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    花椒葉中多酚成分提取及功能性研究

    2022-03-17 10:35:06千惠殷田田
    中國調(diào)味品 2022年3期
    關鍵詞:葉中抗疲勞花椒

    千惠,殷田田

    (新鄉(xiāng)醫(yī)學院 三全學院,河南 新鄉(xiāng) 453003)

    花椒(ZanthoxylumbungeanumMaxim.)屬于花椒屬,全世界一共有260種花椒,我國花椒資源豐富、栽培歷史悠久、種植面積大且產(chǎn)量高。我國栽培的花椒品種有39種,主要分布于云南、四川、河南、河北和山東等地?;ń肪哂薪∑⒊凉竦墓π?,一般被用作傳統(tǒng)的調(diào)味料使用,但是花椒葉的使用研究較少[1]。

    花椒葉中活性成分復雜多樣。周向軍等[2]通過氣相色譜法對花椒葉進行測定,發(fā)現(xiàn)花椒葉中一共含有35種易揮發(fā)的物質(zhì);Yang等[3]對花椒葉中的酮類物質(zhì)進行了分離和鑒定,發(fā)現(xiàn)含量最多的成分為槲皮苷和金絲桃苷;吳剛等[4]對花椒葉中的風味成分進行了研究,發(fā)現(xiàn)花椒葉中含有30多種易揮發(fā)的風味成分?;ń啡~中有多種藥用功效,可以用于治療胃痛、咳嗽和牙痛,此外,花椒葉精油能殺蟲和驅(qū)蚊。周江菊等[5]對花椒葉的抗氧化活性進行了研究,發(fā)現(xiàn)花椒葉揮發(fā)油可以清除自由基和抑制硝酸根離子活性,但目前國內(nèi)外對花椒葉抗疲勞功能活性的研究較少。

    花椒葉中的多酚物質(zhì)豐富,多酚是天然的抗氧化劑,具有多種保健功效,例如軟化疏通血管,調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)功能,調(diào)節(jié)新陳代謝和抗癌[6]?,F(xiàn)在我國的花椒葉資源基本處于一個低利用階段,為了增加花椒種植農(nóng)戶的收入和開發(fā)花椒葉資源[7],本研究對花椒葉多酚的提取工藝進行了優(yōu)化,旨在開發(fā)我國植物多酚新來源,為增加花椒種植戶新的收益提供了一些新的建議[8]。

    1 材料與方法

    1.1 實驗材料

    花椒葉:采于新鮮的花椒樹上。將花椒葉清洗干凈,烘干,粉碎,將花椒葉粉過40目篩,獲得的花椒葉粉放置于干燥的器皿中[9]。

    1.2 實驗試劑

    石油醚和無水乙醇:均為分析純。

    1.3 實驗儀器及設備

    中草藥粉碎機、烘箱、蒸發(fā)儀、分光光度計和冷凍干燥劑。

    1.4 實驗方法

    1.4.1 花椒葉中多酚提取工藝

    稱取5 g花椒葉粉末,將花椒葉放置于三角瓶中,在三角瓶中加入100 mL濃度為65%的乙醇。在功率為200 W的條件下,使用超聲波萃取儀萃取30 min,過濾,去除雜質(zhì),使用石油醚進行萃取,加熱除去溶液中多余的乙醇,加入10 mL蒸餾水復溶,使用真空冷凍機將材料凍干,獲得花椒葉多酚提取物備用[10-11]。

    1.4.2 花椒葉中多酚含量和得率的測定

    花椒葉中多酚含量的測定方法為分光光度法,具體步驟:(1)在比色管中加入2 mL福林酚試劑、2 mL無水乙醇、0.05 mL花椒葉提取物,混合均勻;(2)加入濃度為10%的2 mL碳酸鈉,混合均勻后,在室內(nèi)放置1 h;(3)在吸光值為640 nm下觀察,通過標準曲線計算花椒葉多酚含量[12]。

    多酚得率(%)=A×B/M×100%。

    式中:A為提取液體積(mL);B為提取液濃度(mg/mL);M為稱取的總質(zhì)量(mg)。

    1.4.3 花椒葉粗提取物單因素實驗

    1.4.3.1 乙醇濃度對花椒葉中多酚得率的影響

    稱取10 g花椒葉粉末,按照超聲波功率200 W、料液比1∶20、超聲波時間30 min,研究5個乙醇濃度60%、65%、70%、75%、80%對花椒葉中多酚得率的影響,從而確定最佳多酚提取的乙醇濃度[13-14]。

    1.4.3.2 超聲波功率對花椒葉中多酚得率的影響

    稱取10 g花椒葉粉末,按照乙醇濃度70%、料液比1∶20、超聲波時間30 min,研究5個超聲波功率100,150,200,250,300 W對花椒葉中多酚得率的影響,從而確定最佳多酚提取的超聲波功率[15]。

    1.4.3.3 超聲波時間對花椒葉中多酚得率的影響

    稱取10 g花椒葉粉末,按照超聲波功率200 W、料液比1∶20、乙醇濃度70%,研究5個超聲波時間10,20,30,40,50 min對花椒葉中多酚得率的影響,從而確定最佳多酚提取的超聲波時間[16]。

    1.4.3.4 料液比對花椒葉中多酚得率的影響

    稱取10 g花椒葉粉末,按照超聲波功率200 W、乙醇濃度70%、超聲波時間30 min,研究5個料液比1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30對花椒葉中多酚得率的影響,從而確定最佳多酚提取的料液比。

    1.4.4 花椒葉活性成分抗疲勞研究

    疲勞最重要的表現(xiàn)是運動能力下降,持續(xù)地運動,肌肉中消耗氧氣的量會增加,血糖和蛋白質(zhì)也會被消耗,從而產(chǎn)生疲勞癥狀,所以通過測量運動耐力來反映抗疲勞活性的強弱是最直接的標準。本實驗通過飼喂小鼠無菌水、西洋參和花椒提取物,對比小鼠力竭時間,從而研究花椒葉多酚活性成分的抗疲勞作用[17]。

    2 結果與分析

    2.1 花椒葉中多酚提取單因素實驗

    2.1.1 乙醇濃度對花椒葉中多酚得率的影響

    多酚的提取可以使用的有機物很多,例如甲醇、乙醇、乙酸、乙酸乙酯和丙酯,一種或者幾種有機物同時使用,考慮到提取的多酚用于食用,容易造成有機物在多酚中殘留,所以本研究使用乙醇作為有機溶劑,以便后期清除有機溶劑[18]。

    圖1 乙醇濃度對花椒葉中多酚得率的影響Fig.1 The effect of ethanol concentration on the yield of polyphenols from Zanthoxylum bungeanum Maxim. leaves

    由圖1可知,提取液乙醇濃度不同,花椒葉中的多酚得率也不同,并且花椒葉多酚得率隨著乙醇濃度的增加先增加后減少。當乙醇濃度為70%時,花椒葉中多酚的提取率達到最大,為70%。當乙醇濃度超過70%時,花椒葉提取的多酚得率逐漸下降。這是由于花椒葉中的多酚類物質(zhì)具有很強的極性,當乙醇的濃度不斷升高時,溶液中的多酚溶解度也不斷升高,然而強極性的多酚反而不利于溶解,所以,高濃度的乙醇溶液不利于花椒葉中多酚的提取[19]。本實驗將70%的乙醇濃度作為提取多酚的最佳條件。

    圖2 超聲波功率對花椒葉中多酚得率的影響Fig.2 The effect of ultrasonic power on the yield of polyphenols from Zanthoxylum bungeanum Maxim. leaves

    2.1.2 超聲波功率對花椒葉中多酚得率的影響

    由圖2可知,隨著超聲波功率的增加,花椒葉多酚的得率先增加后降低。超聲波功率小于200 W時,花椒葉中多酚得率隨著超聲波功率的增加而增加,這是因為當超聲波功率增大時,多酚物質(zhì)更容易溶解于乙醇溶液中。當超聲功率大于200 W時,隨著超聲波功率的增大,花椒多酚的得率反而下降,這是因為當超聲波功率過大時,會破壞溶液中多酚的物質(zhì)結構,導致多酚得率下降。

    2.1.3 超聲波時間對花椒葉中多酚得率的影響

    由圖3可知,花椒葉中多酚的得率隨著超聲波時間的增加先增加后降低,超聲波時間在20 min以前,增長速率快;在20~30 min之間,花椒葉中多酚的得率增長速度慢。當超聲波時間超過30 min時,提取的多酚得率降低。超聲波時間的增長能夠充分地磨碎花椒葉的組織,使得花椒葉中的多酚物質(zhì)能夠充分地溶解出來。當超聲波時間超過30 min時,反應儀器內(nèi)的溫度升高,破壞了花椒葉中的多酚,導致多酚的得率降低。

    圖3 超聲波時間對花椒葉中多酚得率的影響Fig.3 The effect of ultrasonic time on the yield of polyphenols from Zanthoxylum bungeanum Maxim. leaves

    2.1.4 料液比對花椒葉中多酚得率的影響

    由圖4可知,料液比不同,花椒葉中多酚的得率也不同,當料液比為1∶10~1∶20時,花椒葉中多酚的得率上升。當料液比為1∶20~1∶30時,花椒葉中多酚的得率開始下降,這是由于當花椒葉濃度過低時,不利于花椒葉中多酚的提取,除此之外,過多的料液會造成后期回收工作的加大,所以選取1∶20作為花椒葉多酚提取的最佳比例。

    圖4 料液比對花椒葉中多酚得率的影響Fig.4 The effect of the ratio of solid to liquid on the yield of polyphenols from Zanthoxylum bungeanum Maxim. leaves

    2.2 花椒葉提取物抗疲勞活性研究

    由圖5可知,飼喂西洋參和花椒提取物均能延長小鼠的力竭時間。飼喂無菌水時,小鼠的力竭時間為40 min;飼喂西洋參時,小鼠的力竭時間為64 min;飼喂花椒提取物時,小鼠的力竭時間為70 min。研究結果表明,西洋參和花椒提取物均有一定的抗疲勞功效,且飼喂花椒提取物的小鼠的抗疲勞功效高于西洋參。

    圖5 花椒葉提取物抗疲勞活性研究

    3 小結

    花椒葉是花椒種植過程中最大的副產(chǎn)物,一直以來,我們對花椒葉的利用主要為鮮食。隨著科學技術的發(fā)展,花椒葉的利用逐漸豐富多樣,目前花椒葉加工方式有花椒葉茶、花椒葉豆瓣醬、花椒葉沐浴露、花椒葉空氣清新劑等?;ń啡~的深加工發(fā)展緩慢,作為富含植物多酚的花椒葉在多酚的提取方面有著巨大的潛力,本研究基于此對花椒葉多酚的提取工藝進行了優(yōu)化,旨在拓寬花椒的產(chǎn)業(yè)鏈,增加花椒種植戶收入,同時為我國植物多酚的開發(fā)提供了新思路。

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