細(xì)胞薄片組織工程及其臨床轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展

俞杭，王經(jīng)琳，2，任昊楨，2，施曉雷，2

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué) 中西醫(yī)結(jié)合鼓樓臨床醫(yī)學(xué)院，江蘇 南京 210046；2.南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院 普外科，江蘇 南京 210008)

1 細(xì)胞薄片組織工程

組織工程的概念是由Vacanti等提出[1]。在醫(yī)學(xué)方面，組織工程的目的是在生長因子存在的情況下將可生物降解的支架與細(xì)胞結(jié)合起來，期望細(xì)胞和組織作為藥物直接治療疾病。已有研究表明一些人類器官組織的構(gòu)建已取得了成功，如在老鼠背上構(gòu)建人耳以及心臟瓣膜[2]、角膜[3]、骨[4]和軟骨[5]等組織。有研究人員提出的“細(xì)胞薄片組織工程”[6]是一種無支架的細(xì)胞薄片組織工程技術(shù)，該技術(shù)可以避免支架材料和胰酶帶來的不良影響以及獲取過程中對細(xì)胞的損害。相比于細(xì)胞懸液的直接輸注，細(xì)胞薄片可以直接覆蓋在靶器官或組織上，這極大地提高了細(xì)胞療法的治療效果。獲得的細(xì)胞薄片也可通過組織工程技術(shù)進(jìn)一步疊加組裝形成3D結(jié)構(gòu)，即高細(xì)胞密度、功能化的組織。細(xì)胞薄片組織工程已在人類多個(gè)器官進(jìn)行臨床應(yīng)用，包括心臟[7]、角膜[8]、食道[9]、牙周[10-11]、軟骨[12]以及肝臟[13]。

2 細(xì)胞薄片的制備和性質(zhì)

2.1 細(xì)胞薄片的制備和收獲

由于培養(yǎng)的細(xì)胞通常通過內(nèi)源性黏附蛋白(細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞膜受體)堅(jiān)固地附著在細(xì)胞培養(yǎng)皿上，因此必須去除這些黏附蛋白才能從培養(yǎng)皿表面獲取細(xì)胞。一般使用化學(xué)分離法和物理分離法兩種方法來分離貼壁細(xì)胞?；瘜W(xué)分離法即在培養(yǎng)皿中加入蛋白水解酶來消化細(xì)胞，使之脫落。但一般的非特異性酶消化后會(huì)沉積在細(xì)胞膜以及培養(yǎng)皿表面，這種不受控制的蛋白水解會(huì)損害多種重要的細(xì)胞功能，例如細(xì)胞增殖、黏附、存活和遷移。由于使用該方法最終得到的是單細(xì)胞懸液，所以其中組織形成和植入所需的內(nèi)源性細(xì)胞之間的聯(lián)合都已被破壞。這種方法的缺點(diǎn)是當(dāng)在體內(nèi)注射懸浮細(xì)胞時(shí)，由于黏附蛋白的破壞阻止了細(xì)胞與宿主組織的結(jié)合并降低了細(xì)胞的整體活性[14-15]，因此酶處理后的細(xì)胞會(huì)被排除在靶部位，極大地降低了療效。另外還有使用乙二胺四乙酸(EDTA)作為螯合劑去除整合素和細(xì)胞結(jié)合蛋白中的鈣離子來釋放細(xì)胞[16]，這種方法不需要外源性的酶作用，但卻存在EDTA細(xì)胞毒性[17]。而物理分離法即是采用一種“支架”技術(shù)，該技術(shù)能為細(xì)胞生長提供一個(gè)特定的環(huán)境，并且細(xì)胞的原有結(jié)構(gòu)不會(huì)被破壞，但該技術(shù)仍存在一些限制，如細(xì)胞向支架內(nèi)遷移不足，細(xì)胞和營養(yǎng)物質(zhì)對支架的滲透性較差。此外，支架的降解會(huì)引起炎癥，對支架植入后在體內(nèi)的穩(wěn)定性有所影響[18-19]。

針對這些問題，有研究人員提出了一種制備、收獲和移植細(xì)胞薄片的無支架組織工程，即所謂的“細(xì)胞薄片組織工程”[20]，它是將培養(yǎng)的細(xì)胞制備成細(xì)胞薄片的形式，通過把細(xì)胞薄片移植到受損組織或器官上來達(dá)到治療效果。該技術(shù)利用了微小的溫度變化來獲取培養(yǎng)的細(xì)胞，而且無需蛋白水解酶的處理，不會(huì)發(fā)生細(xì)胞或蛋白質(zhì)的破壞。這種細(xì)胞薄片技術(shù)需要使用獨(dú)特的細(xì)胞培養(yǎng)皿，即用溫度敏感型聚合物聚N-異丙基丙烯酰胺(PIPAAm)的薄層敷在聚苯乙烯培養(yǎng)皿上[21-22]，覆蓋后的培養(yǎng)皿稱為溫度敏感型細(xì)胞培養(yǎng)皿(TRCD)。PIPAAm的臨界溶液溫度為32 ℃，制備細(xì)胞薄片時(shí)只需將細(xì)胞在37 ℃條件下在TRCD上培養(yǎng)，當(dāng)把環(huán)境溫度降至32 ℃以下時(shí)(一般為20 ℃)，TRCD表面的PIPAAm聚合物會(huì)迅速從疏水變?yōu)橛H水，水介質(zhì)在低于32 ℃的溫度下自發(fā)滲透到黏附細(xì)胞和TRCD之間的PIPAAm聚合物界面，在水合作用下PIPAAm快速水化并溶脹，將細(xì)胞表面與TRCD表面分開。采用這種方法無需任何酶處理即可在TRCD上獲得貼壁的培養(yǎng)細(xì)胞，而且是連續(xù)完整的活細(xì)胞薄片。這種細(xì)胞薄片技術(shù)是一種溫和、無干擾的采集細(xì)胞的獨(dú)特方法，能夠從TRCD中采集貼壁細(xì)胞，而不會(huì)損害細(xì)胞外基質(zhì)、細(xì)胞表面蛋白、細(xì)胞受體以及對細(xì)胞生存和功能至關(guān)重要的細(xì)胞間蛋白。

2.2 細(xì)胞薄片組織工程細(xì)胞的活性與表征

細(xì)胞療法的關(guān)鍵是細(xì)胞進(jìn)入人體后所具有的活性，這關(guān)系到其發(fā)揮治療作用的強(qiáng)弱。Nagamoto等[23]在24孔板中培養(yǎng)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSCs)誘導(dǎo)的人肝細(xì)胞樣細(xì)胞，2 d后收獲的細(xì)胞薄片大約有8×105個(gè)細(xì)胞，且經(jīng)過HE染色以及驗(yàn)證特征性標(biāo)志物表達(dá)等實(shí)驗(yàn)證實(shí)，收獲的細(xì)胞薄片在細(xì)胞活性以及特征標(biāo)志物的表達(dá)上都與普通細(xì)胞培養(yǎng)皿上培養(yǎng)的細(xì)胞相似，即使在溫度降低到27 ℃時(shí)收獲的細(xì)胞薄片，也并不影響其活性與特征性標(biāo)志物的表達(dá)。這表明細(xì)胞薄片在細(xì)胞回收率以及細(xì)胞活性和性能等方面都滿足了細(xì)胞療法的需要。Forghani等[24]對人體脂肪來源干細(xì)胞(hASCs)所形成的細(xì)胞薄片進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)、存活率、增殖和分化潛力的評估，結(jié)果顯示hASCs細(xì)胞薄片在達(dá)到80%～90%匯合度之前仍在增殖。獲取細(xì)胞薄片后將其重新接種在常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)皿上，hASCs依舊能黏附并增殖。研究人員通過檢測hASCs細(xì)胞薄片的成骨能力來證明其分化潛力，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)的第14天，hASCs細(xì)胞薄片中骨鈣素的表達(dá)相較于普通培養(yǎng)皿培養(yǎng)的hASCs明顯增加。同樣，茜素紅染色發(fā)現(xiàn)hASCs細(xì)胞薄片中鈣的沉積也呈明顯增高趨勢。有研究人員構(gòu)建了人角質(zhì)細(xì)胞-成纖維細(xì)胞細(xì)胞薄片[25]，在細(xì)胞活性和增殖性能方面都予以了證明，并通過HE以及Vimintin染色證實(shí)了收獲的細(xì)胞薄片中相關(guān)細(xì)胞標(biāo)志物的存在，即細(xì)胞薄片具有單純細(xì)胞所具有的表征。以上結(jié)果表明細(xì)胞薄片作為新興的細(xì)胞移植療法是可行的，結(jié)合其對于靶器官強(qiáng)大的定植效果，細(xì)胞薄片相較于懸浮細(xì)胞療法更具優(yōu)勢。

3 細(xì)胞薄片的應(yīng)用

細(xì)胞薄片組織工程的優(yōu)勢在人體細(xì)胞移植的臨床研究中已得到證實(shí)，TRCD的使用使我們能夠在保留重要的細(xì)胞間連接和相關(guān)的細(xì)胞外基質(zhì)的情況下獲得治療性細(xì)胞[26]。保存下來的細(xì)胞外基質(zhì)起到了類似“膠水”的作用，將細(xì)胞膜與宿主細(xì)胞緊密地結(jié)合在一起。因此，細(xì)胞移植可以在不使用人工支架或縫合等額外治療的情況下完成。有了這些優(yōu)點(diǎn)，人類對基于細(xì)胞薄片的組織再生的臨床研究又近了一步。

3.1 基于細(xì)胞薄片的肝臟組織工程

由于供肝短缺嚴(yán)重制約了原位肝移植的發(fā)展，因此肝再生療法已成為治療肝病的一種新的有前景的治療方法，由此發(fā)現(xiàn)了通過將新鮮收獲的肝細(xì)胞注射到脾臟或門靜脈內(nèi)來研究使用肝細(xì)胞的細(xì)胞療法[27]。在一項(xiàng)研究[28]中，從表達(dá)人α1抗胰蛋白酶(hA1AT)的轉(zhuǎn)基因小鼠中分離出肝細(xì)胞，將肝組織片移植到帶血管的小鼠皮下組織并且通過肝門靜脈注射肝細(xì)胞懸液，比較兩種方法的體內(nèi)細(xì)胞存活率以及小鼠血清中hA1AT水平，以測量移植細(xì)胞的活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，肝細(xì)胞薄片組中移植細(xì)胞分泌的蛋白質(zhì)濃度顯著高于細(xì)胞懸液注射組。這表明細(xì)胞薄片技術(shù)可以有效地將治療細(xì)胞定位于具有針對肝臟再生的靶向組織，而且通過TRCD培育出來的肝細(xì)胞薄片包含有保持肝臟特異性功能的結(jié)構(gòu)，如橋粒、縫隙連接和膽小管。此外，來自于人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞或iPSCs的肝細(xì)胞樣細(xì)胞也可被制造成細(xì)胞薄片[23,29]。由于活組織由多種細(xì)胞類型組成，細(xì)胞間的相互作用影響和維持生理功能和活動(dòng)的發(fā)展，特別是在正常培養(yǎng)條件下，內(nèi)皮細(xì)胞為肝細(xì)胞提供合適的環(huán)境，由此可以通過一種共培養(yǎng)技術(shù)將內(nèi)皮細(xì)胞與肝細(xì)胞共同培養(yǎng)以在體外支持肝細(xì)胞的功能。通過這些技術(shù)，可移植的組織工程肝臟會(huì)成為治療肝病的另一種選擇。

3.2 基于細(xì)胞薄片的心臟組織工程

成肌細(xì)胞膜可以用于治療嚴(yán)重的心臟病，因?yàn)橐浦驳募?xì)胞膜結(jié)構(gòu)提供了旁分泌效應(yīng)，這種旁分泌效應(yīng)可以持續(xù)且局部地傳遞到受損組織。另外，一些研究集中在構(gòu)建組織工程心臟作為再生醫(yī)學(xué)或組織模型中的可移植心臟，以發(fā)現(xiàn)治療心臟疾病的藥物[30]。在細(xì)胞薄片技術(shù)的幫助下，細(xì)胞膜之間能快速建立縫隙連接以及多個(gè)細(xì)胞膜的脈動(dòng)同步[31]。有研究將細(xì)胞薄片結(jié)構(gòu)移植到梗死的大鼠心臟上，心肌細(xì)胞通過橋接從移植物遷移到宿主心臟上，并且顯示了形態(tài)和功能上的聯(lián)系[30]。顯然，與直接細(xì)胞注射相比，心肌細(xì)胞薄片移植顯示出更好的細(xì)胞存活率和植入性。

將多個(gè)細(xì)胞薄片疊加可以產(chǎn)生3D心肌組織，但是在長期的體外培養(yǎng)中會(huì)發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重的壞死。所以為了大規(guī)模的生產(chǎn)細(xì)胞薄片結(jié)構(gòu)，需要讓這些組織血管化以提供足夠的氧氣和營養(yǎng)[32]。通常情況下受者的血管侵入移植組織后，氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)被輸送到組織內(nèi)，然而移植的組織往往在新生血管形成前就已壞死。因此有研究發(fā)現(xiàn)把移植組織與內(nèi)皮細(xì)胞(ECs)共培養(yǎng)是一種促進(jìn)血管形成的很有前途的方法，該方法是將ECs夾在兩個(gè)細(xì)胞薄片之間來形成一個(gè)多層細(xì)胞薄片結(jié)構(gòu)，ECs可以在這個(gè)結(jié)構(gòu)中形成血管樣分支網(wǎng)絡(luò)，這就促進(jìn)了移植后血管化以及移植后組織與宿主血管的連接[33]。

3.3 角膜細(xì)胞薄片組織工程

角膜疾病是全球第5大致盲原因，此類疾病中的大多數(shù)都可以通過角膜移植來治愈，但可移植的角膜數(shù)量限制了這個(gè)方法。最初用于眼表重建的組織工程學(xué)方法是使用羊膜[34]或纖維蛋白凝膠，但由于羊膜和纖維蛋白凝膠都是生物材料，不能排除感染的風(fēng)險(xiǎn)，并且術(shù)后羊膜的存在會(huì)降低透明度，影響患者恢復(fù)視力，因此已很少使用。為了提供可移植角膜的替代品，可以通過組織工程技術(shù)生產(chǎn)的活體角膜替代物在細(xì)胞表型和組織結(jié)構(gòu)方面取得一些進(jìn)展，旨在模仿體內(nèi)的角膜替代物。已有研究描述了使用未轉(zhuǎn)化的人角膜上皮細(xì)胞生產(chǎn)三維組織工程化角膜的方法[3]，在TRCD上降溫收獲細(xì)胞薄片后可以直接放置在宿主角膜基質(zhì)上，不需要縫合就能快速黏附[35]，培養(yǎng)出的細(xì)胞薄片顯示出適當(dāng)?shù)慕M織學(xué)以及細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)成分和整合素的表達(dá)。移植后，細(xì)胞薄片可以覆蓋整個(gè)角膜而且表面清晰光滑。有研究進(jìn)一步提出了用自體口腔黏膜上皮細(xì)胞作為重建角膜表面的細(xì)胞來源[36]，在TRCD上培養(yǎng)的口腔黏膜上皮更接近于天然角膜上皮而不是天然口腔黏膜上皮，在人類患者身上進(jìn)行移植的結(jié)果也表明喪失的視力已經(jīng)恢復(fù)，角膜透明性保持了1年以上[36]。由于細(xì)胞薄片的構(gòu)成僅為細(xì)胞與ECM[33]，并不含有其它異體材料，所以細(xì)胞薄片并不屬于生物材料范疇，在細(xì)胞薄片培養(yǎng)與收獲的過程中接觸的PIPAAm也具有良好的生物相容性[37]，結(jié)合以上優(yōu)勢，細(xì)胞薄片植入體內(nèi)后不會(huì)有感染的風(fēng)險(xiǎn)。利用人體自身細(xì)胞所形成的細(xì)胞薄片，更是排除了異體排斥反應(yīng)的可能性。

3.4 內(nèi)鏡黏膜下剝離術(shù)(ESD)治療后食管重建

ESD切除淺表食管腫瘤正變得越來越普遍，然而大規(guī)模的食管ESD通常需要隨后的多次球囊擴(kuò)張來預(yù)防術(shù)后食管狹窄，因此有研究提出使用內(nèi)鏡下組織工程化自體口腔黏膜上皮細(xì)胞片移植預(yù)防ESD后食管狹窄的形成，即將黏膜上皮細(xì)胞移植到ESD導(dǎo)致的潰瘍創(chuàng)面上[38]。細(xì)胞薄片可以很容易地黏附到移植部位，無需縫合或使用其他黏合劑，而且自體口腔黏膜上皮細(xì)胞薄片移植可以促進(jìn)切除區(qū)域的上皮化以及防止食管狹窄。另外，移植的細(xì)胞薄片除了具有旁分泌作用外，還可以作為細(xì)胞來源促進(jìn)組織再生。已有臨床研究[39]顯示,移植細(xì)胞薄片后食管潰瘍部位早期再上皮化并且食管狹窄情況減少。

3.5 牙周膜再生

牙周韌帶(PDL)作為連接牙齒和牙槽骨的支撐組織起著重要的作用，PDL來源的細(xì)胞在骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基中具有誘導(dǎo)牙骨質(zhì)形成的能力，因此從PDL中獲取的細(xì)胞具有再生牙周組織和牙骨質(zhì)的能力。在犬類模型中，PDL細(xì)胞薄片促進(jìn)了牙槽骨和牙骨質(zhì)的再生[10]。在一項(xiàng)人類臨床研究中，從智齒中獲得PDL細(xì)胞，通過降低溫度至20 ℃可以收獲用TRCD培養(yǎng)的PDL細(xì)胞薄片，為了提供大量的細(xì)胞，通常在骨下缺損附近植入3層細(xì)胞薄片，細(xì)胞薄片療法在牙周膜再生方面的安全性和有效性已在9例病例中得到證實(shí)[40]。

3.6 用于腎臟再生的細(xì)胞薄片組織工程技術(shù)

已有研究[41]報(bào)道人類肝細(xì)胞生長因子(HGF)轉(zhuǎn)基因間皮細(xì)胞片作為大鼠腎纖維化模型治療單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)的方法，將使用分泌HGF的細(xì)胞薄片的治療效果與非轉(zhuǎn)基因間皮細(xì)胞片和HGF靜脈內(nèi)給藥(對照組)進(jìn)行了比較，與對照組相比，在UUO大鼠中，分泌HGF的細(xì)胞層顯著抑制了腎纖維化，這就支持了細(xì)胞薄片在傳遞分泌HGF的細(xì)胞以及使細(xì)胞在植入組織局部后持續(xù)地分泌HGF抑制腎纖維化方面的價(jià)值。此外，研究人員[42]在體外將能夠分泌重要的HGF和VEGF的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)片直接移植到大鼠腎臟缺血再灌注模型的腎臟表面，將使用BMSC片的治療效果與靜脈注射懸浮的BMSC進(jìn)行了比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)移植細(xì)胞以BMSC細(xì)胞薄片的形式輸送比靜脈注射懸浮細(xì)胞的保留時(shí)間更長，并且BMSC細(xì)胞薄片保護(hù)了整個(gè)腎臟的微血管密度，抑制了腎功能障礙。

4 組織工程細(xì)胞薄片在臨床研究中存在的問題

4.1 種子細(xì)胞的選擇

作為一種新興的細(xì)胞療法，選擇合適的種子細(xì)胞是細(xì)胞薄片組織工程的前提。為了避免異體細(xì)胞導(dǎo)致的排斥反應(yīng)應(yīng)盡量采取自體細(xì)胞，且獲取該細(xì)胞對人體創(chuàng)傷較小，比如通過口腔黏膜上皮細(xì)胞活檢獲取的種子細(xì)胞[43]。近年來隨著對干細(xì)胞的研究越來越深入，也為選擇種子細(xì)胞提供了新的參考和方向。iPSCs作為干細(xì)胞技術(shù)的一種，與經(jīng)典的胚胎干細(xì)胞和體細(xì)胞核移植技術(shù)不同，iPSCs技術(shù)不使用胚胎細(xì)胞或卵細(xì)胞，因此不會(huì)涉及到倫理問題。此外，利用iPSCs技術(shù)可以用病人自己的體細(xì)胞制備專有的干細(xì)胞，從而大大降低了免疫排斥反應(yīng)發(fā)生的可能性。Nagamoto等[23]利用iPSCs來源的肝細(xì)胞薄片治療急性肝衰竭小鼠，Mandai等[44]利用iPSCs誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜細(xì)胞來治療黃斑變性。

4.2 組織血管化的形成

如何建立功能化的血管通道仍是細(xì)胞薄片組織工程面臨的一個(gè)關(guān)鍵問題[45]，大部分正常組織中，由于氧氣和其他營養(yǎng)元素在組織中被動(dòng)擴(kuò)散所能達(dá)到的極限大約在100 μm，因此細(xì)胞與毛細(xì)血管的距離都在100 μm以內(nèi)，而細(xì)胞薄片雖然能制造出多層三維結(jié)構(gòu)組織，但仍不能擺脫這一限制。Sakai等[46]通過將肝細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)獲得肝細(xì)胞/成纖維細(xì)胞細(xì)胞薄片，將該細(xì)胞薄片移植入小鼠皮下獲得血管化皮下人肝組織。Shimizu等[47]通過多次手術(shù)來解決這個(gè)限制，首先移植3層細(xì)胞薄片進(jìn)入目標(biāo)組織，間隔1 d使原部位的毛細(xì)血管生長入細(xì)胞薄片結(jié)構(gòu)內(nèi)，接著再植入3層細(xì)胞薄片于原移植部位上并重復(fù)該步驟，以此獲得了1 mm厚度且具有新生毛細(xì)血管網(wǎng)的三維細(xì)胞薄片組織。因此，如何構(gòu)建具有血管功能性的細(xì)胞薄片仍是細(xì)胞薄片工程在臨床應(yīng)用上的一個(gè)難點(diǎn)。

4.3 細(xì)胞薄片的力學(xué)性能

目前已能構(gòu)建具有一定功能與結(jié)構(gòu)的細(xì)胞薄片，但在薄片強(qiáng)度方面仍存在不足，在重建一些較高強(qiáng)度的器官如骨、血管和筋膜等仍受到限制。為解決這一限制，Ayala等[48]通過將人間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞薄片與可在人體內(nèi)降解的藻酸鹽凝膠相結(jié)合植入全層腹壁缺損大鼠體內(nèi)，8周后發(fā)現(xiàn)大鼠疝氣的復(fù)發(fā)得到了阻止，并且形成了新的組織和血管網(wǎng)絡(luò)。因此，對于增加細(xì)胞薄片的強(qiáng)度和力學(xué)性能的方法還需要進(jìn)一步發(fā)掘和優(yōu)化。

4.4 細(xì)胞薄片的制備到臨床應(yīng)用

基于細(xì)胞薄片的臨床應(yīng)用目前已取得巨大進(jìn)展，細(xì)胞薄片在多種疾病的治療中均有顯著的療效。細(xì)胞薄片從制備到應(yīng)用最關(guān)鍵的一步即為TRCD的構(gòu)建，為了實(shí)現(xiàn)細(xì)胞薄片在臨床治療中的廣泛應(yīng)用，應(yīng)大規(guī)模構(gòu)建TRCD，但納米級(jí)的接枝厚度在便于細(xì)胞薄片收獲的同時(shí)也限制了TRCD的構(gòu)建。因此，細(xì)胞薄片的大規(guī)模制備是臨床治療應(yīng)用中一個(gè)亟需解決的問題。

5 總結(jié)與展望

細(xì)胞薄片組織工程技術(shù)在再生醫(yī)學(xué)和組織建模上與目前臨床常用的細(xì)胞療法相比，已有其獨(dú)特的特征和優(yōu)勢(表1)。納米級(jí)的PIPAAm為培養(yǎng)底物提供了熱響應(yīng)特性，這就可以通過溫度來調(diào)節(jié)細(xì)胞的黏附和分離。重要的是，這些細(xì)胞薄片可以保留完整的細(xì)胞間連接和相關(guān)的ECM?；谶@些性質(zhì)，細(xì)胞薄片療法可以將各種治療細(xì)胞輸送到受損部位，并已在一些人類臨床研究中應(yīng)用。除了已有的人類臨床研究，細(xì)胞薄片技術(shù)的進(jìn)步有望再拓寬再生醫(yī)學(xué)的應(yīng)用領(lǐng)域，并且使我們能夠生產(chǎn)出用于治療難治性疾病的人類細(xì)胞組織模型。因此，細(xì)胞薄片組織工程良好的應(yīng)用前景值得期待。

表1 3種療法情況介紹