拉莫三嗪治療顱腦損傷后癲癇血藥濃度與OCT1基因多態(tài)性的關(guān)系

周子健，陳紅德

（1.廣東省工傷康復(fù)醫(yī)院藥劑科，廣東廣州 510440；2.廣州市白云區(qū)石井人民醫(yī)院內(nèi)科，廣東廣州 510430）

癲癇是一種慢性腦功能障礙性疾病，發(fā)病率較高，全球患者近7 000萬(wàn)，給患者的日常生活和工作造成明顯消極影響[1]。癲癇是由大腦神經(jīng)元異常放電導(dǎo)致，而顱腦損傷即容易造成大腦神經(jīng)元異常從而導(dǎo)致癲癇[2]。拉莫三嗪（LTG）作為癲癇治療的一線藥物，在不同患者間的臨床療效存在較大差異，當(dāng)藥物含量低于血藥治療窗時(shí)可能會(huì)引起治療無(wú)效，若高于血藥治療窗則有可能引起心血管、中樞神經(jīng)等系統(tǒng)的不良反應(yīng)[3-4]，威脅患者的健康，因此對(duì)LTG血藥濃度及其影響因素的研究即成為癲癇臨床治療的研究重點(diǎn)。而有機(jī)陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（OCT）作為一種內(nèi)攝轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，有研究發(fā)現(xiàn)有機(jī)陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（OCT1）介導(dǎo)的轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程與LTG的胞內(nèi)濃度密切相關(guān)[5]。故本研究對(duì)LTG治療顱腦損傷后癲癇患者體內(nèi)血藥濃度與OCT1基因多態(tài)性的關(guān)系進(jìn)行了探討，旨在為L(zhǎng)TG的臨床應(yīng)用與癲癇治提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月至2019年12月廣東省工傷康復(fù)醫(yī)院收治的80例顱腦損傷后癲癇患者為研究對(duì)象進(jìn)行回顧性分析，根據(jù)治療效果的不同分為有效組（41例，顯效+有效）和無(wú)效組（39例）。有效組患者中男性19例，女性22例；年齡22~37歲，平均年齡（28.43±3.87）歲；體質(zhì)量45~59 kg，平均體質(zhì)量（52.67±5.34）kg；病程5~42個(gè)月，平均病程（21.43±2.88）個(gè)月。無(wú)效組患者中男性18例，女性21例；年齡23~35歲，平均年齡（28.19±3.25）歲；體質(zhì)量44~60 kg，平均體質(zhì)量（52.38±5.17）kg；病程7~41個(gè)月，平均病程（21.68±3.04）個(gè)月。兩組患者一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），組間具有可比性。研究經(jīng)廣東省工傷康復(fù)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)同意。診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照《神經(jīng)外科與癲癇（第2版）》[6]中顱腦損傷后癲癇的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)計(jì)算機(jī)斷層掃描及?？漆t(yī)師診斷，確診為顱腦損傷后癲癇。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡≥18歲；③患者治療前均行OCT1 rs628031型基因檢測(cè)。排除標(biāo)準(zhǔn) ：①服用了可能影響LTG代謝的藥物（如避孕藥等）者；②已知對(duì)所使用藥物過(guò)敏者；③妊娠或哺乳期婦女；④合并有心肝腎等其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾病者；⑤患者依從性差，不能遵從醫(yī)囑；⑥隨訪失訪者。

1.2 治療方法 ①基因檢測(cè)方法：抽取患者治療前外周靜脈血300 μL，并在國(guó)家生物技術(shù)信息中心數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索人OCT1 rs628031序列，使用Primer 3.0進(jìn)行引物設(shè)計(jì)，使用DNA純化試劑盒（北京康為世紀(jì)生物科技有限公司，批號(hào)：CW0524）提取患者DNA并純化，OCT1 rs628031基因型通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增表達(dá)，以HYK-PSTAR-IIA型基因測(cè)序儀（深圳華因康基因科技有限公司，國(guó)械注準(zhǔn)20143222171，型號(hào)：HYK-PSTAR-IIA）進(jìn)行測(cè)序，完成后以GeneMapper 4.1進(jìn)行分析。②給藥方法：患者均使用LTG（三金集團(tuán)湖南三金制藥有限責(zé)任公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20143194，規(guī)格：50 mg/片）單藥治療，劑量隨患者個(gè)體差異進(jìn)行調(diào)整，持續(xù)6個(gè)月。

1.3 觀察指標(biāo) ①臨床療效統(tǒng)計(jì)。結(jié)束治療后隨訪1年對(duì)患者療效進(jìn)行評(píng)估，療效標(biāo)準(zhǔn)參考《神經(jīng)外科與癲癇（第2版）》[6]，具體標(biāo)準(zhǔn)為：顯效：治療結(jié)束后1年癲癇發(fā)作次數(shù)減少量≥85%；有效：治療結(jié)束后1年50%≤癲癇發(fā)作次數(shù)減少量＜85%；無(wú)效：治療結(jié)束后1年癲癇發(fā)作次數(shù)減少量＜50%。同時(shí)依據(jù)治療效果將患者分為有效組（顯效+有效）和無(wú)效組。②觀察并比較兩組患者OCT1基因多態(tài)性。③比較不同OCT1 rs628031基因型患者LTG劑量、LTG穩(wěn)態(tài)血藥濃度、LTG標(biāo)準(zhǔn)劑量血藥濃度差異。血藥濃度檢測(cè)方法為：抽取癲癇患者單用LTG治療至穩(wěn)態(tài)谷濃度的清晨空腹外周靜脈血2 mL，2 500 r/min離心15 min分離血清后使用乙二胺四乙酸抗凝后分離血漿，-80 ℃存儲(chǔ)待檢，使用反相高效液相色譜法測(cè)定LTG血藥濃度。LTG標(biāo)準(zhǔn)劑量血藥濃度=LTG穩(wěn)態(tài)血藥濃度/患者每日每千克體質(zhì)量服藥劑量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以（）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較行方差分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床療效統(tǒng)計(jì) 結(jié)束治療后隨訪1年，顯效患者占比13.75%，有效患者占比37.50%，無(wú)效患者占比48.75%，依據(jù)治療效果將患者分為無(wú)效組（39例）和有效組（41例）。

2.2 兩組患者OCT1 rs628031基因多態(tài)性比較 無(wú)效組患者OCT1 rs628031 GG、AG基因型占比顯著高于有效組，AA基因型占比顯著低于有效組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組患者OCT1 rs628031基因多態(tài)性比較 [例(%)]

2.3 OCT1基因多態(tài)性與LTG劑量的相關(guān)性分析 OCT1 rs628031 GG、AG基因型攜帶者LTG劑量顯著低于OCT1 rs628031 AA基因型攜帶者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 OCT1基因多態(tài)性與LTG劑量的相關(guān)性分析（ ）

表2 OCT1基因多態(tài)性與LTG劑量的相關(guān)性分析（ ）

注：與AA型基因比較，aP＜0.05。OCT1 rs628031：OCT1為有機(jī)陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)體1，rs628031為其基因多態(tài)性類別；GG、AG、AA為OCT1 rs628031基因的3個(gè)具體分型。

OCT1 rs628031基因型 例數(shù) LTG劑量（μg/mL）GG 30 2.03±0.18a AG 28 1.98±0.13a AA 22 4.02±0.31 F值 730.095 P值 0.000

2.4 OCT1基因多態(tài)性與LTG穩(wěn)態(tài)血藥濃度、標(biāo)準(zhǔn)劑量血藥濃度的相關(guān)性分析 不同OCT1 rs628031基因型攜帶者的穩(wěn)態(tài)血藥濃度比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），OCT1 rs628031 GG、AG基因型攜帶者LTG標(biāo)準(zhǔn)劑量血藥濃度顯著低于OCT1 rs628031 AA基因型攜帶者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 OCT1基因多態(tài)性與LTG穩(wěn)態(tài)血藥濃度、標(biāo)準(zhǔn)劑量血藥濃度的相關(guān)性分析（ ）

表3 OCT1基因多態(tài)性與LTG穩(wěn)態(tài)血藥濃度、標(biāo)準(zhǔn)劑量血藥濃度的相關(guān)性分析（ ）

注：與AA型基因比較，aP＜0.05。OCT1 rs628031：OCT1為有機(jī)陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)體1，rs628031為其基因多態(tài)性類別；GG、AG、AA為OCT1 rs628031基因的3個(gè)具體分型。

標(biāo)準(zhǔn)劑量血藥濃度[（μg/mL）/（mg/kg）]GG 30 2.37±0.29 1.09±0.16a AG 28 2.22±0.35 1.12±0.14a AA 22 2.26±0.64 2.02±0.18 F值 1.469 263.936 P值 0.237 0.000 OCT1 rs628031基因型 例數(shù) 穩(wěn)態(tài)血藥濃度（μg/mL）

3 討論

顱腦損傷是在暴力擊打、碰撞等外力間接或直接作用于頭部后產(chǎn)生的顱腦組織損傷，若患者在受傷后昏迷≥6 h或發(fā)生再度昏迷的情況，則被視為重癥顱腦損傷，此類患者便極易在手術(shù)后出現(xiàn)創(chuàng)傷性癲癇并發(fā)癥[7-9]。顱腦損傷合并癲癇對(duì)患者的健康甚至生命安全都有極大威脅，尤其晚期患者的預(yù)后較差，死亡率較高[10]。因此在患者圍手術(shù)期使用抗癲癇藥物已成為臨床治療時(shí)的重要手段，LTG為應(yīng)用最廣泛的藥物之一。

LTG作為一種廣譜抗癲癇藥物，近年來(lái)在全面性或部分性癲癇的臨床治療中應(yīng)用時(shí)，取得了相對(duì)較好的治療效果，但治療過(guò)程中也發(fā)現(xiàn)一定問(wèn)題，其中臨床最為關(guān)注的問(wèn)題之一即LTG在不同患者體內(nèi)的穩(wěn)態(tài)血藥濃度有顯著差別[11-12]，主要是因?yàn)檠帩舛鹊牟町惡蚅TG的治療效果與安全性有密切聯(lián)系。因此眾多臨床醫(yī)師開(kāi)始對(duì)其差異加以關(guān)注并對(duì)引起這種差異的原因進(jìn)行了持續(xù)研究，以期優(yōu)化LTG的應(yīng)用以增強(qiáng)療效和用藥安全性。既往研究發(fā)現(xiàn)藥物代謝轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的基因多態(tài)性對(duì)抗癲癇藥物的生物利用度、藥代動(dòng)力學(xué)等方面有明顯影響[13]，譬如乳腺癌耐藥蛋白、p-糖蛋白、多藥耐藥相關(guān)蛋白-2等轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，當(dāng)其發(fā)生異常時(shí)，就會(huì)對(duì)LTG的血藥濃度造成影響，導(dǎo)致患者間療效產(chǎn)生差別[14]。

本研究在OCT1基因多態(tài)性與LTG療效、劑量相關(guān)性的觀察中發(fā)現(xiàn)OCT1 rs628031 GG、AG、AA基因型攜帶者之間的LTG療效和劑量水平有明顯差異；在OCT1基因多態(tài)性與LTG穩(wěn)態(tài)血藥濃度、標(biāo)準(zhǔn)劑量血藥濃度相關(guān)性的觀察中，發(fā)現(xiàn)OCT1 rs628031 GG、AG、AA基因型攜帶者之間的穩(wěn)態(tài)血藥濃度差異不大，但LTG劑量、LTG標(biāo)準(zhǔn)劑量血藥濃度有明顯差異。提示OCT1 rs628031基因多態(tài)性與LTG療效及標(biāo)準(zhǔn)劑量血藥濃度關(guān)系密切。由于有機(jī)陽(yáng)離子通道轉(zhuǎn)運(yùn)體能夠轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)源性、外源性物質(zhì)，與非帶電化合物和陽(yáng)離子藥物的聚集與排泄密切相關(guān)[15]，也有研究提出腦血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)部LTG有可能是OCT1底物[16]。因此OCT1的基因多態(tài)性亦有可能與LTG的療效、藥代動(dòng)力學(xué)等存在聯(lián)系。但目前臨床關(guān)于OCT1的基因多態(tài)性的研究較少，對(duì)于OCT1的基因多態(tài)性與LTG治療顱腦損傷后癲癇間的關(guān)系仍不清晰，因此在后續(xù)的研究中仍期待開(kāi)展更多的研究，以探討OCT1的基因多態(tài)性影響LTG治療效果的可能機(jī)制，以期尋找到LTG濃度、療效等的影響因素，從而更好地對(duì)顱腦損傷后癲癇患者進(jìn)行臨床治療。

綜上，本研究發(fā)現(xiàn)顱腦損傷后癲癇患者在使用LTG治療時(shí)，藥物療效、劑量和標(biāo)準(zhǔn)劑量血藥濃度在OCT1不同基因類型攜帶者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。