吳 瑞,馬 維,劉 路,楊 佼,馬 俊*
(1.畢節(jié)市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所,貴州畢節(jié) 551700;2.畢節(jié)市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)檢中心,貴州畢節(jié) 551700)
關(guān)鍵字:野生白參;人工栽培;畢節(jié)地區(qū)
白參菌(Schizophyllum commoner)屬裂褶菌科,別名裂褶菌、白蕈、樹花、雞毛菌、八擔(dān)柴,隸屬于擔(dān)子菌亞門,傘菌目,裂褶菌科[1],是一種食藥兩用菇。《藥用真菌》等籍記載,此菌“性平,味甘,氣味(根)苦、微寒、無毒”。菇體呈白色至灰白色,有絨毛,扇形或腎形,質(zhì)地脆嫩,味道清香,鮮美爽口。白參菌食用價(jià)值高,質(zhì)嫩味美,具有特殊濃郁香味,中醫(yī)理論認(rèn)為,其性平,具有滋補(bǔ)、鎮(zhèn)靜作用[2]。據(jù)《中國(guó)藥用菌生產(chǎn)與產(chǎn)品開發(fā)》中記載,白參菌子實(shí)體中含有31種無機(jī)元素,包括5種常量元素和26種微量元素,其中人體必需的7種微量元素含量比較高,抗癌元素硒含量為0.242 μg/g,可作為硒源加以利用。據(jù)云南省農(nóng)科院測(cè)試中心對(duì)人工栽培的白參菌分析,白參菌中人體必需的8種氨基酸總含量達(dá)17.04%,并富含鋅、鐵、鉀、鈣、磷、硒、鍺,是一類營(yíng)養(yǎng)比較全面的真菌,且白參菌熱量不高,適合作為肥胖人士的食材,受到很多人的追捧。
同時(shí),白參菌具有較高的藥用價(jià)值,富含多糖、蛋白質(zhì)、麥角甾醇、裂褶菌黃素、還含有多種酶[3-4]。豐富的蛋白質(zhì)可以增強(qiáng)人體免疫功能,具有強(qiáng)身健體的作用。多糖對(duì)抗癌具有一定的作用,具滋補(bǔ)強(qiáng)身的功效。特別對(duì)小兒盜汗、婦科疾病、神經(jīng)衰弱、精神不振、頭昏耳鳴等癥療效明顯。白參菌子實(shí)體、菌絲體及發(fā)酵液中均含有裂褶菌胞外多糖,裂褶菌多糖可有效恢復(fù)衰老小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力;提高其血清、肝和腦中SOD活性,減少M(fèi)DA在體內(nèi)積累,抑制腦中MAO活性,降低肝、腦細(xì)胞線粒體DNA相對(duì)含量[5]。裂褶菌發(fā)酵胞內(nèi)多糖具有祛痰作用,可應(yīng)用到臨床醫(yī)學(xué)研究上[6]。白參菌子實(shí)體和菌絲體提取液對(duì)金黃色葡萄球菌(Staphy lococcus aureus)、大腸桿菌(Escherichia coli)、痢疾桿菌(dysentery bacilli)、枯草桿菌(Bacillus subtilis)以及乙型副傷寒沙門氏菌(Sal monella paratyphi B)具有明顯的抑制作用[7-8]。
白參菌生長(zhǎng)于全球各地,分布較為廣泛,我國(guó)23個(gè)省份都有種植。畢節(jié)地區(qū)氣候特點(diǎn)獨(dú)特,地方白參菌資源區(qū)域特色顯著,生物多樣性豐富,畢節(jié)地方野生白參常見于路邊斷木,生長(zhǎng)于夏季雨后,受制于斷木營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)單一及著生方式,野生白參菌子實(shí)體個(gè)體較小,菌蓋表面多為白色,部分灰色或深灰色,群生或疊生。肉質(zhì)單薄,口感較柴,商品性及產(chǎn)量較差。此外,野生白參菌在生長(zhǎng)過程中菌蓋表面難免有樹葉、泥沙、昆蟲糞便覆蓋,食用前清洗困難。由于野生環(huán)境不可控,野生白參菌成熟度及成熟時(shí)間不一致,產(chǎn)量低,且采收難度大,難以滿足市場(chǎng)需求。探索畢節(jié)地區(qū)白參菌人工馴化培養(yǎng),對(duì)畢節(jié)農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整和延伸具有重要促進(jìn)作用,可為食用菌產(chǎn)業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展提供新的經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)點(diǎn)。
畢節(jié)地屬黔西北,全境為喀斯特地貌,山地較多,北亞熱帶季風(fēng)濕潤(rùn)氣候,高原山地氣候明顯,降雨量充沛,立體氣候突出。年平均氣溫13.0℃,年平均最高氣溫17℃,年平均最低氣溫9℃。境內(nèi)最高海拔2900.6 m,最低海拔457 m,海拔相對(duì)高差大,垂直氣候變化尤為明顯,山上山下冷暖不同,高原盆地寒熱各異,利于多種動(dòng)植物生長(zhǎng),生物資源多樣。
儀器:滅菌鍋、冰箱、搖床、恒溫培養(yǎng)箱、電磁爐、超凈工作臺(tái)、平板、錐形瓶。藥品:葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4、MgSO4等均為分析純。
菌種分為母種,原種和栽培種。菌種是白參菌產(chǎn)量和品質(zhì)的重要保障,生產(chǎn)過程中,要優(yōu)先選擇菌絲粗壯、整齊而且沒有感染的菌種,其次要選擇商品性、一致性、穩(wěn)定性好的菌種。
3.1.1 母種培養(yǎng)基制作
培養(yǎng)基的配方:馬鈴薯20 g,葡萄糖15 g,蛋白胨2 g,磷酸二氫鉀2 g,硫酸鎂1.5 g。配置培養(yǎng)基并滅菌,冷卻后備用。
3.1.2 平板制作
培養(yǎng)基制作完成后分裝在三角瓶?jī)?nèi)在高壓鍋內(nèi)滅菌。高壓鍋內(nèi)補(bǔ)足無菌水到規(guī)定的水位,將滅菌筐放入,蓋上鍋蓋,擰緊螺栓,設(shè)定溫度為121℃,滅菌時(shí)間為20 min。滅菌完成后,準(zhǔn)備好規(guī)格90 mm培養(yǎng)皿,在超凈工作臺(tái)內(nèi),將三角瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基依次倒入培養(yǎng)皿內(nèi),厚度為2 mm,封裝好后在超凈臺(tái)內(nèi)冷卻備用。
3.1.3 母種制備
將收集到的畢節(jié)地方野生白參菌資源,用保鮮膜保濕或樣品采集盒帶回實(shí)驗(yàn)室,并于當(dāng)天進(jìn)行接種試驗(yàn)。采回來的樣品在接種前先用自來水沖洗,盡量洗凈樣品上的土壤、雜草、干木屑等雜質(zhì),洗凈后置于干凈的培養(yǎng)皿中備用。在接種前將超凈工作臺(tái)紫外滅菌30 min,將待接種的樣品轉(zhuǎn)移至超凈工作臺(tái)上,在超凈工作臺(tái)臺(tái)面擺放滅菌后的無菌濾紙,將洗凈的白參菌用鑷子夾到無菌濾紙上,用滅菌的鑷子、刀片將朵的白參菌切成2 cm×2 cm的片狀,75%酒精30 s,0.1%的HgCl230 s,之后用無菌水清洗2~3次,放置到無菌濾紙上吹干水分,再轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基上。接種完成后,在無菌培養(yǎng)室內(nèi)黑暗環(huán)境培養(yǎng),室溫控制在22℃~26℃,菌絲長(zhǎng)滿即可用于接原種。
3.2.1 原種培養(yǎng)基制備
原種培養(yǎng)基的配置:小麥90%、麥麩9%、石膏1%。根據(jù)原種數(shù)量需求和原種培養(yǎng)基配方計(jì)算用量,稱量所需的小麥、麥麩、石膏。預(yù)處理:將稱量好的小麥按比例加水泡發(fā)12 h,麥麩按比例少量多次加水?dāng)嚢璩浞纸瘢粶?zhǔn)備規(guī)格800 ml聚丙烯原種瓶,將小麥、麥麩、石膏放在一起充分?jǐn)嚢韬笱b瓶;高壓滅菌60 min,設(shè)定溫度為122℃,滅完菌冷卻后備用。
3.2.2 原種制備
將野生白參菌菌株利用組織分離的方法接種在PDA培養(yǎng)基平板內(nèi),室溫25℃,避光培養(yǎng)10~12天,培養(yǎng)過程中注意及時(shí)挑除感染菌株后備用。原種培養(yǎng)基冷卻后于接種箱內(nèi)常規(guī)無菌操作接種,在超凈臺(tái)內(nèi)準(zhǔn)備菌絲長(zhǎng)滿的白參菌平板,用打孔器取4 mm×4 mm菌絲餅1塊,放于制作好原種培養(yǎng)基瓶口,接種完成后封口。菌絲長(zhǎng)滿菌袋,即可用于接栽培種。
3.3.1 栽培種培養(yǎng)基制作
栽培種培養(yǎng)基配方:雜木屑60%、小麥30%、麥麩9%和石膏1%。根據(jù)栽培種數(shù)量需求和栽培種培養(yǎng)基配方計(jì)算用量,稱量所需的雜木屑、小麥、麥麩、石膏。預(yù)處理:將稱量好的小麥按比例加水泡發(fā)12 h,麥麩按比例少量多次加水?dāng)嚢璩浞纸?;?zhǔn)備規(guī)格12 cm×24 cm×5 cm聚丙烯菌種袋,將木屑、小麥、麥麩、石膏放在一起攪拌充分后裝袋;高壓滅菌60 min,設(shè)定溫度為122℃,滅完菌冷卻后備用。
3.3.2 栽培種制備
接種及封口方式均與原種相同。接種完成后封口,設(shè)定好培養(yǎng)溫度,黑暗環(huán)境下培養(yǎng),長(zhǎng)滿菌袋,即可用于生產(chǎn)栽培。
白參菌屬中溫型菌,春季最佳栽培時(shí)間為3~5月份,秋季最佳栽培時(shí)間為9~10月份,各地區(qū)可根據(jù)當(dāng)?shù)貧鉁厍闆r而定。對(duì)季節(jié)總體要求為結(jié)合當(dāng)?shù)貧夂?、海拔,因地制宜確定最佳播種期。
雜木屑60%、小麥30%、麥麩9%和石膏1%。
根據(jù)栽培種數(shù)量需求和栽培種培養(yǎng)基配方計(jì)算用量;稱量所需的雜木屑、小麥、麥麩、石膏。預(yù)處理:將稱量好的小麥按比例加水泡發(fā)12 h,麥麩按比例少量多次加水?dāng)嚢璩浞纸?;?zhǔn)備規(guī)格12 cm×24 cm×5 cm聚丙烯菌種袋,將木屑、小麥、麥麩、石膏放在一起攪拌充分后裝袋;高壓滅菌120 min,設(shè)定溫度為122℃,滅完菌冷卻后備用。滅菌過程中操作員不能離崗,注意溫度變化是否出現(xiàn)異常以免發(fā)生危險(xiǎn)。滅菌結(jié)束后,將菌包置無菌室內(nèi)冷卻降溫,防止冷卻過程中空氣倒吸致雜菌混入。
在接種箱內(nèi),打開菌包蓋子,將菌種接于菌種袋口表面,蓋上菌蓋。全程須在酒精燈火焰保護(hù)下完成,可大大降低菌包感染率。
接種完成后,將菌袋排列在培養(yǎng)室的培養(yǎng)架上避光培養(yǎng),當(dāng)菌絲長(zhǎng)至料袋的1/3位置時(shí),可進(jìn)行翻堆,促進(jìn)出菌。
4.6.1 溫度
出菇可選擇一端出菇、兩端出菇、多處劃口出菇,開孔前,菌袋和開孔刀片均需消毒。菌袋開口后至原基形成一般需要4~6天。保持適宜的溫度、濕度和光線,促進(jìn)子實(shí)體正常發(fā)育。白參菌屬于中高溫型菇,菌絲和子實(shí)體的生長(zhǎng)對(duì)溫度適應(yīng)范圍較廣,白參菌菌絲8℃~34℃均能生長(zhǎng)。當(dāng)溫度在26℃~28℃時(shí),菌絲生長(zhǎng)速度相對(duì)最快,菌絲粗壯,邊緣整齊,氣生菌絲發(fā)達(dá),5~7天可長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿。白參菌子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育溫度較菌絲體階段低,子實(shí)體在10℃~35℃范圍均能分化和生長(zhǎng),子實(shí)體分化最適宜溫度是18℃~20℃,子實(shí)體生長(zhǎng)最適宜的溫度是22℃~25℃。低于20℃成熟延緩,若超過25℃時(shí),生長(zhǎng)速度快但子實(shí)體薄,商品價(jià)值降低。在出菇階段,溫度應(yīng)控制在22℃~25℃,不低于22℃,不高于25℃。氣溫高時(shí),做好通風(fēng),同時(shí)進(jìn)行室內(nèi)空間噴水。氣溫低于12℃時(shí),應(yīng)采取加溫措施。
4.6.2 濕度
白參菌有較好的耐旱能力,在實(shí)際生產(chǎn)種植中,菌棒含水量適應(yīng)范圍在50%~70%。在菌絲體生長(zhǎng)階段,培養(yǎng)室的空氣相對(duì)濕度控制在60%~65%較為理想。在白參菌子實(shí)體生長(zhǎng)階段,空氣相對(duì)濕度應(yīng)保持在80%~90%。在子實(shí)體原基分化時(shí)期,應(yīng)當(dāng)在每天早、晚向菌棒上方噴霧狀水1次,天氣太熱時(shí)中午加噴1次,雨天則少噴或不噴。2~3天后子實(shí)體展開進(jìn)入成長(zhǎng)期,不宜直噴于菇體上,濕度過大原基容易爛掉發(fā)霉。噴水時(shí),做到子實(shí)體小時(shí)少噴,子實(shí)體大時(shí)多噴。采收前一天停止噴水。
4.6.3 光照及通風(fēng)
子實(shí)體生長(zhǎng)期間需要的光線為散射光,在白參菌菌種培養(yǎng)及菌棒菌絲體營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)階段,需要在黑暗環(huán)境下培養(yǎng)。菌棒轉(zhuǎn)移到出菇房后,需要50 lx以上的散射光刺激下形成原基。白參菌子實(shí)體發(fā)育階段,300~500 lx光照有利于子實(shí)體成長(zhǎng)。白參菌子實(shí)體對(duì)光照比較敏感,適當(dāng)強(qiáng)度的散射光有利于子實(shí)體成長(zhǎng),光照過強(qiáng)時(shí)間過長(zhǎng),易導(dǎo)致子實(shí)體顏色變深、商品性變差。
培養(yǎng)房或出菇房?jī)?nèi),白參菌菌棒內(nèi)營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)階段,菌絲的生長(zhǎng)消耗大量氧氣,排出二氧化碳?xì)怏w。一段時(shí)間后,培養(yǎng)房?jī)?nèi)氧氣二氧化碳比例失衡,此時(shí),需要通風(fēng)實(shí)現(xiàn)對(duì)室內(nèi)外空氣進(jìn)行充分交換;當(dāng)室內(nèi)二氧化碳濃度過高時(shí),菌棒內(nèi)菌絲體或幼菇容易感染綠霉。在完成通風(fēng)換氣后,為了保持空氣濕度,根據(jù)白參菌生長(zhǎng)需要對(duì)室內(nèi)空間噴霧狀水,該環(huán)節(jié)在生產(chǎn)過程中應(yīng)當(dāng)作為管理重點(diǎn)。菇生長(zhǎng)需要充足的氧氣,每天通風(fēng)1~2次,保持室內(nèi)有清新的空氣。
4.7.1 采收及保鮮
白參菌進(jìn)入成熟期,子實(shí)體葉片接近平展、準(zhǔn)備散發(fā)孢子時(shí),子實(shí)體已有八成熟,可開始分批次采收。采收時(shí)間過早或過晚,將影響下一潮菇原基形成,影響產(chǎn)量和商品性。采收前一天應(yīng)停止噴水,避免因含水量太高在采收及運(yùn)輸過程中易折斷影響商品性。
采收完成后,應(yīng)用潔凈的小刀切掉多余的子實(shí)體基部及雜質(zhì)。第二潮菇采收方法同上,第一潮菇采收結(jié)束后,給予適當(dāng)散射光,按前述方法催蕾,開始下一潮培養(yǎng),溫度、光照等室內(nèi)環(huán)境設(shè)置同第一潮菇,通常第一潮到第三潮菇產(chǎn)量及商品性逐步遞減,第三潮菇產(chǎn)量和商品性較差,故一般只可采收2潮。采收后,要及時(shí)保鮮,防止菇體氧化老熟,影響品質(zhì)。4℃~5℃低溫下保鮮期為12~14天;在5℃~10℃下可貯藏8~9天不影響食用;超過12℃,只能貯藏4~5天。
4.7.2 加工
采收后應(yīng)及時(shí)烘干,通常采用烘干機(jī)烘干,烘干前先將鮮菇按菇型及大小分級(jí)攤在烘架上,然后放入烘干機(jī)內(nèi),關(guān)閉把門,設(shè)定溫度后開始烘干。溫度控制在40℃~60℃;起始溫度設(shè)置為40℃,以后每隔1h上升5℃,升至60℃時(shí),保存該溫度直至烘干。干品應(yīng)用雙層塑料袋包裝,存放在干燥倉(cāng)庫以防回潮。
4.8.1 綠色木霉的防治
綠色木霉對(duì)袋栽白參菌的侵染最重,當(dāng)菌絲在菌袋內(nèi)生長(zhǎng)時(shí),因綠色木霉污染而喪失出菇力;當(dāng)開袋菌袋因綠色木霉污染而不能出菇,損失巨大。因此,在生產(chǎn)時(shí)要特別注意開袋出菇時(shí)的防治。在白參菌的生產(chǎn)中防治綠色木霉的危害,采用50%施保功,濃度選擇0.5‰~1.0‰[9]。
4.8.2 眼菌蚊的防治
眼菌蚊主要以幼蟲危害白參菌,在菌絲生長(zhǎng)階段,吃菌絲時(shí)破壞其正常生長(zhǎng),導(dǎo)致菌絲死亡,嚴(yán)重發(fā)生時(shí),可將菌絲全部吃完,導(dǎo)致白參菌不能產(chǎn)生子實(shí)體。眼菌蚊在袋栽白參菌中的危害隨相對(duì)濕度的增加而增大,只有開袋出菇培養(yǎng)料外露時(shí),才受到眼菌蚊侵害。防治眼菌蚊蟲害的方法有物理防治及化學(xué)防治,物理防治用防蟲網(wǎng)覆蓋,以40目防蟲網(wǎng)封嚴(yán)?;瘜W(xué)防治用用32.5%樂農(nóng)或0.8%阿巴丁的500~1000倍液在裂褶菌菇棚內(nèi)噴霧[9]。