瓦氏雅羅魚受精卵脫粘效果對比研究

文/魏凱 馬龍 時曉 耿琰

瓦氏雅羅魚（），俗稱“滑子魚”，屬鯉形目、鯉科、雅羅魚亞科。在我國主要分布于黑龍江、圖們江、鴨綠江等水域。在內(nèi)蒙古達(dá)里湖數(shù)量較多，也是當(dāng)?shù)氐闹饕?jīng)濟(jì)魚類之一。在北京地區(qū)由于野生種群數(shù)量逐漸下降，瓦氏雅羅魚已被列為地方重點(diǎn)保護(hù)魚類。瓦氏雅羅魚一般3齡～4齡性成熟，卵為圓球形，淺灰色或灰白色，卵徑?。ㄎ蛎浨巴ǔ?.5mm～1.0mm），受精卵呈黏性，易粘連沉底而造成缺氧，且易患水霉病，嚴(yán)重影響受精卵的孵化率。

國內(nèi)學(xué)者對魚類粘性卵進(jìn)行脫粘研究發(fā)現(xiàn)，傳統(tǒng)的泥漿水會使卵粒附著物較多，從而增加卵粒重，導(dǎo)致孵化出苗率低。為此，本試驗(yàn)通過參考大量文獻(xiàn)資料，結(jié)合國內(nèi)目前較為常用的魚類粘性卵脫粘方法，選用滑石粉和單寧酸作為脫粘劑進(jìn)行對比研究，現(xiàn)總結(jié)如下。

瓦氏雅羅魚

一、材料與方法

（一）脫粘材料與用量

本試驗(yàn)共分為4個試驗(yàn)組和1個對照組，將滑石粉和單寧酸分別配置成不同濃度溶液。此外，考慮到氯化鈉不僅能夠提高脫粘效率，激發(fā)精子活力，而且對水霉有一定抑制作用。因此在滑石粉組還加入適量食鹽，具體見表1。

表1 不同脫粘材料的配制

（二）樣本采集

通過集中拉網(wǎng)后進(jìn)行雌雄篩選，共獲得性腺發(fā)育情況良好的4齡瓦氏雅羅魚親魚120尾（雌雄比例1:3）。每組7尾雌魚樣本，體長30cm～35cm，體重400g～500g，雄魚數(shù)量為15尾～20尾。在注射促黃體素釋放激素24h后，采用傳統(tǒng)的干法授精，即將卵粒和精液擠入干燥塑料盆內(nèi)，用羽毛將卵粒和精子混合均勻后輕微攪動1min，每組采集1kg受精卵備用。

（三）受精卵的脫粘

將采集好的受精卵分別置于4個潔凈干燥的塑料盆中，再將制好的不同脫粘溶液依次緩慢倒入，每組溶液的脫粘時間如表2所示。攪動受精卵，使其與脫粘溶液充分接觸，待操作完成后將脫粘溶液緩緩倒出容器，再用清水將受精卵清洗干凈。對照組直接將受精卵倒入塑料盆后清洗干凈。

表2 不同脫粘溶液的脫粘時間

（四）受精卵的孵化

受精卵的放卵密度控制在50萬粒/m左右，受精卵孵化期控制水溫在11.4℃～12.7℃，溶解氧＞8mg/L，pH值7.5～8.0。瓦氏雅羅魚的孵化期積溫大約需要228℃～244℃，按照孵化期水溫測算，18d～20d可以出苗。

二、試驗(yàn)結(jié)果

（一）受精卵在孵化期間不同時間段的粘連率

從圖1可知，通過滑石粉進(jìn)行脫粘的兩個試驗(yàn)組在整體粘連率上顯著低于單寧酸試驗(yàn)組，孵化后期的粘連率均低于2%，脫粘效果非常顯著。而兩個單寧酸試驗(yàn)組的粘連率在12d以后顯著增加，最終粘連率均高于3%。對照組的受精卵從放入孵化桶即開始出現(xiàn)粘連情況，第18d的粘連率高達(dá)15.5%。

圖1 受精卵破膜前不同時間段的粘連率

（二）受精卵在孵化期間不同時間段的成活率

從圖2可知，通過滑石粉進(jìn)行脫粘的兩個試驗(yàn)組，受精卵成活率分別為87%和89%，而單寧酸組的受精卵成活率分別為75%和77%。對照組由于受精卵粘連和感染水霉病等問題，成活率從95%急劇下降至61%。

圖2 受精卵在不同時間段的成活率

（三）受精卵破膜前不同時間段水霉病感染率

從圖3可知，4個試驗(yàn)組在孵化前10d均未感染水霉病，而在孵化后期感染率略有上升，但基本保持在2%左右。對照組受精卵在第2d即出現(xiàn)感染水霉病情況，感染率逐漸從1.3%上升到14.6%。

圖3 受精卵在不同時間段感染水霉病的百分比

人工催產(chǎn)

（四）破膜率

破膜率=孵化出仔稚魚數(shù)量/受精卵總數(shù)×100%，表3所示為各組的破膜率，可以發(fā)現(xiàn)采用滑石粉—食鹽進(jìn)行脫粘的平均破膜率顯著高于采用單寧酸進(jìn)行脫粘的平均破膜率，總體脫粘效果更好。

表3 不同試驗(yàn)組的破膜率

三、討論

滑石粉的主要成分是含水硅酸鎂，具有潤滑性、抗粘、助流等特點(diǎn)。從試驗(yàn)結(jié)果可見其脫粘效果較好，卵粒表面附著的滑石粉顆粒少，孵化前期受精卵基本無粘連結(jié)塊現(xiàn)象，后期稍有增加。2個滑石粉試驗(yàn)組的受精卵成活率都在90%左右，水霉病出現(xiàn)在14d以后，感染率很低。這可能與在滑石粉中添加了食鹽有關(guān)，在提高脫粘效率，激發(fā)精子活力的同時對水霉起到了一定抑制作用，因此受精卵不易感染水霉病，也提高了破膜率。

單寧酸，又稱鞣酸，最早是由五倍子中得到的一種鞣質(zhì)，能夠與蛋白質(zhì)發(fā)生結(jié)合，生成鞣質(zhì)蛋白，對細(xì)菌有直接的殺滅作用。通常使用中藥五倍子防治水霉病，就是利用單寧酸沉淀蛋白質(zhì)的作用，可以促進(jìn)水霉菌感染傷口的愈合。這可能對預(yù)防水霉病感染有一定作用，從試驗(yàn)結(jié)果可見，單寧酸試驗(yàn)組在10d后才出現(xiàn)水霉病，感染率很低。但是單寧酸在降低受精卵粘連率和提高成活率上的效果不如滑石粉，而且試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)經(jīng)單寧酸脫粘的受精卵顏色發(fā)黑，且卵粒吸水膨脹情況稍差，卵徑較滑石粉組偏小，具體原因可能與選取的單寧酸濃度和脫粘時間有一定關(guān)系，后續(xù)將進(jìn)一步開展研究。

結(jié)合粘連率、存活率和水霉病感染率等指標(biāo)，綜合評價本次試驗(yàn)各組脫粘效果，我們認(rèn)為利用2%滑石粉—食鹽溶液脫粘20min的效果最佳。