不規(guī)則抗體和冷凝聚素引起血型鑒定和配血困難1例

馬祥斌　張汾　邢杰　石秋

摘要：目的：探討在臨床輸血中疑難血型鑒定及相容配血困難的解決方法。方法：通過臨床病例分析，紅細胞ABO正反血型鑒定，吸收試驗、放散試驗、不規(guī)則抗體篩查、直接抗人球蛋白試驗，凝聚胺法、抗人球蛋白卡法交叉配血，正確鑒定ABO血型和交叉配血。結(jié)果：冷凝聚素和不規(guī)則抗體的存在，給臨床血型確定和交叉配血帶來很大的難度。結(jié)論：在臨床輸血中，患者體內(nèi)的冷凝聚素增多可引起ABO血型鑒定正反不符，不規(guī)則抗體引起交叉配血困難，特別是ABO不完全抗體，嚴重干擾輸血相容配合和輸血安全;對于疑難血型鑒定標本，應有針對性選擇不同的方法加以驗證，以防誤報;對于不規(guī)則抗體篩查陽性的配血病人，應采用抗體篩查、放散吸附等處理措施，核實可能存在的不完全自身抗體，采用可靠地配血方法，相容性配合血液成分，確保臨床用血安全有效。

關(guān)鍵詞：冷凝聚素 不規(guī)則抗體 血型鑒定 相容性配血

冷凝聚素是自身抗體的一種，正常人血清中冷凝聚效價不超過1：16^〔1〕.在某些病理或特殊因素的誘導下，冷凝聚素的效價增高，導致血型鑒定困難;自身不規(guī)則血型抗體的存在，同樣導致ABO血型正反定型不符，同時也影響交叉配血。直接影響臨床輸血治療的及時性、有效性和輸血安全。現(xiàn)將我院1例含有冷凝聚素和不規(guī)則血型抗體患者的血型鑒定及輸血相容配血過程報告如下：

1.臨床病例資料

患者男性，77歲，農(nóng)民，漢族，既往無手術(shù)史、輸血史，因咳嗽、胸悶、喘累、氣促在社區(qū)治療四天（用藥不詳）無效，于2020年10月2日以“慢性阻塞性肺病并加重”收入呼吸與危重癥科，重度貧血，后轉(zhuǎn)入血液科治療。實驗室檢查見：HBG66.4g/L，RBC1.87*10¹²/L，尿隱血+，尿蛋白+，T-BILL42.7nmol/L，D-BILL16.7umol/L，I-BIL26umol/L，LDH896U/L，CPAb（IgM）+，血液抗凝呈沙粒狀，離心血漿為紅色。血型鑒定正反不符，正定型為B型，反定型為O型。懷疑患者血清中存在冷凝聚素或自身抗體。需進一步作血型血清學相關(guān)檢查。

2.血型血清學相關(guān)檢查

2.1試劑和儀器

2.1.1試劑 抗A抗B單克隆血清（上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司 批號20190101）反定型紅細胞（長春博迅生物技術(shù)有限公司批號20200721）ABO正反定型卡（北京九強生物技術(shù)股份有限公司批號GE0120191213）不規(guī)則抗體篩查紅細胞（長春博迅生物技術(shù)有限公司批號20200803）抗人球蛋白微柱凝膠卡（長春博迅生物技術(shù)有限公司批號20200606）凝聚胺試劑（珠海貝索生物技術(shù)有限公司批號119062）

2.1.2儀器 愛康A(chǔ)igel300，TDZ4-WS離心機，F(xiàn)YQ微柱孵育器 45°C恒溫水浴箱。

2.2血型鑒定 常規(guī)血型鑒定，離心抗凝標本，按Aigel300操作程序上機自動檢測判讀，發(fā)報結(jié)果。

2.3吸收試驗 取患者壓積紅細胞鹽水洗滌3次，洗滌后的壓積紅細胞分為三份，標識123號，1份加患者血清1ml，混勻置4°C冰箱1小時，不時震蕩，離心取血清加入2號壓積紅細胞管中，重復操作至3號管，得到的血清作反定型和配血主側(cè)用。試驗目的吸收自身抗體和冷凝聚素。

2.4放散試驗 壓積紅細胞洗滌6次，1：3比例配制紅細胞懸液，置45°C水浴箱30分鐘，不時振搖，離心取上清液（放散液），紅細胞作正定型和交叉配血次側(cè)用。實驗目的，去除紅細胞上吸附干擾物質(zhì)和致敏的不完全抗體。

2.5間接和直接抗人球蛋白試驗 用微柱凝膠抗人球蛋白卡，按操作說明執(zhí)行。

2.6輸血相容試驗 用凝聚胺法和抗人球蛋白卡法進行交叉配血試驗。

3.結(jié)果

3.1常規(guī)血型鑒定結(jié)果見表1，處理前正反定型不符，經(jīng)放散吸收處理后患者血型為B型。

3.2血型血清學實驗結(jié)果見表2.患者不規(guī)則抗體篩查陽性，直接抗人球蛋白陽性，血清中有高效價冷凝聚素，患者血清中含有抗B-IgG抗體。

3.3患者處理前和吸收放散處理后的樣本與B型、O型供血樣本用凝聚胺和抗人球蛋白卡法交叉配血都不相容。

4.討論

4.1冷凝聚素是人體內(nèi)產(chǎn)生的抗自身紅細胞的嗜異性冷抗體，抗體為IgM類，在體外室溫下可與自身紅細胞或ABO系統(tǒng)及其他血型紅細胞發(fā)生非特異性凝聚反應;一般健康人血清中含量少，凝集效價小于1：16，高效價冷凝聚素在某些病理情況下如自身免疫性貧血、腫瘤、細菌支原體感染、EB病毒感染等可誘導產(chǎn)生^〔2〕。

4.2不規(guī)則抗體是指不符合血型命名原則，抗A、抗B以外的血型抗體，抗體為IgG類，又稱為意外抗體，是引起輸血溶血反應的主要因素之一^〔3〕。不規(guī)則抗體的產(chǎn)生主要原因：機體免疫功能異常、惡性腫瘤、輸血、妊娠、燒傷、器官骨髓移植、細菌感染、藥物影響等，不規(guī)則抗體是引起機體自身溶血性貧血的主要原因。

4.3本例患者血清中有高效價冷凝聚素，致血液離體自凝，常規(guī)血型鑒定正反不符;不規(guī)則抗體陽性，直接抗人球蛋白陽性，紅細胞被抗B-IgG抗體致敏，引起患者自身溶血。

4.4有自凝現(xiàn)象的標本，進行血型鑒定和交叉配血時要高度警覺重視，必需進一步進行血型血清學試驗，利用吸收放散等方式，去除冷凝聚素或自身抗體等干擾因素^〔4〕，用不同的檢測方法，準確判斷患者血型，檢測出患者可能存在的意外抗體，選擇合適的配血方法，保證臨床輸血安全。

4.5本例患者血型為B型，不規(guī)則抗體陽性，直接抗人球蛋白陽性，患者血清中有抗B-IgG抗體，可判斷該患者為自身免疫溶血性貧血。與B型O型供血者用凝聚胺和抗人球蛋白卡法交叉配血都不相容。依據(jù)輸血安全原則，次患者不宜異體輸血。

參考文獻：

[1]劉景漢，蘭烔采.臨床輸血學〔M〕.人民衛(wèi)生出版社：2011.

[2]楊世明，張勇萍，潘小莉.冷凝聚素綜合征的血清學特征及檢測方法探討[J].細胞與分子免疫學雜志，2006，22（4）：54-543.

〔3〕王憬惺，嚴力行.輸血技術(shù)〔M〕.人民衛(wèi)生出版社，2013.

〔4〕任偉，陳慧欣，韓杰.ABO血型正反定型不一致原因分析及解決策略〔J〕.臨床血液學雜志，2016，29（4）：289-291.346D3776-91A6-4529-A8C4-F2612466EBF5