月，降雪集中在1～5月。礦區(qū)四季多風(fēng)，夏季盛行東南風(fēng)，冬季盛行西北風(fēng)。礦區(qū)海拔高度為3800～4000 m ，屬于高寒草甸低位沼澤濕地，地勢(shì)起伏不大，多年凍土發(fā)育，地表凍融草沼、熱融湖沼、凍脹丘等地貌形態(tài)發(fā)育。礦區(qū)天然高寒草甸和濕地保存完好，土壤肥沃，植被密度很大，植物種類較多，是青海省東北部較大的天然生態(tài)保障屏障。植被構(gòu)成以寒冷中生、短根莖的嵩草屬植物為主，具有植株低矮密叢、貼地面生長(zhǎng)等耐寒特征，層次分化不明顯，主要優(yōu)勢(shì)種有高山嵩草(Kobresiapygmaea)、線葉嵩草(Kobresiacapillifolia)、矮生嵩草(Kobresiahumilis)、垂穗披堿草(ElymusnutansHriseb.)等。

1.2 試驗(yàn)材料

2015年，新西蘭林肯大學(xué)James Moir教授將高加索三葉草引種到江倉礦區(qū)，受鼠害破壞后，我們將殘留的部分植株于2018年5月移栽至西寧市城北區(qū)。2018年，由于種苗不夠，我們從內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)王明玖教授處采集了高加索三葉草育成品種“蒙農(nóng)三葉草1號(hào)”(TrifoliumambiguumBieb. cv. Mengnong No.1)的種子和地下根莖，取50株移栽至江倉礦區(qū)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 試驗(yàn)材料種植 2019年6月，將“蒙農(nóng)三葉草1號(hào)” 高加索三葉草根莖移栽至江倉礦區(qū)試驗(yàn)地，進(jìn)行單株移栽試驗(yàn)。小區(qū)移栽時(shí)，行距30 cm，株距30 cm。本研究用于引種觀測(cè)的高加索三葉草種植年限為2019年至2021年。

1.3.2 引種表現(xiàn)觀測(cè) 觀測(cè)引種后的高加索三葉草的生長(zhǎng)表現(xiàn)，如物候期、長(zhǎng)勢(shì)、生物量、種子產(chǎn)量和結(jié)瘤情況等指標(biāo)。

(1)越冬率：隨機(jī)挑選3個(gè)小區(qū)，分別計(jì)數(shù)越冬前后植株數(shù)，并計(jì)算越冬后(即返青期)與越冬前(即凍萎期)的比值。

(2)物候期：分為返青期、分枝期、現(xiàn)蕾期、開花期、結(jié)莢期和成熟期，均以50%植株進(jìn)入該物候期計(jì)。

(3)冠幅：指高加索三葉草植株的在南北和東西方向?qū)挾鹊钠骄担糜诒硎酒渲仓甑拇笮　?/p>

(4)株高測(cè)定：當(dāng)高加索三葉草進(jìn)入盛花期時(shí)，隨機(jī)選6株測(cè)定株高(包括自然高度和絕對(duì)高度)。

(5)分蘗數(shù)：隨機(jī)選取6株并計(jì)數(shù)，早春以從根頸處萌出嫩芽數(shù)為準(zhǔn)，盛花期以從地面長(zhǎng)出枝條數(shù)為準(zhǔn)。

(6)地上莖直徑：用游標(biāo)卡尺量取地上莖直徑，隨機(jī)量取6株，每株3枝。

(7)地上生物量鮮重：在高加索三葉草盛花期，隨機(jī)挑選3個(gè)小區(qū)，在各小區(qū)內(nèi)隨機(jī)選取1株或1個(gè)1 m×1 m樣方，齊地面刈割，稱鮮重，分別記為單株地上生物量鮮重和單位面積地上生物量鮮重。

(8)地上生物量干重：獲取地上生物量后烘干至恒重，即得干重。

(9)鮮干比：鮮重與干重的比值，即單株鮮干比=單株地上生物量鮮重/單株地上生物量干重；單位面積鮮干比=單位面積地上生物量鮮重/單位面積地上生物量干重。

(10)地下生物量干重：在高加索三葉草盛花期，隨機(jī)挑選3個(gè)小區(qū)，在各小區(qū)內(nèi)隨機(jī)選取1個(gè)1 m×1 m樣方，采挖地下部分，洗凈，烘干至恒重。

(11)葉量比：指牧草或飼料作物在植物構(gòu)成中，葉占地上生物量的比重。隨機(jī)挑選6 株，齊地面刈割后，分離葉片，風(fēng)干后分別稱取葉重和總重，計(jì)算葉與總重的比值。操作時(shí)將葉柄、嫩稍均計(jì)入葉中。

(12)根莖情況：隨機(jī)挖出6株，記錄軸根數(shù)、側(cè)根數(shù)、根莖數(shù)，量取每株側(cè)根長(zhǎng)、軸根長(zhǎng)、根莖長(zhǎng)、根莖直徑，將地下部分洗凈后，稱取鮮重、干重。

(13)根瘤發(fā)育情況：隨機(jī)挖出6株，觀察根瘤的顏色，計(jì)數(shù)每株根瘤數(shù)，每取50粒稱取根瘤鮮重，三次重復(fù)，烘干后分別稱其干重。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用Excel 2016整理數(shù)據(jù)與繪制圖形，采用SPSS 20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，三年間平均值差異顯著性檢驗(yàn)用單因素方差分析方法。

2 結(jié)果與分析

表1 江倉礦區(qū)引種高加索三葉草的物候期

2.1 物候期觀測(cè)

引種當(dāng)年，高加索三葉草在江倉礦區(qū)不能開花，綠期129 d；引種第三年，高加索三葉草在江倉礦區(qū)不能開花，綠期164 d；引種次年，高加索三葉草少部分植株開花，但種子仍不能成熟，綠期165 d。

2.2 越冬率與無性繁殖情況觀測(cè)

表2 江倉礦區(qū)高加索三葉草引種前三年表現(xiàn)

續(xù)表：

在高寒地區(qū)，影響高加索三葉草存活的主要因素為越冬困難。為此，我們測(cè)定了高加索三葉草在江倉礦區(qū)的越冬率。高加索三葉草以根莖發(fā)達(dá)著稱，我們測(cè)定了根莖情況，包括根莖數(shù)、根莖長(zhǎng)、根莖粗等指標(biāo)。不論在引種當(dāng)年，還是在引種第二和第三年，高加索三葉草的在江倉的越冬率均在93%以上，各年份之間差異不顯著(表2，P>0.05)。說明高原冬季低溫、干旱和強(qiáng)風(fēng)對(duì)其很小影響，原因在于高加索三葉草地下根莖發(fā)達(dá)，地下根莖出芽點(diǎn)埋藏在地下3～4 cm深度。此外，試驗(yàn)地經(jīng)過鼠害防控處理，免遭害鼠破壞，僅有幾株死亡，也是由于偶發(fā)害鼠破壞引起的。根莖數(shù)隨著引種年份的增加而顯著增加，幾乎呈直線增加趨勢(shì)，引種各年份之間差異極顯著(表2，P<0.01)。說明高加索三葉草在江倉礦區(qū)能穩(wěn)定形成地下根莖，這對(duì)于高加索三葉草的無性繁殖具有重要意義。引種第一年，高加索三葉草在江倉礦區(qū)的根莖長(zhǎng)度為6.61±3.10 cm，在引種第二和第三年，高加索三葉草的根莖長(zhǎng)均達(dá)到10 cm以上，三年之間差異不顯著(表2，P>0.05)，說明高加索三葉草不僅地下根莖發(fā)達(dá)，而且地下根莖的長(zhǎng)度在引種第二年后顯著增加，第二年和第三年后長(zhǎng)度在10 cm以上。高加索三葉草引種到江倉礦區(qū)的高加索三葉草的根莖直徑在各年份之間差異不顯著(表2，P>0.05)。根莖粗度發(fā)育良好，為其進(jìn)一步形成的地下出芽點(diǎn)打下基礎(chǔ)，有利于形成分蘗。

2.3 株形特征觀測(cè)

高加索三葉草的冠幅在移栽后的三年之間差異極顯著(表2，P<0.01)，其冠幅依次為7.81±1.17 cm、13.40±2.61 cm、23.67±3.47 cm，年增長(zhǎng)率約為200%，說明高加索三葉草憑借其地下根莖，能在江倉礦區(qū)快速擴(kuò)繁，占領(lǐng)領(lǐng)地，形成植被。

移栽后的三年中，高加索三葉草的分蘗數(shù)在各年份之間差異顯著(表2，P<0.05)，移栽后的三年中，江倉礦區(qū)高加索三葉草的分蘗數(shù)逐年增加，形成了龐大的地下根系和根莖系統(tǒng)，儲(chǔ)存了大量有機(jī)物，為分蘗的形成和返青做好了物質(zhì)準(zhǔn)備。

高加索三葉草的自然高度在三年之間差異顯著(表2，P<0.05)，第一年和第二年的自然高度平均值在5.39～9.85 cm之間，均貼地生長(zhǎng)形成墊狀植物，沒有地上莖的形成；至第三年，由于有少量花序形成，地上莖長(zhǎng)度達(dá)到11.59 cm左右，顯著高于前兩年。

高加索三葉草的絕對(duì)高度在三年之間差異顯著(表2，P<0.05)，第一年和第二年的絕對(duì)高度平均值在6.53～9.57 cm之間，均貼地生長(zhǎng)形成墊狀植物，沒有地上莖的形成；至第三年，由于有少量花序形成，地上莖長(zhǎng)度達(dá)到12.06 cm左右，顯著高于前兩年。

移栽后的三年中，江倉礦區(qū)高加索三葉草的地上莖直徑存在極顯著差異(表2，P<0.01)。原因在于，高加索三葉草至第三年才發(fā)育出了地上莖，第一年和第二年沒有地上莖的形成。第三年地上莖直徑為3.5 mm左右。

高加索三葉草雖然以根莖型植物著稱，但仍具有軸根。實(shí)生苗具有軸根，而移栽苗在移栽成功后也會(huì)逐漸生長(zhǎng)出軸根。軸根不僅提高其固著力，而且能幫助其吸收深層土壤水分和養(yǎng)分。移栽后的三年間，高加索三葉草的軸根數(shù)差異極顯著(表2，P<0.01)，三年的軸根數(shù)平均值分別為0.26±0.03根/株、1.41±0.05根/株、2.80±0.10根/株。移栽后的第一年，江倉礦區(qū)的高加索三葉草幾乎不能形成軸根，第二年至第三年，高加索三葉草的軸根數(shù)顯著增加，多者達(dá)到3根。

移栽后的第一至第三年，高加索三葉草的軸根長(zhǎng)平均值分別為3.39±0.68 cm、14.67±1.68 cm、20.35±3.43 cm，說明高加索三葉草的軸根長(zhǎng)度在三年內(nèi)保持了很強(qiáng)的增長(zhǎng)態(tài)勢(shì)。

移栽后的三年內(nèi)，高加索三葉草的側(cè)根數(shù)差異顯著(表2，P<0.05)，第一至第三年的側(cè)根數(shù)平均值分別為4.49±1.38根/株、8.94±1.13根/株、11.92±0.91根/株，說明高加索三葉草的側(cè)根數(shù)在三年內(nèi)保持了很強(qiáng)的增長(zhǎng)態(tài)勢(shì)。

移栽后的三年內(nèi)，高加索三葉草的側(cè)根長(zhǎng)差異顯著(表2，P<0.05)，第一至第三年的側(cè)根長(zhǎng)分別為6.66±2.27 cm、10.85±1.71 cm、15.61±2.25 cm，說明高加索三葉草的側(cè)根長(zhǎng)在三年內(nèi)保持了很強(qiáng)的增長(zhǎng)態(tài)勢(shì)。

2.4 單株飼草生產(chǎn)性能測(cè)定

移栽后的第一至第三年，高加索三葉草的單株地上生物量(干重)平均值分別為0.40±0.16 g/株、1.62±0.35 g/株、5.10±0.77 g/株，三年之間差異極顯著(表2，P<0.01)，說明高加索三葉草的單株地上生物量在三年內(nèi)保持了很強(qiáng)的增長(zhǎng)態(tài)勢(shì)。

移栽后的第一至第三年，高加索三葉草的單株地下生物量(干重)差異極顯著(表2，P<0.01)，其平均值分別為1.23±0.14 g/株、2.57±0.45 g/株、7.51±0.82 g/株，說明高加索三葉草的單株地下生物量在三年內(nèi)保持了很強(qiáng)的增長(zhǎng)態(tài)勢(shì)。

移栽后的第一至第三年，高加索三葉草的鮮干比沒有顯著性差異(表2，P>0.05)，均維持在4.05左右，說明高加索三葉草的鮮干比總體穩(wěn)定。

移栽后的第一至第三年，高加索三葉草的葉量比差異不顯著(表2，P>0.05)，三年的葉量比平均值分別為94.11±0.57%、93.98±1.17%、91.14±0.61%，原因在于三年之內(nèi)，高加索三葉草在江倉礦區(qū)均為墊狀植物，前兩年沒有生殖枝的形成，至第三年才有少量生殖枝形成。

2.5 結(jié)瘤性能觀測(cè)

移栽后的第一至第三年，高加索三葉草的每株根瘤數(shù)差異極顯著(表2，P<0.01)，每株根瘤數(shù)平均值分別為36.42±4.85個(gè)/株，82.64±6.93個(gè)/株、115.49±11.13個(gè)/株，說明在移栽到江倉礦區(qū)之后，高加索三葉草的根瘤發(fā)育隨著地下生物量的增長(zhǎng)而增長(zhǎng)，結(jié)瘤能力基本穩(wěn)定，根瘤數(shù)目顯著增長(zhǎng)。

移栽后的第一至第三年，高加索三葉草的絕大部分(>90%)根瘤均為淡紅色，掐開后斷面呈粉紅色，高加索三葉草的根瘤鮮重差異不顯著(表2，P>0.05)，均維持在0.32 g/50粒左右，其根瘤干重也無顯著差異(表2，P>0.05)，均維持在0.12 g/50粒左右。

3 討論

引種到江倉礦區(qū)后，高加索三葉草在第一年和第二年不能開花，在引種后的第三年才能少量開花，但種子不能成熟。不過，憑借強(qiáng)大的根孽和地下根莖擴(kuò)繁能力，高加索三葉草在江倉礦區(qū)可實(shí)現(xiàn)無性擴(kuò)繁，這也在一定程度上說明，高加索三葉草在江倉礦區(qū)的引種試驗(yàn)是成功的。

3.1 高加索三葉草在青海各地引種的生育期和綠期

據(jù)殷秀杰[22]在內(nèi)蒙多地的引種報(bào)道，高加索三葉草生育期較短，綠期長(zhǎng)。高加索三葉草引種到江倉礦區(qū)后，返青比當(dāng)?shù)啬敛菰缂s10 d，枯黃晚約10 d，總綠期比當(dāng)?shù)啬敛蓍L(zhǎng)約20 d。在如此漫長(zhǎng)的綠期內(nèi)，高加索三葉草在江倉礦區(qū)不能實(shí)現(xiàn)種子成熟的原因，在于積溫不夠。為此，如果在開花前對(duì)其進(jìn)行覆膜處理，增加積溫，形成花蕾后去掉薄膜，任由當(dāng)?shù)乩ハx傳粉，應(yīng)當(dāng)可以實(shí)現(xiàn)結(jié)實(shí)和成熟，具體情況有待進(jìn)一步研究。在江倉礦區(qū)，高加索三葉草的綠期長(zhǎng)于當(dāng)?shù)氐臒o霜期，另外，據(jù)牟丹[21]報(bào)道，高加索三葉草引種到西寧市城北區(qū)后，綠期為249 d，無霜期為100 d，綠期比無霜期長(zhǎng)149 d；引種到西寧市湟中區(qū)后，綠期為216 d，無霜期為91 d，綠期比無霜期長(zhǎng)125 d；在河南縣，綠期為166 d，無絕對(duì)無霜期，可以認(rèn)為綠期比無霜期長(zhǎng)166 d?？梢哉J(rèn)為，高加索三葉草在較長(zhǎng)時(shí)間的霜期內(nèi)，可以正常生長(zhǎng)，保持綠色，其抗霜凍能力較強(qiáng)，對(duì)于青藏高原植被修復(fù)具有重要意義。

3.2 高加索三葉草在江倉礦區(qū)的生長(zhǎng)特性和無性繁殖特性

高加索三葉草在江倉礦區(qū)的引種過程中，引種第三年才有少部分植株開花，種子不能成熟。借助其根孽和地下根莖的擴(kuò)張優(yōu)勢(shì)，其冠幅每年可擴(kuò)張10 cm以上。引種后三年內(nèi)，高加索三葉草的冠幅、分蘗數(shù)、根莖數(shù)、地上生物量、地下生物量、軸根數(shù)、軸根長(zhǎng)、軸根直徑、側(cè)根數(shù)、側(cè)根長(zhǎng)等表征其生長(zhǎng)特性和無性繁殖特性的指標(biāo)均顯著增長(zhǎng)。絕對(duì)高度、自然高度、地上莖直徑、根莖直徑、鮮干比和葉量比等指標(biāo)三年內(nèi)差異不顯著，保持穩(wěn)定，說明引種到江倉礦區(qū)的三年內(nèi)，高加索三葉草在植株生長(zhǎng)特性、無性繁殖等方面均表現(xiàn)良好，適合于在江倉礦區(qū)引種、擴(kuò)繁。

牧草產(chǎn)量方面，移栽后的第一至第三年，高加索三葉草的單株地上生物量和地下生物量均極顯著增長(zhǎng)，但因?yàn)橐圃灾陻?shù)只有50株，種植面積過小，本研究無法計(jì)算高加索三葉草在江倉地區(qū)的單位面積牧草產(chǎn)量和地下干物質(zhì)產(chǎn)量。張玉發(fā)[23]在北京引種高加索三葉草后，在種植的第二年測(cè)得，畝產(chǎn)干草273.9 kg，這相當(dāng)于牟丹[21]在西寧市城北區(qū)引種后測(cè)得的第一年的畝產(chǎn)干草產(chǎn)量(280.05 kg)。據(jù)報(bào)道，高加索三葉草的地上生物量從第二年開始增加，在7～8 年達(dá)到高峰[24]。估計(jì)在后續(xù)年份，引種在江倉礦區(qū)高加索三葉草的地上和地下產(chǎn)量會(huì)有更好的表現(xiàn)。據(jù)Strachan et al.報(bào)道[25]，在種植第13年時(shí)，高加索三葉草的地下生物量為20 t/hm2，磷、氮和硫的含量分別達(dá)58 kg/hm2、455 kg/hm2和20 kg/hm2，以及數(shù)量更龐大的碳水化合物。由此看來，如果在青藏高原擴(kuò)大高加索三葉草的種植范圍，既可通過生物固氮改良草地，對(duì)實(shí)現(xiàn)碳達(dá)峰和碳中和也具有重要的意義。

3.3 高加索三葉草在青海各地的結(jié)瘤性能

一般認(rèn)為，高加索三葉草不能形成根瘤進(jìn)行生物固氮，這成為限制其引種的主要擔(dān)憂之一[26]。以往的做法是通過專一根瘤菌接種形成根瘤，或通過和其他三葉草雜交育種，使其具備固氮能力[27]；或與其他豆科牧草混播后，進(jìn)行氮替換。引種到國(guó)內(nèi)后，高加索三葉草在赤峰和呼和浩特等地的結(jié)瘤很少[22]。但是，據(jù)牟丹的研究[21]，引種到西寧市城北區(qū)、湟中區(qū)和河南縣之后，高加索三葉草的結(jié)瘤均十分豐富。本研究中，引種到江倉礦區(qū)后，第一年和第二年的株均根瘤數(shù)分別約為36.42±4.85個(gè)和82.64±6.93個(gè)，至第三年達(dá)到115.49±11.13個(gè)，結(jié)瘤量十分豐富。三年的根瘤數(shù)大體與地下生物量成正比，不存在不結(jié)瘤的植株。另外，根瘤洗凈后成淡粉色，在破開后為粉紅色，均為有效根瘤。因此，引種高加索三葉草，對(duì)于青藏高原高寒草地的固氮具有重要意義。