艾灸輔助艾速康對HIV/AIDS患者療效及miR-222、血清CD4+的影響*

張煥霞 劉春禮 孫曉明 崔美靈 焦 敏 仝小慶 孫 燕

獲得性免疫缺陷綜合征(Acquired immunodeficiency syndrome，HIV/AIDS)為目前嚴(yán)重威脅人類健康的傳染性疾病，由人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)引起[1,2]。目前，高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法為治療HIV/AIDS患者最為有效的方法，可改善患者生存質(zhì)量及生存時(shí)間[3,4]。但是由于用藥時(shí)間較長，免疫重建不良、毒副作用及耐藥性等問題較為明顯，特別是血清CD4+不足200 個(gè)/μl后易引發(fā)各種感染，嚴(yán)重者還可導(dǎo)致死亡[5]。有研究顯示，中醫(yī)藥可提高患者免疫功能，改善其臨床癥狀[6]。其中艾速康可化瘀解毒、益氣養(yǎng)血、健脾補(bǔ)中，能夠提高患者免疫[7]。艾灸具有補(bǔ)益扶正的作用，在足三里處艾灸可提神醒腦、增強(qiáng)免疫能力[8]。研究顯示，AIDS的發(fā)生與miR-222關(guān)系密切，miR-222可誘導(dǎo)血清CD4+下調(diào)[9]。但是國內(nèi)對此研究較少，本研究對HIV/AIDS患者使用艾灸輔助艾速康治療，并探究其療效及對miR-222、血清CD4+的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年6月—2020年12月在鄭州市第六人民醫(yī)院治療的HIV/AIDS患者120例，隨機(jī)分為參考組(60例)和觀察組(60例)。其中觀察組患者病程最短3個(gè)月，最長6年，平均病程(2.78±0.42)年；男36例，女24例；年齡20～65歲，平均年齡(39.24±3.78)歲；感染途徑：雙性戀感染2例，同性戀感染26例，配偶感染13例，婚外異性接觸感染12例，輸血感染7例。參考組患者病程最短3個(gè)月，最長6年，平均病程(2.84±0.46)年；男34例，女26例；年齡18～62歲，平均年齡(40.11±3.82)歲；感染途徑：雙性戀感染1例，同性戀感染24例，配偶感染15例，婚外異性接觸感染14例，輸血感染6例。2組患者感染途徑、年齡、性別等資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)①所有患者經(jīng)相關(guān)檢查均符合《艾滋病診療指南(第三版)》[10]中HIV感染相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；②符合《中醫(yī)藥治療艾滋病臨床技術(shù)方案(試行)》[11]中邪毒內(nèi)滯、氣虛血瘀診斷標(biāo)準(zhǔn)：脈沉澀，舌質(zhì)紫暗或瘀斑，淋巴結(jié)腫大、皮疹、納呆、腹瀉、咳嗽、乏力、消瘦等癥狀者；③能夠配合研究、按時(shí)復(fù)查患者；④血清 CD4+<200 個(gè)/μl的首次治療患者。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn)①合并造血系統(tǒng)、腦血管、肝腎、心血管等原發(fā)疾病患者；②晚期AIDS、孕婦、哺乳期患者；③資料不全、不能按規(guī)定服藥等影響研究及療效患者。

1.4 治療方法參考組實(shí)施一線治療方案：依非韋倫片(規(guī)格：600 mg；國藥準(zhǔn)字H20133265；生產(chǎn)企業(yè)：浙江華海藥業(yè)股份有限公司)口服，600 mg/(次·d)；拉夫米定片(規(guī)格：0.1 g；國藥準(zhǔn)字H20030581；生產(chǎn)企業(yè)：葛蘭素史克制藥(蘇州)有限公司)口服，0.1 g/(次·d)；富馬酸替諾福韋二吡呋酯片(規(guī)格：300 mg；國藥準(zhǔn)字H20173303；生產(chǎn)企業(yè)：正大晴天藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司)口服，300 mg/(次·d)。在此基礎(chǔ)上給予艾速康(甘草15 g，黃芩10 g，金銀花30 g，蒲公英 30 g，紫花地丁30 g，桑白皮30 g，白術(shù)10 g，虎杖30 g，丹參10 g，紅參5 g，當(dāng)歸15 g，黃芪30 g)加水煎煮，每天1劑，分早晚2次服用。觀察組在參考組的基礎(chǔ)上使用艾灸：將樟腦、丁香、白芷、艾葉按照1∶1∶1∶5組方，艾葉搗絨，其他藥物制成粉末，加工成20 cm×1.5 cm 艾條，將雙側(cè)足三里穴擦干凈，以局部溫?zé)崮褪転槎仍诰嚯x皮膚3～5 cm施灸，避免灼傷，每次 30 min，每天1～2次。30 d為一個(gè)療程，療程間隔 10 d，2組均治療6個(gè)月之后評估各項(xiàng)指標(biāo)。

1.5 療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[12]評估療效：痊愈：治療后，患者中醫(yī)體征、癥狀基本消失或消失，癥狀積分至少減少95%；顯效：治療后，患者中醫(yī)體征、癥狀明顯減輕，癥狀積分至少減少70%，不足95%；有效：治療后，患者中醫(yī)體征、癥狀好轉(zhuǎn)，癥狀積分減少30%，不足70%；無效：治療后，患者癥狀積分減少不足30%，中醫(yī)體征、癥狀無明顯改善，甚至加重。

1.6 觀察指標(biāo)①血清CD4+、miR-222水平，抽取患者治療前后靜脈空腹血5 ml，miR-222檢測方式：以10 000 r/min的速度離心，將0.2 ml氯仿加入1 ml的Trizol試劑裂解樣本中，進(jìn)行裂解，采用無酶的RNA沖洗液在4 ℃冰上進(jìn)行洗滌，再次離心5 min，得到RNA。將逆轉(zhuǎn)錄酶MMLV加入混合液前先干浴(70°)3 min，將其取出后進(jìn)行冰水浴使管內(nèi)外溫度一致，再降0.5 μl逆轉(zhuǎn)錄酶加入，水浴(37°)60 min，將其置于室溫下5 min溶解，進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，得到cDNA。分別在55 ℃ 2 min、93 ℃ 1 min、92 ℃ 2 min的條件下進(jìn)行反應(yīng)，共40個(gè)循環(huán)。以流式細(xì)胞儀檢測血清CD4+水平。②癥狀積分變化情況，參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[12]，分別于治療前后采用積分法評估患者體征積分。中醫(yī)癥狀：神疲懶言、煩躁易怒、口干口苦、食欲不振、脘悶腹脹、倦怠無力、腰膝酸軟等癥狀，按照輕、中、重分別計(jì)1、2、3分。

2 結(jié)果

2.1 血清CD4+、miR-222水平與治療前比較，2組治療后血清CD4+水平均明顯升高(P<0.05)，且與參考組比較，觀察組明顯升高(P<0.05)；2組miR-222水平明顯降低(P<0.05)，且與參考組比較，觀察組明顯降低(P<0.05)。見表1。

表1 2組HIV/AIDS患者血清CD4、miR-222水平比較 (例，

2.2 臨床療效治療后，與參考組總有效率78.33%比較，觀察組93.33%明顯升高(P<0.05)。見表2。

表2 2組HIV/AIDS患者臨床療效比較 (例，%)

2.3 癥狀積分變化情況治療后，2組患者神疲懶言、煩躁易怒、口干口苦、食欲不振、脘悶腹脹、倦怠無力、腰膝酸軟等癥狀評分與治療前比較均明顯降低(P<0.05)，且與參考組比較，觀察組明顯降低(P<0.05)。見表3。

表3 2組HIV/AIDS患者癥狀積分變化情況比較 (例，

3 討論

HIV/AIDS在中醫(yī)中屬“陰陽易”“虛勞”“疫病”范疇，主要因HIV病毒入侵機(jī)體，早期能夠伏而不發(fā)，但是病邪能夠不斷損傷機(jī)體，侵犯正氣，進(jìn)而導(dǎo)致臟腑功能失調(diào)，特別是健運(yùn)失職、脾氣虛，瘀毒、濕熱，氣血陰陽失和等病理產(chǎn)物生成；作為致病因素可加重正氣衰弱，五臟六腑的蓄毒爆發(fā)[13]。所以外感HIV疫毒為HIV/AIDS發(fā)病的始動(dòng)因素，正氣虧虛為其基本條件，濕熱、瘀毒為其病理因素的關(guān)鍵，虛實(shí)夾雜、本虛標(biāo)實(shí)為基本病機(jī)。因此，臨床主要以化瘀解毒、清熱祛濕、健脾補(bǔ)中為治療原則。艾速康主要由甘草、黃芩、金銀花、蒲公英、紫花地丁、桑白皮、白術(shù)、虎杖、丹參、紅參、當(dāng)歸、黃芪組成，其中白術(shù)、紅參、黃芪為君藥，能夠補(bǔ)腎扶正、益氣健脾；黃芩、虎杖、蒲公英、金銀花為臣藥，可清熱解毒；作為佐藥，桑白皮能夠清肺化痰，丹參、當(dāng)歸可活血養(yǎng)血；甘草調(diào)和諸藥，可解百毒。諸藥合用可清熱涼血、解毒、健脾補(bǔ)腎益氣。而HIV/AIDS患者多表現(xiàn)為脾氣虛虧、氣血陰陽缺損癥狀。艾灸足三里具有提神醒腦、開表透里的作用，適合虛證患者；本穴還能夠增強(qiáng)免疫力，增加裂解素。

本研究對HIV/AIDS患者使用艾灸輔助艾速康治療，結(jié)果顯示，治療后，2組患者神疲懶言、煩躁易怒、口干口苦、食欲不振、脘悶腹脹、倦怠無力、腰膝酸軟等癥狀評分與治療前比較均明顯降低，且與參考組比較，觀察組明顯降低；與參考組總有效率78.33%比較，觀察組93.33%明顯升高。提示艾灸輔助艾速康可有效改善患者臨床癥狀，提高療效。可能是因?yàn)榘倏抵悬S芩為新型整合酶抑制劑，具有低毒性、高活性抑制HIV復(fù)制的作用；甘草不僅可增強(qiáng)免疫力，還起較強(qiáng)的抗HIV病毒作用；黃芪可幫助患者重建免疫功能。足三里艾灸通過調(diào)節(jié)體內(nèi)失衡的免疫功能起抗感染、抗免疫作用，具有扶正固本的作用。二者聯(lián)合可起協(xié)同作用，進(jìn)而改善臨床癥狀，提高療效。

血清CD4+為機(jī)體重要的免疫細(xì)胞，也是HIV病毒的主要攻擊對象，隨著異常免疫的激活，血清CD4+可快速衰竭，一旦低于200個(gè)/μl即會(huì)引發(fā)帶狀皰疹、口瘡、腸道感染及肺部感染等各種機(jī)會(huì)性感染[14]。臨床常以血清CD4+水平作為AIDS進(jìn)程的標(biāo)志。miRNA在多種疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中具有重要的調(diào)控作用，其中高表達(dá)的miR-222能夠抑制血清CD4+表達(dá)，通過靶向血清CD4+調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，進(jìn)而促進(jìn)疾病的發(fā)生。有研究顯示，miR-222在AIDS患者中呈高表達(dá)，可影響血清CD4+水平[9]。本研究結(jié)果進(jìn)行探究得知，與治療前比較，2組血清CD4+水平均明顯升高，且與參考組比較，觀察組明顯升高；2組miR-222水平明顯降低，且與參考組比較，觀察組明顯降低。提示艾灸輔助艾速康可有效提高血清CD4+水平，降低miR-222水平，進(jìn)而阻礙疾病進(jìn)展?？赡苁且?yàn)辄S芪能夠促進(jìn)T細(xì)胞增殖提高患者血清CD4+水平，進(jìn)而促進(jìn)免疫重建，提高免疫力；紫花地丁、蒲公英、金銀花、黃芩均有抗HIV活性；甘草可阻斷HIV基因轉(zhuǎn)錄；紫草、丹參具有HIV反轉(zhuǎn)錄酶的作用。與艾灸聯(lián)合可在一定程度上提高其療效，增強(qiáng)患者免疫功能，進(jìn)而達(dá)到提高血清CD4+水平、降低miR-222水平的目的。

綜上所述，HIV/AIDS患者使用艾灸輔助艾速康治療可有效提高血清CD4+水平，降低miR-222水平，改善患者臨床癥狀，提高患者免疫功能，療效顯著。但是本研究還需進(jìn)一步延長觀察周期以研究其遠(yuǎn)期療效。