酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)與核酸檢測在降低無償獻(xiàn)血血液乙肝檢測陽性漏檢的作用

趙麗津　鄧小井

摘要：目的：分析酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)與核酸檢測在降低無償獻(xiàn)血血液乙肝檢測陽性漏檢的作用。

方法：選取我站2021年1月--12月份檢測的60311份無償獻(xiàn)血血液標(biāo)本，利用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測所有標(biāo)本中的HBsAg，同時(shí)利用核酸檢測技術(shù)檢測血液標(biāo)本中的HBV--DNA，觀察兩種檢測技術(shù)在其中的陽性率。

結(jié)果：酶聯(lián)免疫吸附法雙試劑檢測HBsAg，陽性率0.58%（348/60311），一檢試劑雙孔檢測HBsAg陽性率0.04%（22/60311），二檢試劑雙孔檢測HBsAg陽性率0.05%（34/60311），雙試劑檢測HBsAg陽性率占總陽性率的86.14%（348/404）。如下表一。

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELASA法）檢測HBsAg陽性率0.67%（404/60311），核酸檢測HBV陽性率0.09%（53/59907），酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELASA法）檢測HBsAg陽性率占總陽性率88.4%（404/457），核酸檢測HBV陽性率占總陽性率11.6%（53/457）。如下表二。

關(guān)鍵字：雙試劑檢測HBsAg??? 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、核酸檢測?? 漏檢率

1.資料和方法

1.1資料

選取我站于2021年1月--12月份檢測的60311份無償獻(xiàn)血血液標(biāo)本

1.2試劑與儀器

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELASA法）檢測的試劑廠家一檢試劑為北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司，二檢試劑為DiaSorin? S.P.A -UK Branch（雅培），酶免檢測系統(tǒng)為Uranus? AE180全自動(dòng)酶免儀/FAME全自動(dòng)酶免疫，核酸檢測試劑廠家為中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司 /蘇州華益美科技有限公司，核酸檢測系統(tǒng)采用PCR--熒光法的中山大學(xué)達(dá)安核酸系統(tǒng)/華益美核酸系統(tǒng)。

1.3方法

利用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELASA法）檢測血液標(biāo)本，如果一、二檢兩種試劑均為反應(yīng)性或其中一種試劑為反應(yīng)性再使用該試劑進(jìn)行雙孔復(fù)檢依然為反應(yīng)性則HBsAg陽性，結(jié)果判為不合格，直接淘汰。雙試劑檢測為陰性結(jié)果繼續(xù)進(jìn)行核酸實(shí)驗(yàn)，混檢標(biāo)本為陽性時(shí)則對混檢標(biāo)本進(jìn)行拆分檢測，單檢結(jié)果為陽性時(shí)判為不合格。

1.31觀察指標(biāo)

觀察酶聯(lián)免疫吸附法兩種試劑檢測HBsAg陽性率。如：表一

觀察兩種檢測方法檢測乙肝陽性率。如：表二

2.結(jié)果：

本次共檢測60311份無償獻(xiàn)血血液標(biāo)本，血清學(xué)檢測的標(biāo)本有60311份，HBsAg陽性率為0.67%（404/60311），核酸檢測的標(biāo)本有59907份，乙肝陽性率0.09%（53/59907），將兩種檢測方法的陽性率進(jìn)行對比，檢測的總陽性標(biāo)本為457份，其中ELAS法檢測陽性率為88.4%（404/457），有11.6%（53/457）的陽性率依靠核酸檢測。將ELASA法檢測的兩種試劑檢測的陽性率進(jìn)行對比發(fā)現(xiàn)雙試劑檢測的陽性率占比高（86.14%），對無償獻(xiàn)血血液標(biāo)本的血液檢測用兩個(gè)不同廠家的試劑進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELASA法）檢測和一次核酸檢測，能夠降低檢測陽性結(jié)果的漏檢率。

3.討論：

乙型肝炎病毒（HBV）是血清型肝炎的病原體，是一種包膜DNA病毒。感染期間，HBV產(chǎn)生過量的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg），它可以在受感染個(gè)體的血液標(biāo)本中被檢測出來。HBsAg是HBV感染后產(chǎn)生的第一個(gè)血清學(xué)標(biāo)志物，HBsAg是威脅輸血安全的主要傳染性病原體，酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELASA法）使用雙試劑同時(shí)檢測可以大大提高檢測的陽性率，單用一種試劑檢測出現(xiàn)陽性率還需再進(jìn)行雙孔復(fù)檢，增加了人力和物力的成本，雖然血清學(xué)分析靈敏度的提高使HBV經(jīng)輸血傳播的危險(xiǎn)性大為減少，但“窗口期”的存在仍然是漏檢的原因之一，對于獻(xiàn)血者的篩選，單純的血清學(xué)檢測不能有效地保障血液安全，核酸檢測庫有效的縮短“窗口期”，還可以檢出因病毒變異，免疫靜默感染以及人工操作錯(cuò)誤而漏檢的被感染的獻(xiàn)血。對無償獻(xiàn)血血液標(biāo)本的血液檢測用兩個(gè)不同廠家的試劑進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELASA法）檢測和一次核酸檢測，能夠降低檢測陽性結(jié)果的漏檢率，使輸血傳播疾病的危險(xiǎn)性降到最低。

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