UroVysion熒光原位雜交技術(shù)與尿脫落細(xì)胞學(xué)聯(lián)合膀胱腫瘤抗原對(duì)尿路上皮細(xì)胞腫瘤的診斷效能分析

司云鳳

在我國(guó)男性中,最容易疾患的泌尿生殖系統(tǒng)惡性腫瘤是上尿路上皮細(xì)胞癌。但是此病早期不適癥狀不明顯,所以很容易被人忽視,造成誤診,從而耽誤病情,病情惡化后會(huì)影響患者的預(yù)后［1］。上尿路上皮細(xì)胞癌的診斷手段有很多種,例如血清BTA、尿脫落細(xì)胞學(xué)、內(nèi)窺鏡檢查、磁共振成像和CT、尿路造影等。尿脫落細(xì)胞學(xué)檢測(cè)和BTA 檢測(cè)雖然可以初期指示疾患腫瘤的功能,但是不能完全診斷,操作內(nèi)窺鏡會(huì)使患者產(chǎn)生嚴(yán)重的不適,患者的抵觸情緒較重,無(wú)法廣泛使用,而影像學(xué)檢查雖然可以分析上尿路上皮細(xì)胞癌的進(jìn)展階段,但是無(wú)法準(zhǔn)確的診斷體積微小和初期的腫瘤。所以,尋找一個(gè)檢測(cè)方法既可以增加上尿路上皮細(xì)胞癌的初級(jí)診斷準(zhǔn)確率,還能迅速、方便、無(wú)損害,這一直是臨床上研究上尿路上皮細(xì)胞癌的重點(diǎn)。而現(xiàn)階段,臨床上尚沒(méi)有一種檢測(cè)方法可以完全確診上尿路上皮細(xì)胞癌［2］。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,科學(xué)家發(fā)現(xiàn)某些基因位點(diǎn)出現(xiàn)損失或染色體數(shù)目變化會(huì)導(dǎo)致上尿路上皮細(xì)胞癌［3］。UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)可以清楚而精確的檢出腫瘤細(xì)胞中的染色體變化,成為篩查上尿路上皮細(xì)胞癌的一種新手段。此次試驗(yàn)選取了在本院通過(guò)膀胱鏡活檢已經(jīng)確診為上尿路上皮細(xì)胞癌的患者80 例,進(jìn)行UroVysion 熒光原位的雜交技術(shù)、尿脫落細(xì)胞學(xué)聯(lián)合BTA 檢測(cè),評(píng)估UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)對(duì)上尿路上皮細(xì)胞癌的診斷意義,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019 年8 月～2020 年8 月在大連大學(xué)附屬中山醫(yī)院通過(guò)膀胱鏡取活組織進(jìn)行病理檢查等方式確診為上尿路上皮細(xì)胞癌的患者80 例作為觀察組,同時(shí)挑選在本院進(jìn)行健康體檢者80 例作為對(duì)照組。觀察組中,男46 例,女34 例；年齡44～76 歲,平均年齡(53.25±7.59)歲。對(duì)照組中,男45 例,女 35 例；年齡43～74 歲,平均年齡(52.48±7.18)歲。兩組患者的性別、年齡等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

1.2 檢測(cè)方法 選取一個(gè)干燥的無(wú)菌一次性容器,留取所有研究對(duì)象的新鮮晨尿100 ml。留取尿樣的過(guò)程中,要阻止糞便、白帶、精液、月經(jīng)血等雜質(zhì)混入。標(biāo)本要在1 h 內(nèi)迅速送檢,防止時(shí)間較長(zhǎng)導(dǎo)致尿液污染、其成分出現(xiàn)變化、細(xì)胞出現(xiàn)死亡凋零。將每個(gè)尿樣平均分成兩份,一份采用UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)檢測(cè),另一份采用尿脫落細(xì)胞學(xué)檢測(cè)。同時(shí)采集兩組的肘部靜脈血10 ml,對(duì)其使用血清BTA檢測(cè)。因?qū)φ战M為正常人群,故可以作為比較準(zhǔn)則。對(duì)照組的尿標(biāo)本采用UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)檢測(cè),每個(gè)標(biāo)本使用9p21 區(qū)帶探針和17、7、3 號(hào)染色體著絲粒探針組合,數(shù)出100 個(gè)尿路上皮細(xì)胞,觀察并記錄正常細(xì)胞數(shù)和不同種類(lèi)的異常細(xì)胞數(shù),作為一個(gè)參考標(biāo)準(zhǔn)。觀察組的檢測(cè)數(shù)據(jù)如果高過(guò)閾值,記陽(yáng)性；如果低過(guò)閾值,記陰性。尿脫落細(xì)胞學(xué)：取尿標(biāo)本50 ml,對(duì)其離心后,沉淀,作成涂片,用蘇木精-伊紅試劑對(duì)涂片染色后,用光學(xué)顯微鏡對(duì)其進(jìn)行觀察。每個(gè)標(biāo)本都要進(jìn)行3 次測(cè)量,若發(fā)現(xiàn)一次異常細(xì)胞,就定為陽(yáng)性。UroVysion熒光原位雜交技術(shù)：1個(gè)位點(diǎn)有≥2 種發(fā)現(xiàn)不同,如果p16 有3 或0 信號(hào)點(diǎn)異常,就可定為陽(yáng)性；如果隨意2 個(gè)以上位點(diǎn)發(fā)生異常,如果7 號(hào)或3 號(hào)染色體發(fā)生不是整倍的復(fù)制,可定為陽(yáng)性。如果只有1 個(gè) 位點(diǎn)發(fā)生1 種異常,就要重新進(jìn)行判讀。

1.3 觀察指標(biāo) 比較兩組UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)和尿脫落細(xì)胞學(xué)聯(lián)合BTA 的檢出陽(yáng)性率,兩種檢測(cè)方法對(duì)上尿路上皮細(xì)胞癌TNM 分期、WHO 組織學(xué)分級(jí)的檢出結(jié)果,兩種檢測(cè)方法對(duì)上尿路上皮細(xì)胞癌的診斷靈敏度、準(zhǔn)確度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)；等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)和尿脫落細(xì)胞學(xué)聯(lián)合BTA 的檢出陽(yáng)性率比較 觀察組UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)檢測(cè)陽(yáng)性率、尿脫落細(xì)胞學(xué)聯(lián)合BTA檢測(cè)陽(yáng)性率均高于對(duì)照組,且觀察組UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)檢測(cè)陽(yáng)性率高于尿脫落細(xì)胞學(xué)聯(lián)合BTA 檢測(cè),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)和尿脫落細(xì)胞學(xué)聯(lián)合BTA 檢測(cè)陽(yáng)性率比較［n(%)］

2.2 兩種檢測(cè)方法對(duì)上尿路上皮細(xì)胞癌TNM 分期的檢查結(jié)果比較 UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)檢測(cè)與尿脫落細(xì)胞學(xué)聯(lián)合BTA 檢測(cè)對(duì)上尿路上皮細(xì)胞癌TNM分期的檢出結(jié)果比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩種檢測(cè)方法對(duì)上尿路上皮細(xì)胞癌TNM 分期的檢查結(jié)果比較［n(%)］

2.3 兩種檢測(cè)方法對(duì)上尿路上皮細(xì)胞癌患者WHO 組織學(xué)分級(jí)的檢出結(jié)果比較 UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)檢測(cè)與尿脫落細(xì)胞學(xué)聯(lián)合BTA 檢測(cè)對(duì)上尿路上皮細(xì)胞癌患者WHO 組織學(xué)分級(jí)的檢出結(jié)果比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 兩種檢測(cè)方法對(duì)上尿路上皮細(xì)胞癌患者WHO 組織學(xué)分級(jí)的檢出結(jié)果比較［n(%)］

2.4 兩種檢測(cè)方法對(duì)上尿路上皮細(xì)胞癌的診斷靈敏度、準(zhǔn)確度比較 UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)檢測(cè)對(duì)上尿路上皮細(xì)胞癌的診斷靈敏度、準(zhǔn)確度均高于尿脫落細(xì)胞學(xué)聯(lián)合BTA 檢測(cè),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表4 兩種檢測(cè)方法對(duì)上尿路上皮細(xì)胞癌的診斷靈敏度、準(zhǔn)確度比較(%)

3 討論

臨床上泌尿系統(tǒng)腫瘤中上尿路上皮細(xì)胞癌較多見(jiàn)。此病的早期不適癥狀不明顯,所以很容易被人忽視,造成誤診,從而耽誤病情,病情惡化后會(huì)影響患者預(yù)后。通過(guò)手術(shù)可以去除上尿路上皮細(xì)胞癌,但此病的復(fù)發(fā)率很高,可達(dá)到60.00%［4,5］,嚴(yán)重影響患者身心健康。所以,找尋一種及時(shí)、快捷、可靠的診斷上尿路上皮細(xì)胞癌方法,可以及早對(duì)患者進(jìn)行治療,明顯改善其預(yù)后。內(nèi)窺鏡檢查、尿脫落細(xì)胞學(xué)、BTA 檢查是臨床上上尿路上皮細(xì)胞癌常用的診斷手段。其中尿脫落細(xì)胞學(xué)診斷上尿路上皮細(xì)胞癌不夠靈敏,特別是分級(jí)較低的腫瘤,易導(dǎo)致漏診。根據(jù)觀察證實(shí),BTA檢查診斷上尿路上皮細(xì)胞癌的準(zhǔn)確度較低,亦不敏感,所以不會(huì)單用BTA 檢查診斷上尿路上皮細(xì)胞癌,只能初步篩查。而內(nèi)窺鏡檢查是臨床上診斷上尿路上皮細(xì)胞癌的“金標(biāo)準(zhǔn)”,靈敏度較高,但是,操作過(guò)程需進(jìn)行穿刺,對(duì)人體有一定損害,而且花費(fèi)較大,患者的接受程度不高［6-8］。UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)能檢查3、7、17 號(hào)染色體著絲粒和9p21 區(qū)帶,對(duì)應(yīng)的基因是RAF1、EGFR、HER2 和p16。根據(jù)新近試驗(yàn)證實(shí),上尿路上皮細(xì)胞癌生成與上述基因關(guān)系極大,所以可應(yīng)用UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)對(duì)其進(jìn)行篩查［9］。許多實(shí)驗(yàn)提出,UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)診斷上尿路上皮細(xì)胞癌的準(zhǔn)確性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于尿脫落細(xì)胞學(xué)聯(lián)合BTA檢查,而且特異性?xún)?yōu)良。2010 年美國(guó)食品和藥物管理局就已經(jīng)認(rèn)可UroVysion 熒光原位雜交技術(shù)檢查上尿路上皮細(xì)胞癌的復(fù)發(fā),到2015 年時(shí),就已經(jīng)開(kāi)始用于診斷上尿路上皮細(xì)胞癌［10］。

綜上所述,使用UroVysion 熒光原位雜交技術(shù),可以迅速、安全、準(zhǔn)確的檢測(cè)上尿路上皮細(xì)胞癌,擁有較好的使用價(jià)值。