葉酸、同型半胱氨酸、血管內(nèi)皮生長因子、維生素B12在妊娠期高血壓疾病患者中的變化及意義

吳臘梅

（淮安市淮安區(qū)婦幼保健院圍產(chǎn)保健科，江蘇 淮安 223200）

妊娠期高血壓疾?。╤ypertensive disorders of pregnancy，HDP）是妊娠期特有的疾病，也是圍生兒、孕產(chǎn)婦死亡的重要原因之一，雖然目前臨床還尚不完全明確HDP的發(fā)病機(jī)理，但有研究指出，HDP的發(fā)生與血管內(nèi)皮細(xì)胞異常激活和損傷有關(guān)，而同型半胱氨酸（Hcy）會引起血管內(nèi)皮損傷，因此，被認(rèn)為是引起HDP的重要因素之一[1-2]。另有研究也指出，HDP患者機(jī)體內(nèi)葉酸（FA）與維生素B12（VitB12）攝入量不足與其血漿Hcy的含量具有一定關(guān)聯(lián)[3]。而在血管內(nèi)皮的修復(fù)過程中，血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）作為血管生長誘導(dǎo)因子，可通過促進(jìn)新血管生成和增加血管通透性，發(fā)揮明顯的修復(fù)作用[4]。故此，本研究回顧性分析了淮安市淮安區(qū)婦幼保健院于2020年1月至2021年1月收治的130例HDP患者的臨床資料，旨在探討HDP患者FA、Hcy、VEGF、VitB12的水平變化，并分析患者的妊娠結(jié)局，現(xiàn)將研究具體內(nèi)容報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料回顧性分析2020年1月至2021年1月淮安市淮安區(qū)婦幼保健院收治的130例HDP患者的臨床資料將其作為HDP組，依據(jù)疾病嚴(yán)重程度分為妊娠期高血壓組（69例）、輕度子癇前期組（37例）和重度子癇前期組（24例），同時(shí)收集43例同期進(jìn)行孕期健康體檢的正常孕婦的臨床資料作為健康對照組。健康對照組研究對象年齡20～40歲，平均（27.57±3.20）歲；孕周30～39周，平均（36.24±1.36）周。妊娠期高血壓組患者年齡22～40歲，平均（28.53±2.71）歲；孕周30～39周，平均（36.23±1.35）周。輕度子癇前期組患者年齡23～39歲，平均（28.27±2.88）歲；孕周30～39周，平均（36.22±1.33）周。重度子癇前期組患者年齡21～38歲，平均（27.93±3.01）歲；孕周30～39周，平均（36.22±1.34）周。4組研究對象一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），可進(jìn)行組間比較。納入標(biāo)準(zhǔn)：HDP組患者均符合《妊娠期高血壓疾病診治指南（2015）》[5]中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；妊娠期高血壓組：血壓≥ 140/90 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），且血壓在產(chǎn)后12周內(nèi)恢復(fù)正常，蛋白尿檢測陰性；輕度子癇前期組：血壓≥ 140/90 mmHg、蛋白尿≥ 0.3 g/24 h，或隨機(jī)蛋白尿（+），且伴有上腹不適、頭痛等癥狀者；重度子癇前期組：血壓≥ 160/110 mmHg、蛋白尿≥2.0 g/24 h，或隨機(jī)蛋白尿（++），且伴有持續(xù)性頭痛或其他腦神經(jīng)或視覺障礙者[6]；單胎妊娠者；入組前3周未服用任何影響該研究藥物者；孕早、中、晚期生化指標(biāo)及其他臨床資料完整者等。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他妊娠合并癥者；甲狀腺功能亢進(jìn)或甲狀腺功能減退者；嚴(yán)重心、肝、腎等功能障礙者等。本研究已經(jīng)院內(nèi)醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)。

1.2 研究方法采集4組研究對象清晨空腹?fàn)顟B(tài)下外周靜脈血5 mL，置入離心機(jī)中，以3 000 r/min的速度行10 min的離心處理，取上血清待檢，注意血清不可為溶血或脂濁標(biāo)本。使用全自動生化分析儀[日立高新技術(shù)(上海)國際貿(mào)易有限公司，型號：7080]采用循環(huán)酶法檢測血清Hcy水平，試劑盒由上海申能德賽診斷技術(shù)有限公司提供；分別使用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀、化學(xué)發(fā)光法檢測血清VitB12與FA水平，試劑盒由上海強(qiáng)生有限公司提供；使用酶標(biāo)儀采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法檢測血清VEGF水平，試劑由北京華英生物技術(shù)研究所提供。

1.3 觀察指標(biāo)①對比健康對照組及妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組4組研究對象血清FA、Hcy、VEGF、VitB12水平變化。②對比健康對照組與HDP組中不同孕周[孕早期（孕周≤ 12周）、孕中期（孕周13～27周）、孕晚期（孕28周至30周）]研究對象的FA、Hcy、VEGF、VitB12水平變化。③對比4組研究對象不良妊娠結(jié)局發(fā)生率，包括早產(chǎn)、新生兒出生低體質(zhì)量、圍生兒死亡、新生兒窒息、胎兒宮內(nèi)窘迫等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 24.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示，采用χ2檢驗(yàn)，多組間計(jì)數(shù)資料比較，采用χ2趨勢檢驗(yàn)；計(jì)量資料以(±s)表示，采用t檢驗(yàn)，多組間、多時(shí)間點(diǎn)計(jì)量資料比較采用單因素方差分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 FA、Hcy、VEGF、VitB12水平與健康對照組比較，HDP組患者血清FA、VEGF、VitB12水平均降低，血清Hcy水平均升高，且健康對照組、妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組4組研究對象血清FA、VEGF、VitB12水平均呈逐漸降低趨勢，血清Hcy水平均呈逐漸升高趨勢，且組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表1。

表1 4組研究對象FA、Hcy、VEGF、VitB12水平比較(?±s)

表1 4組研究對象FA、Hcy、VEGF、VitB12水平比較(?±s)

注：與健康對照組比，*P＜0.05；與妊娠期高血壓組比，#P＜0.05；與輕度子癇前期組比，△P＜0.05。FA：葉酸；Hcy：同型半胱氨酸；VEGF：血管內(nèi)皮生長因子；VitB12：維生素B12。

組別 例數(shù) FA(nmol/L) Hcy(μmol/L) VEGF(pg/mL) VitB12(pmol/L)健康對照組 43 26.44±5.20 10.61±3.37 135.32±23.46 338.86±76.80妊娠期高血壓組 69 19.29±4.31* 18.50±3.13* 117.60±27.51* 233.82±42.62*輕度子癇前期組 37 15.37±2.30*# 23.42±3.75*# 101.90±25.24*# 201.26±32.41*#重度子癇前期組 24 13.18±2.07*#△ 28.55±4.65*#△ 82.13±31.52*#△ 169.64±23.61*#△F值 76.737 156.287 23.505 79.366 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 HDP組患者不同孕周血清FA、VitB12、VEGF、Hcy水平從孕早期至孕晚期，健康對照組研究對象血清FA、Hcy、VEGF、VitB12各指標(biāo)無較大變化，組內(nèi)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）；從孕早期至孕晚期，HDP組患者血清FA、VEGF均呈逐漸降低趨勢，血清Hcy呈逐漸升高趨勢，血清VitB12呈先升高后降低趨勢，且HDP組患者各孕期的血清FA、VEGF、VitB12水平均顯著低于健康對照組，血清Hcy均顯著高于健康對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表2。

表2 HDP組患者不同孕期FA、Hcy、VEGF、VitB12水平比較(?±s)

表2 HDP組患者不同孕期FA、Hcy、VEGF、VitB12水平比較(?±s)

注：與孕早期比，▲P＜0.05；與孕中期比，□P＜0.05。HDP：妊娠期高血壓疾病。

FA(nmol/L) Hcy(μmol/L)孕早期 孕中期 孕晚期 孕早期 孕中期 孕晚期健康對照組 43 26.53±4.67 26.13±4.72 26.22±4.79 10.63±1.11 10.49±1.21 10.59±1.09 HDP組 130 23.24±4.58 19.15±4.01▲ 17.94±3.90▲□ 14.77±2.08 18.47±3.26▲ 21.25±4.03▲□t值 4.064 9.457 11.379 12.461 15.673 17.109 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05組別 例數(shù)VEGF(pg/mL) VitB12(pmol/L)孕早期 孕中期 孕晚期 孕早期 孕中期 孕晚期健康對照組 43 136.71±25.79 141.83±27.43 134.51±26.41 337.14±22.53 340.23±21.47 335.41±36.51 HDP 組 130 126.86±28.88 116.98±25.89▲ 110.97±20.23▲□ 222.54±49.86 257.29±41.86▲ 239.78±29.65▲□t值 1.989 5.376 6.107 14.566 12.445 17.271 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05組別 例數(shù)

2.3 不良妊娠結(jié)局重度子癇前期組患者不良妊娠結(jié)局總發(fā)生率顯著高于妊娠期高血壓組、健康對照組，輕度子癇前期組患者不良妊娠結(jié)局總發(fā)生率顯著高于健康對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表3。

表3 4組研究對象不良妊娠結(jié)局發(fā)生率比較[ 例(%)]

3 討論

HDP是一種妊娠與血壓升高并存的疾病，包括妊娠期高血壓、子癇等，患者多會出現(xiàn)水腫、蛋白尿等臨床表現(xiàn)，嚴(yán)重時(shí)可引發(fā)上腹痛、視力模糊、頭痛等癥狀，若未得到及時(shí)治療，可導(dǎo)致患者出現(xiàn)全身性痙攣，甚至昏迷，嚴(yán)重威脅孕產(chǎn)婦及圍生兒的生命安全。目前，關(guān)于HDP的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，也給臨床治療、預(yù)防帶來了一定程度上的困難。

研究表明，HDP的發(fā)生可能與免疫、遺傳或內(nèi)皮血管損傷等因素有關(guān)[7-8]。本研究通過觀察分析影響血管損傷的多項(xiàng)指標(biāo)，以期為臨床預(yù)防HDP的發(fā)生、發(fā)展，改善妊娠結(jié)局提供幫助。FA是一種水溶性B族維生素，主要成分為氨基水楊酸、谷氨酸及喋啶，四氫葉酸為FA的衍生物，是人體RNA、DNA合成所需的重要輔酶因子。在女性妊娠早期階段，為了胚胎的生長、發(fā)育需要及時(shí)補(bǔ)充FA，若孕婦早期機(jī)體內(nèi)缺乏FA，可能影響到胎兒的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育，使其出現(xiàn)先天畸形，比如無腦兒、脊柱裂等[9-10]。VitB12也是一種有利于DNA合成的輔酶因子，該因子在人體多項(xiàng)物質(zhì)代謝中均有參與，包括糖代謝、脂肪代謝、蛋白質(zhì)代謝，除此之外，該因子可以作為機(jī)體造血原料，在胎兒神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育、生長方面也可發(fā)揮一定的促進(jìn)作用[11]。研究表明，VitB12、四氫葉酸兩者之間互相作用，互相聯(lián)系，若人體內(nèi)VitB12不足，可使FA的利用率進(jìn)一步減弱[12]。

Hcy是半胱氨酸及蛋氨酸代謝的產(chǎn)物，屬于一種含硫氨基酸，而Hcy重甲基化合成蛋氨酸期間必須要有FA與VitB12的幫助。臨床大量的妊娠并發(fā)癥相關(guān)研究中均有提到，多種妊娠并發(fā)癥與高Hcy血癥之間存在必然的聯(lián)系，Hcy分子中的巰基反應(yīng)性較高，可產(chǎn)生氧自由基與過氧化物，并對血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能產(chǎn)生破壞，血管內(nèi)皮被破壞后，能夠促進(jìn)血管內(nèi)皮素的加速分泌；同時(shí)，高Hcy血癥能夠進(jìn)一步減弱內(nèi)皮細(xì)胞抗凝與DNA合成的作用，不利于前列環(huán)素（PGI2）合成，進(jìn)而加重血壓波動[13-15]。VEGF在妊娠早期主要存在于細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞，妊娠中、晚期主要存在于合體滋養(yǎng)細(xì)胞[16]。而范立葉等[17]研究表明，VEGF在未孕婦女中表達(dá)水平較低，在正常妊娠10周前相對穩(wěn)定，而從10周開始，可隨妊娠周數(shù)增加而迅速增加，到孕16周達(dá)到高峰，隨后逐漸下降，相對而言，對于HDP患者來說，其機(jī)體VEGF表達(dá)可明顯減少，從而影響滋養(yǎng)細(xì)胞的分化與增殖，造成滋養(yǎng)細(xì)胞缺陷，導(dǎo)致血管重塑障礙，胎盤缺血缺氧，進(jìn)一步造成胎盤灌注不足，加重內(nèi)膜損害，導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局的發(fā)生。

本研究中，與健康對照組比較，HDP組患者血清FA、VEGF、VitB12水平均降低，血清Hcy水平均升高，且重度子癇前期組患者血清FA、VEGF、VitB12水平均顯著低于健康對照組、妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組，血清Hcy水平顯著高于其余3組，提示引發(fā)HDP發(fā)病機(jī)制中的重要危險(xiǎn)因素可能為血清Hcy水平的提升及血清FA、VEGF、VitB12水平的下降，上述指標(biāo)的變化與HDP疾病的發(fā)展進(jìn)程息息相關(guān)。同時(shí)本研究進(jìn)一步深入分析了健康對照組和HDP患者不同孕周下的血清FA、VitB12、VEGF、Hcy指標(biāo)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，HDP組患者血清FA、VEGF均呈逐漸降低趨勢，血清Hcy呈逐漸升高趨勢，血清VitB12呈先升高后降低趨勢，分析其原因可能為，Hcy在甲基化合成蛋氨酸的過程中需要FA、VitB12的參與，其中FA作為一種轉(zhuǎn)移輔酶，VitB12作為一種蛋氨酸輔酶，F(xiàn)A、VitB12的缺乏可造成機(jī)體內(nèi)蛋氨酸合成酶的活性降低，從而引起Hcy在體內(nèi)不斷的聚集，進(jìn)而促進(jìn)HDP的發(fā)生和發(fā)展；同時(shí)，在Hcy生成半胱氨酸、α- 酮丁酸的過程中，也是需要VitB12的輔助，因此，導(dǎo)致FA、VitB12水平的缺失可引起Hcy的代謝障礙，誘發(fā)HDP[18]。且本研究中，HDP組患者不同孕期的血清FA、VEGF、VitB12水平均顯著低于健康對照組，血清Hcy顯著高于健康對照組，這可能與孕周的增加導(dǎo)致機(jī)體對血清Hcy代謝降低、血管內(nèi)皮損傷加重、妊娠期高血壓水平加重有關(guān)。

此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，重度子癇前期組患者不良妊娠結(jié)局總發(fā)生率顯著高于妊娠期高血壓組、健康對照組，輕度子癇前期組患者不良妊娠結(jié)局總發(fā)生率顯著高于健康對照組，說明隨著HDP患者疾病的加重，不良妊娠結(jié)局的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)也隨之增加，因此，及時(shí)對存在血清FA、VitB12、VEGF、Hcy水平異常的妊娠孕婦進(jìn)行積極的對癥治療意義重大。部分研究認(rèn)為，為孕婦補(bǔ)充VitB12、FA、維生素B6可促使Hcy濃度的降低，進(jìn)而減小Hcy水平過高而對血管造成的毒害作用，對HDP患者的病情轉(zhuǎn)歸具有重要幫助[19-20]；同時(shí)，也有研究指出，生育年齡的女性無論懷孕與否，每日都應(yīng)攝取400 μg的FA，有助于提高優(yōu)生優(yōu)育的水平，且FA是胎兒脊椎、腦部細(xì)胞發(fā)育的重要營養(yǎng)素[21-22]。因此，對孕婦進(jìn)行追蹤檢查FA、Hcy、VitB12、VEGF水平，可提高孕育水平，為順利生產(chǎn)提供有力保障。

綜上，F(xiàn)A、VitB12、VEGF、Hcy的水平變化與HDP的發(fā)生、發(fā)展息息相關(guān)，監(jiān)測孕產(chǎn)婦孕期上述指標(biāo)水平的變化，并對出現(xiàn)異常的孕婦進(jìn)行針對性治療，對預(yù)防HDP的發(fā)生、發(fā)展，與改善孕婦妊娠結(jié)局具有積極意義，值得臨床借鑒。