豬傳染性腦脊髓炎的診斷與防控

劉振汝

（廣東省清遠(yuǎn)市清城區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生防疫中心，廣東 清遠(yuǎn) 511500）

豬傳染性腦脊髓炎是由豬傳染性腦脊髓炎病毒感染豬引起一種傳染病，該病主要損害病豬的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，病豬臨床表現(xiàn)為有中樞神經(jīng)紊亂、四肢麻痹、腦脊髓灰質(zhì)炎、繁殖障礙、肺炎、腹瀉、心包炎、心肌炎、皮膚損傷等。豬傳染性腦脊髓炎于1929年首次在捷克斯洛伐克的捷申發(fā)現(xiàn)，因此該病又名為捷申病。此外，在英國首次發(fā)現(xiàn)豬感染豬傳染性腦脊髓炎病毒后臨床癥狀較為溫和，根據(jù)臨床表現(xiàn)命名為塔番病。2002 年，日本暴發(fā)豬傳染性腦脊髓炎病疫情，隨后該病在亞洲迅速蔓延，我國部分豬場也發(fā)現(xiàn)該病。

1 病原特點(diǎn)

豬傳染性腦脊髓炎的病原為微核糖核酸病毒科腸道病毒屬豬傳染性腦脊髓炎病毒。該病毒的病毒粒子為球形，直徑20～30 nm，無囊膜，核衣殼呈二十面立體對稱，由32 個(gè)顆粒組成，無凝集和吸附紅細(xì)胞能力。基因組為單股正鏈RNA，基因組編碼4個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白和7個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白。目前已知豬傳染性腦脊髓炎有11 種血清型，其中血清1型強(qiáng)毒株可導(dǎo)致嚴(yán)重的捷申病毒腦脊髓灰質(zhì)炎，2、3、5血清型也可引起豬傳染性腦脊髓炎，其他的毒株和血清型可引起溫和型、隱性感染、塔番病、良性地方流行性麻痹。豬傳染性腦脊髓炎病毒可在豬源細(xì)胞培養(yǎng)中生長，如原代或次代豬腎細(xì)胞或腎細(xì)胞，如PK-15 和IBRS2。此外，部分毒株可在睪丸細(xì)胞、HeLa、BHK-21和Vero等細(xì)胞系中繁殖。豬傳染性腦脊髓炎病毒在豬腎細(xì)胞，并可引起細(xì)胞出現(xiàn)變圓和壞死的細(xì)胞病變，形成蝕斑。豬傳染性腦脊髓炎病毒耐酸，于pH3～9，溫度為4 ℃的環(huán)境中可存活24 h以上，15 ℃下可存活168 d，56 ℃的溫度下30 min不能使病毒完全滅活。將豬傳染性腦脊髓炎病毒保存于50%甘油，在4 ℃的環(huán)境中可較長時(shí)間保持毒力，在-70 ℃的環(huán)境中可存活數(shù)年。豬傳染性腦脊髓炎病毒對多種消毒均有較強(qiáng)的抵抗能力，對脂溶劑也表現(xiàn)出較強(qiáng)的抵抗能力，但次氯酸鈉、70%酒精、3%福爾馬林溶液、20%漂白粉均可使病毒滅活，此外部分消毒藥物在提高消毒藥有效成分含量和消毒時(shí)間后也可滅活該病毒。

2 流行病學(xué)特點(diǎn)

豬傳染性腦脊髓炎在新疫區(qū)通常呈現(xiàn)暴發(fā)性流行，在個(gè)別豬發(fā)病后可迅速蔓延至全群，在部分豬場也可呈現(xiàn)波浪式流行即一批豬發(fā)病后在相隔數(shù)周或數(shù)月后再次出現(xiàn)。在老疫區(qū)，豬傳染性腦脊髓炎則呈散發(fā)性流行。豬傳染性腦脊髓炎的病死率較高，可達(dá)50%～90%。豬是豬傳染性腦脊髓炎病毒的唯一自然宿主，各種品種和年齡的豬均可感染，但其中28～35 d的豬最易感，成年豬感染后多為隱性感染。仔豬斷奶后在母源抗體消失后，不同窩仔豬混群時(shí)更易發(fā)生感染。豬傳染性腦脊髓炎病毒主要通過糞口途徑進(jìn)行傳播，該病毒主要存在于病豬的腦和脊髓，但是在病豬的排泄物中也可存在病毒。此外，豬傳染性腦脊髓炎病毒也可經(jīng)呼吸道傳播。成年豬感染后排毒量較低，妊娠母豬帶毒期為3個(gè)月，可經(jīng)胎盤感染胎兒，妊娠母豬感染后可帶毒2個(gè)月。公豬精液帶毒，但是對母豬不具有感染性。通過動(dòng)物貿(mào)易、屠宰運(yùn)輸?shù)乳g接傳播是該病跨區(qū)域傳播的重要因素。

3 臨床癥狀

豬傳染性腦脊髓炎病毒感染后臨床上主要以無癥狀感染的病豬最為常見，而出現(xiàn)癥狀的豬臨床表現(xiàn)也是多樣的。不同毒力的毒株以及不同的感染病毒量，病豬潛伏期為4～28 d，而人工腦內(nèi)或鼻內(nèi)感染的潛伏期為6 d。

由豬傳染性腦脊髓炎病毒1 型強(qiáng)毒株引起的腦脊髓灰質(zhì)炎具有發(fā)病率高和死亡率高的特點(diǎn)，在所有日齡的豬均可發(fā)病，并由此造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。在感染早期，病豬表現(xiàn)出發(fā)熱、厭食、精神沉郁的臨床癥狀，隨后出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)失調(diào)、眼球震顫、驚厥、角弓反張和昏迷等神經(jīng)癥狀，在發(fā)病后期病豬通常出現(xiàn)癱瘓、呈犬坐姿勢或臥地不起等癥狀，并且在發(fā)病3～4 d 后死亡。部分病豬在感染后經(jīng)護(hù)理后可在數(shù)月內(nèi)不死甚至康復(fù)，但通常會出現(xiàn)肌肉萎縮和麻痹的癥狀。而毒性較弱的豬傳染性腦脊髓炎病毒1 型可引起良性地方流行性偏癱、溫和型腦脊髓灰質(zhì)炎，臨床癥狀相對較輕，發(fā)病率和病死率低，并且出現(xiàn)癥狀的主要為低日齡仔豬。

豬傳染性腦脊髓炎病毒感染還可造成豬的繁殖障礙，導(dǎo)致妊娠母豬出現(xiàn)產(chǎn)死胎、木乃伊胎、胚胎死亡和后備母豬的不孕不育，癥狀與細(xì)小病毒和腦心肌炎病毒感染相似。

部分仔豬在感染豬傳染性腦脊髓炎病毒后可出現(xiàn)腹瀉癥狀，并且?？稍谄浼S便中分離到豬傳染性腦脊髓炎病毒，人工感染病例腹瀉癥狀較輕并且持續(xù)時(shí)間較短。

豬傳染性腦脊髓炎病毒單獨(dú)感染時(shí)通常呈現(xiàn)亞臨床癥狀，不會引起病豬出現(xiàn)呼吸道疾病，但當(dāng)兩種不同的血清型感染后豬可以出現(xiàn)肺炎、心包炎、心肌炎等病理變化。

4 病理變化

剖檢病豬可見其腦膜水腫，腦膜和腦膜血管充血，心肌和骨骼肌萎縮，而其他臟器無明顯的病變。病豬的組織病理學(xué)變化主要集中于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，主要表現(xiàn)為非化膿性腦脊髓灰質(zhì)炎，其中脊髓的炎癥變化更為嚴(yán)重。病豬腦和脊髓神經(jīng)細(xì)胞變性壞死，神經(jīng)元被吞噬，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增生，血管和血管周圍有細(xì)胞浸潤形成的管套。在發(fā)病早期主要損傷病豬的頸部脊髓，隨后發(fā)展至胸部、腰部和薦部脊髓。腹瀉病例的小腸絨毛不會萎縮。妊娠母豬繁殖障礙產(chǎn)出的死胎或新生仔豬無特異性病理變化，在腦干偶爾可見輕度膠質(zhì)細(xì)胞增生和血管套。出現(xiàn)肺炎癥狀的病豬在前腹側(cè)有灰紅色實(shí)變區(qū)。豬傳染性腦脊髓炎病毒3型可造成病豬出現(xiàn)漿液纖維素性心包炎，嚴(yán)重感染的仔豬可出現(xiàn)局灶性心肌壞死。

5 診斷方法

由于豬傳染性腦脊髓炎病毒感染引起的高度致死性腦脊髓灰質(zhì)炎、母豬繁殖障礙、仔豬腹瀉、肺炎等不具有特征性，在臨床上常與其他可引起相似癥狀的疫病混淆，因此該病的確診需進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測。實(shí)驗(yàn)室診斷豬傳染性腦脊髓炎的方法主要分為病原學(xué)診斷和血清學(xué)診斷。

病原學(xué)診斷通常需要采集有明顯神經(jīng)癥狀病豬的脊髓、腦干或小腦組織，將病料樣品制成1∶10 的懸液，在經(jīng)過濾除菌和添加抗生素后接種于原代豬腎細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn)明顯病變后連續(xù)傳染3次，待細(xì)胞病變穩(wěn)定后用豬傳染性腦脊髓炎病毒陽性血清進(jìn)行中和試驗(yàn)，也可使用熒光抗體檢測技術(shù)和反轉(zhuǎn)錄PCR、熒光定量PCR 進(jìn)行檢測。此外，也可將培養(yǎng)物或處理后的病料樣品接種于易感豬，人工感染的豬出現(xiàn)與發(fā)病豬相似的臨床癥狀和病理變化也可確診。在病料樣品采集時(shí)，應(yīng)根據(jù)病豬的臨床癥狀進(jìn)行樣品采集，對于出現(xiàn)麻痹癥狀的病豬，此時(shí)期中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)可能不再含有病毒，從豬糞便中分離病毒也不可行。出現(xiàn)繁殖障礙的病例，采集流產(chǎn)或死產(chǎn)胎兒的肺部組織可以分離病毒，但木乃伊胎通常含有病毒數(shù)量較少，因此可采取熒光抗體檢測病毒抗原。肺炎和腹瀉的病例可采集呼吸道或腸道組織分離病毒，但應(yīng)注意健康仔豬感染豬傳染性腦脊髓炎病毒也較為常見。

血清學(xué)診斷豬傳染性腦脊髓炎的方法有免疫熒光試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、ELISA等。通常病豬在出現(xiàn)麻痹癥狀前6～9 d血清中已含有中和抗體，滴度有時(shí)可達(dá)1∶256，而康復(fù)豬的中和抗體可保持280 d 以上。一般中和試驗(yàn)的中和滴度為1∶64 時(shí)可判斷為血清陽性，1∶16～1∶32 時(shí)判斷為可疑。ELISA則適用于大規(guī)模血清樣品檢測，已被用于檢測豬傳染性腦脊髓炎病毒血清抗體，但由于豬傳染性腦脊髓炎病毒感染現(xiàn)象較為普遍，因此血清學(xué)抗體檢測僅作為輔助判斷，仍需與病原學(xué)檢測結(jié)果結(jié)合才能確診。

6 防控方法

豬傳染性腦脊髓炎目前無有效的治療方法和疫苗，因此通常采取加強(qiáng)檢疫和做好養(yǎng)殖護(hù)理工作以預(yù)防該病。在流行該病的地區(qū)應(yīng)采取綜合性的防控措施，做好豬場的環(huán)境衛(wèi)生清潔工作，做好豬群的保健工作，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，禁止從有該病流行的地區(qū)進(jìn)口生豬和豬肉制品，可有效降低豬傳染性腦脊髓炎的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)以及控制發(fā)病豬群的發(fā)病率和病死率。在平時(shí)應(yīng)加強(qiáng)引進(jìn)豬只的檢疫，防止引入帶毒豬。若發(fā)現(xiàn)豬場出現(xiàn)豬傳染性腦脊髓炎的病例，應(yīng)對感染豬場實(shí)施隔離，對污染區(qū)進(jìn)行消毒，對感染豬或同群豬做撲殺處理。雖然目前無可用的商品化疫苗，但國內(nèi)外的科研人員一直在開展豬傳染性腦脊髓炎病毒疫苗的研發(fā)工作。國外曾采取患豬傳染性腦脊髓炎的病豬腦部組織制備成滅活疫苗并對豬進(jìn)行免疫接種，但是免疫保護(hù)效果較差。后續(xù)有研究人員將豬腎細(xì)胞系帶培育出弱毒疫苗和細(xì)胞培養(yǎng)物滅活疫苗，其表現(xiàn)出較好的免疫保護(hù)性。但由于生物安全問題、免疫保護(hù)效果的穩(wěn)定性等問題，目前仍無可用于該病防控的疫苗，因此仍需加強(qiáng)和開展豬傳染性腦脊髓炎病毒疫苗的研發(fā)工作。

7 結(jié)語

豬傳染性腦脊髓炎是一種豬高度致死性的病毒性傳染病，可對豬養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，因此需要豬場管理人員以及畜牧獸醫(yī)管理部門提高對該病的防控重視程度，以便盡早發(fā)現(xiàn)疫情并及時(shí)處理。目前，豬傳染性腦脊髓炎無特效治療藥物和防控疫苗，因此需要采取檢疫撲殺、環(huán)境消毒和飼養(yǎng)管理相結(jié)合的綜合性防控方法進(jìn)行防控。同時(shí)，相關(guān)科研人員應(yīng)進(jìn)一步開展豬傳染性腦脊髓炎的基礎(chǔ)研究和疫苗、藥物、診斷試劑的應(yīng)用研究，為該病的防控提供理論支撐和技術(shù)支持。