不同釀酒酵母細胞壁對白羽肉雞生產(chǎn)性能、免疫及腸道微生物的影響

戴晉軍， 龔發(fā)源， 黃 鑫， 覃先武， 李 晗， 胡駿鵬

（安琪酵母股份有限公司，湖北宜昌 443003）

釀酒酵母細胞壁源于釀酒酵母， 是釀酒酵母經(jīng)液體發(fā)酵后得到的菌體， 再經(jīng)自溶或外源酶催化水解，分離獲得的產(chǎn)品，主要多糖成分為甘露聚糖、β-1，3/1，6-葡聚糖。 研究發(fā)現(xiàn)，釀酒酵母細胞壁可通過提升免疫、 改善腸道菌群等強化動物免疫功能，提升動物生產(chǎn)性能，其在全球畜牧養(yǎng)殖中的應用效果也逐步獲得認可。 歐盟將酵母細胞壁納入（EU）NO68/2013 號法規(guī)，我國也已將酵母細胞壁納入了《飼料原料目錄（2013）》。 本研究旨在考察不同釀酒酵母細胞壁對白羽肉雞生長性能、免疫及腸道微生物的影響， 為釀酒酵母細胞壁在生產(chǎn)上的合理使用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 釀酒酵母細胞壁A，安琪酵母生產(chǎn)，粗蛋白質22.5%，β-葡聚糖26.9%，甘露聚糖27.8%，溶解率48.8%，可溶部分中分子質量在14萬～19 萬Da 的占38.03%，9 萬～14 萬Da 的占61.53%。 釀酒酵母細胞壁B，市場收集，粗蛋白質22.2%，β-葡聚糖31.1%，甘露聚糖26.3%，溶解率9.56%， 可溶部分中分子質量＞30 萬Da 的占70.63%，19 萬～30 萬Da 的占28.97%。 釀酒酵母細胞壁C，市場收集，粗蛋白質49.8%，β-葡聚糖18.7%，甘露聚糖17%，溶解率5.45%，可溶部分中分子質量＞30 萬Da 的占65.39%，19 萬～30 萬Da 的占34.18%。

1.2 試驗動物與分組 選擇1 日齡科寶白羽肉雞600 羽，隨機分為5 個處理組，每處理組6 個重復，每重復20 只，各組間試驗雞的平均體重差異不顯著（P＞0.05）。 試驗分組如表1，基礎日糧配方參考NY/T 33-2004， 具體飼料指標如表2。 試驗時間2021 年5 ～6 月，試驗周期42 d。

表1 試驗處理與設計

表2 白羽肉雞飼料的主要指標%

試驗期間飼養(yǎng)管理按常規(guī)進行， 養(yǎng)殖條件為地面平養(yǎng)，飼料料型為商品料粉碎后的粉料。按照肉雞常規(guī)免疫程序進行免疫和管理， 自由采食和飲水，采用24 h 光照制。

1.3 檢測指標

1.3.1 生長性能指標 每個試驗階段 （21、42 d）結束前，禁食（自由飲水）12 h 后稱重，計算第1 ～21、22 ～42 天期間的平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）、料重比（F/G）和成活率。

平均日增重（ADG）：以重復為單位，飼養(yǎng)試驗開始前和結束后分別稱重， 稱重前禁食12 h ，計算每個重復每只雞的平均日增重。 平均日采食量（ADFI）：試驗開始后，記錄每天的投料量和每天的剩料量，死亡雞只，計算每個重復每只雞的平均日采食量。 耗料增重比（F/G）：由每個重復的總耗料量和總增重計算得出每個重復的平均料重比。

1.3.2 免疫器官指標 在21 d 和42 d 屠宰前禁食12 h，僅供飲水。 以重復為單位稱取各處理組體重，選取3 只與平均體重接近的試雞用于屠宰試驗。 取樣按照家禽屠宰測定標準進行， 分離胸腺、脾臟、法氏囊稱重與體重作比較。 所得比值即為胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)。

1.3.3 血清新城疫抗體指標 42 d 試驗結束時，每個處理每個重復3 只使用無抗凝劑采血管，采血后將采集的血液，4000 r/min 離心10 min 分離血清，用于檢測新城疫抗體滴度，禽流感抗體指標采用高致病性禽流感診斷技術血凝（HA）和血凝抑制試驗（HI）（GB/T18936-2003）測定。

1.3.4 腸道微生物 42 d 試驗結束時，屠宰過程中在潔凈條件下采集回腸和盲腸中食糜樣品用于測定腸道微生物菌群（常規(guī)培養(yǎng)法）。

1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)采用Excel進行預處理，以“平均數(shù)±標準差”表示，采用SPSS 18.0 統(tǒng)計軟件中one-way ANOVA 進行單因素方差分析，差異顯著性用Duncan 氏多重比較法。

2 結果與分析

2.1 不同釀酒酵母細胞壁對白羽肉雞生長性能的影響 由表3 可以看出，42 d 平均出欄重2組＞4 組＞1 組＞3 組，日糧中添加300 g/t 釀酒酵母細胞壁A（2 組）對肉雞出欄重提升效果最佳，較空白對照組（1 組）提高7.0%，較3 組提高8.0%。從平均日采食量（ADFI）和平均日增重（ADG）看，各組在前期（1 ～21 d）差異不顯著，在后期數(shù)值上存在一定差異。 從42 d 料肉比（F/G）結果看，2組和4 組均低于空白對照組，但差異不顯著。

表3 不同釀酒酵母細胞壁對肉雞生長性能的影響

2.2 不同釀酒酵母細胞壁對白羽肉雞免疫性能的影響 從表4 可以看出，各組42 d 肉雞免疫器官指數(shù)的差異并不顯著。

表4 不同釀酒酵母細胞壁對42 d 肉雞免疫器官指數(shù)的影響%

由表5 可知， 各組血清新城疫抗體滴度水平差異不顯著， 添加300 g/t 釀酒酵母細胞壁A（2組）的血清新城疫抗體水平最高。

表5 不同釀酒酵母細胞壁對42 d 肉雞血清新城疫抗體水平的影響

2.3 不同釀酒酵母細胞壁對白羽肉雞腸道微生物的影響 由表6 可知，2 組的回腸大腸桿菌數(shù)比其他各處理組低1 個數(shù)量級。4 組的回腸沙門氏菌比其他各處理組高1 個數(shù)量級。2 組和3 組的盲腸沙門氏菌數(shù)量比其他各處理組低1 個數(shù)量級。

表6 不同釀酒酵母細胞壁對42 d 肉雞腸道微生物的影響lg CFU/g

3 討論

3.1 釀酒酵母細胞壁對白羽肉雞生長性能的影響 研究證明， 酵母細胞壁可以提高肉雞生長性能。 Pascual 等（2020）研究發(fā)現(xiàn)，在沒有外界應激的情況下， 肉雞日糧中添加低劑量酵母細胞壁（200 ～500 mg/kg）對育雛期的生長性能沒有顯著改善作用；但隨著處理時間的延長，育成期肉雞的飼料轉化率和出欄重均顯著增加， 這與管秀界等（2020）的研究結果相似。 添加0.5 ～10 kg/t 酵母細胞壁對21 日齡肉雞生長性能無顯著影響，但提高了42 日齡肉雞的平均體重相似。 龔發(fā)源等（2018） 發(fā)現(xiàn)與對照組相比， 肉雞日糧中添加1 kg/t酵母細胞壁可顯著提高42 日齡出欄重，同時使料肉比降低3.5%左右。 本試驗結果表明，添加釀酒酵母細胞壁A 可提高肉雞出欄重， 并降低料肉比，這可能是通過增強免疫力，改善腸道形態(tài)，增加腸道內壁面積，促進營養(yǎng)物質的吸收，從而使得體重增加（Pascual 等，2020）。

3.2 釀酒酵母細胞壁對白羽肉雞抗體水平的影響 新城疫抗體水平反映了家禽健康狀況和體液免疫功能， 常被作為考察營養(yǎng)添加劑免疫增強功效的關鍵指標。本試驗研究發(fā)現(xiàn)，添加酵母細胞壁提高了肉雞血清新城疫抗體水平。 這與前人的研究結果相似，例如龔發(fā)源等（2017）研究發(fā)現(xiàn)，在肉雞日糧中添加1 kg/t 的酵母細胞壁顯著提高了血清蛋白濃度和新城疫抗體水平，具有替代恩拉霉素的效果。管秀界等（2020）研究酵母細胞壁在肉雞中替代金霉素的效果時， 發(fā)現(xiàn)肉雞日糧中添加0.5 ～10 kg/t 的酵母細胞壁均可提高新城疫抗體水平，同時刺激免疫系統(tǒng)發(fā)育。黃婧溪等（2018）對比兩種酵母細胞壁多糖產(chǎn)品對肉雞免疫機能的影響時，發(fā)現(xiàn)高含量的甘露聚糖和β-葡聚糖有利于提高免疫器官指數(shù)，促進T 細胞增殖，增強肉雞的細胞免疫水平。 本試驗中，酵母細胞壁A 組的新城疫抗體水平最高，這可能得益于高含量的可溶性多糖。 研究表明，甘露寡糖發(fā)酵產(chǎn)生的短鏈脂肪酸可以降低腸道pH，從而減少特定病原菌的定植，并將其作為弱毒抗原呈遞給免疫細胞， 從而增強機體免疫功能，降低發(fā)病率（Mehdi 等，2012）。

3.3 釀酒酵母細胞壁對白羽肉雞腸道微生物的影響 大腸桿菌和沙門氏菌是家禽養(yǎng)殖中常見的細菌性疾病，發(fā)病雞生長性能差，死亡率較高。 因此大腸桿菌和沙門氏菌數(shù)量是考察營養(yǎng)添加劑抑菌效果的重要指標。本試驗中，添加酵母細胞壁降低了肉雞腸道大腸桿菌和沙門氏菌數(shù)量， 其中酵母細胞壁A 的抑菌效果最佳。 賀淼等（2015）在肉雞日糧中添加1 kg/t 酵母細胞壁多糖， 發(fā)現(xiàn)盲腸內容物中大腸菌落總數(shù)降低了44.39%。 夏林等（2008） 在肉仔雞日糧中添加750 g/t 的酵母細胞壁多糖， 發(fā)現(xiàn)肉仔雞盲腸內大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量顯著降低， 乳酸桿菌數(shù)量顯著增加。 酵母細胞壁的抑菌效果可能與多糖的種類與含量密切相關。 酵母細胞壁多糖能為含有甘露糖特異性I型菌毛的病原菌（如大腸桿菌、沙門氏菌）提供黏附位點，從而防止其黏附在腸道內壁上（Liu 等，2021）。 同時，葡聚糖含量與沙門氏菌結合的親和力呈高度正相關， 而甘露聚糖與大腸桿菌的親和力相對較強（Ganner 等，2013）。 上述研究說明酵母細胞壁能通過抑制有害菌的定植，促進有益菌的生長，最終改善腸道內環(huán)境。

4 小結

本試驗結果表明， 不同釀酒酵母細胞壁對肉雞的影響結果存在一定差異。 在本試驗條件下，在白羽肉雞日糧中添加300 g/t 釀酒酵母細胞壁A 對出欄重、抗體水平、腸道病原菌數(shù)量均有一定正面影響。