酸棗仁油研究應(yīng)用進(jìn)展

趙 凱，王一飛，李 新，趙子楠

(河北凱盛醫(yī)藥科技有限公司1，石家莊 050035)(江西歐氏藥業(yè)有限責(zé)任公司2，新余 338000)(北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院3，北京 100029)

酸棗仁是鼠李科植物棗屬酸棗ZiziphusjujubaMill.var.spinose(Bunge)Huex H.F.Chou的干燥成熟種仁，亦名棗仁、山棗仁、酸棗核[1]。主產(chǎn)于亞歐大陸，在我國(guó)北方地區(qū)如河北、河南、山東等省份分布廣泛[2]。酸棗仁具有養(yǎng)心補(bǔ)肝、寧心安神、斂汗、生津的功效，是養(yǎng)心安神要藥，為中醫(yī)臨床上治療失眠的首選藥物，也是衛(wèi)生部頒布的首批藥食兩用品種[3，4]。酸棗仁藥理活性豐富，除具備鎮(zhèn)靜催眠功能特性外，還有降血糖、抗抑郁、抗焦慮、抗氧化、抗腫瘤等作用[2]。酸棗仁化學(xué)成分多樣，包括脂肪油、皂苷、黃酮、生物堿等。藥理研究表明，脂肪油是酸棗仁發(fā)揮鎮(zhèn)靜催眠作用的主要生物活性成分之一[5]。在炮制和臨床中也發(fā)現(xiàn)酸棗仁“炒久則油枯不香，便難見(jiàn)功”[6]。

失眠是全球性公共衛(wèi)生難題，據(jù)世衛(wèi)組織統(tǒng)計(jì)，全球約有三分之一人口有睡眠障礙，持續(xù)失眠將導(dǎo)致抑郁、焦慮、藥物及酒精濫用等不良狀況發(fā)生，嚴(yán)重影響民眾的身心健康[7]。近年來(lái)國(guó)家對(duì)中醫(yī)藥不斷投入政策支持如《“健康中國(guó)2030”規(guī)劃綱要》《關(guān)于加快中醫(yī)藥特色發(fā)展的若干政策措施》等，使民眾對(duì)中醫(yī)藥了解開(kāi)始加深。酸棗仁油作為天然產(chǎn)物，無(wú)毒、無(wú)致突變作用，可應(yīng)用于食品、藥品、化妝品等領(lǐng)域，開(kāi)發(fā)前景廣闊[8,9]。

國(guó)內(nèi)外專家學(xué)者報(bào)道了大量的酸棗仁油化學(xué)成分和藥理作用相關(guān)研究，已發(fā)現(xiàn)酸棗仁油中含酸類、酯類、醇類、烷烴類等化學(xué)成分，具有鎮(zhèn)靜安神、抗抑郁、抗腫瘤、降血脂、抗氧化等藥理活性，但是鮮見(jiàn)酸棗仁油綜述性研究報(bào)道[3]。本文對(duì)酸棗仁油的提取方法、化學(xué)成分、藥理作用及機(jī)制的研究進(jìn)展進(jìn)行系統(tǒng)性分析歸納，以期為酸棗仁油更好地開(kāi)發(fā)應(yīng)用及進(jìn)一步的深入研究提供參考。

1 酸棗仁油的提取工藝和影響因素

酸棗仁油的提取方法有：壓榨法、溶劑提取法、超臨界CO2萃取法、亞臨界萃取法等。不同提取方式在科研和生產(chǎn)中使用頻率不同，在出油率、化學(xué)成分和相對(duì)含量方面也存在一定的差異。

1.1 傳統(tǒng)提取工藝

壓榨法工藝簡(jiǎn)單、安全性高，但出油率僅有14%～15%，后續(xù)油料綜合利用率也較低，限制了它在酸棗仁油提取研究中的應(yīng)用[10，11]。

溶劑提取法是油脂加工最廣泛采用的方法，具有工藝成熟、提油率高、殘留粕粉品質(zhì)好等特點(diǎn)。酸棗仁油的提取溶劑有石油醚[12]、正己烷[13]、乙醚[14]、環(huán)己烷[15]等，以石油醚最為常用，此類方法不足之處是溶劑消耗量大、萃取時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、油及粕中有溶劑殘留等[16]，因而衍生出了微波輔助提取法[17，18]、超聲波輔助提取法[14，19]。在同等時(shí)間下，超聲波輔助提取的出油率比回流提取高約14%[14，19]。在同種提取溶劑下，使用100 mL石油醚在40 ℃下超聲提取15 min和使用40 mL石油醚在550 W功率下微波提取5 min的酸棗油提取率均略高于使用120 mL石油醚索氏提取4 h時(shí)的酸棗仁油提取率[20]。微波和超聲輔助提取可起到降低反應(yīng)溫度，縮短反應(yīng)時(shí)間，減少溶劑用量等效果。

1.2 新型提取工藝

超臨界CO2萃取法因高效節(jié)能、綠色環(huán)保、無(wú)溶劑殘留而成為油脂提取領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。相比于溶劑提取法，超臨界萃取出油率更高，脂肪酸檢出成分更多。超臨界萃取的酸棗仁油過(guò)氧化值低，抗過(guò)氧化活性高，總不飽和脂肪酸含量高，具有傳統(tǒng)工藝難以達(dá)到的效果[21，22]。

亞臨界萃取法是一項(xiàng)新興萃取分離技術(shù)，采取低溫工藝，可選溶劑多，與超臨界萃取技術(shù)相比生產(chǎn)成本低、更適合工業(yè)化。陶冶等[19]利用亞臨界丁烷萃取法、索氏抽提法，超聲波輔助3種方式提取酸棗仁油，亞臨界流體萃取的油脂純度高、不飽和脂肪酸含量高、油中抗氧化物質(zhì)VE含量高，且提取速度快、安全性佳，更適宜酸棗仁油的提取。不同提取方法制備酸棗仁油的化學(xué)成分和出油率見(jiàn)表1。

表1 不同提取方法制備酸棗仁油的化學(xué)成分和出油率

酸棗仁的出油率、化學(xué)成分?jǐn)?shù)量及相對(duì)含量受多種因素影響，除提取方式外，還有提取溶劑、產(chǎn)地、采收期、衍生化方法、炮制等。在相同提取條件下，使用石油醚和乙醚2種溶劑對(duì)對(duì)酸棗仁油進(jìn)行提取，酸棗仁平均出油率為23.24%、17.29%，石油醚的提油率明顯高于乙醚[14]。對(duì)比河北、河南、山西等省份7個(gè)產(chǎn)區(qū)酸棗仁的出油率發(fā)現(xiàn)，河北邢棗仁脂肪油含量最高，山西、遼寧次之，甘肅酸棗仁含油量最低[20]。邢棗仁在果實(shí)半紅期、果實(shí)脆熟期、果實(shí)完熟期3個(gè)時(shí)期分別檢出20、17和23種脂肪酸成分，質(zhì)量分?jǐn)?shù)隨著時(shí)間的推移逐漸增多[26]。因沸點(diǎn)的緣故，脂肪酸需衍生化后進(jìn)樣分析，郭秀蘭等[27]采用鹽酸-甲醇法測(cè)定出9種脂肪酸成分，杜晨暉等[28]采用氫氧化鈉-甲醇法鑒定出脂肪酸類成分 24 種，申晨曦[29]采用三甲基氯硅烷衍生化試劑 150 μL，衍生1.5 h，鑒定出28個(gè)脂肪酸成分。炮制素有“逢子必炒，見(jiàn)仁必?fù)v”之說(shuō)，炒制能促進(jìn)有效成分溶出或促使其他成分向這些成分轉(zhuǎn)化，酸棗仁炒制后出油率提高約22%，化合物數(shù)目增加4個(gè)[30]。表1中的數(shù)據(jù)為綜合各文獻(xiàn)的區(qū)間數(shù)據(jù)。索氏提取法與超臨界萃取法檢出化學(xué)成分多，是專家學(xué)者高頻率地使用這2種方法，逐步檢出了不同的化合物，可見(jiàn)酸棗仁油的提取方法與化學(xué)成分仍有待進(jìn)一步的發(fā)掘研究。

2 酸棗仁油中的化學(xué)成分

酸棗仁油已分離鑒定出105種化學(xué)成分，包含脂肪酸類、烴類、酯類、醇類等，脂肪酸類是酸棗仁油的主要成分。在果實(shí)完熟期，酸棗仁油中酸類物質(zhì)、烴類物質(zhì)、醇類物質(zhì)相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為95.99%、1.43%、0.40%[26]。脂肪酸按照飽和程度分為飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸2種，酸棗仁油中飽和脂肪酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)低(10.55%)，不飽和脂肪酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)高(89.16%)，具有極大的潛在藥食兩用價(jià)值[31]。酸棗仁油中化學(xué)成分見(jiàn)表2。

表2 酸棗仁油中化學(xué)成分

3 酸棗仁油的藥理作用及機(jī)制

3.1 鎮(zhèn)靜催眠作用及機(jī)制

酸棗仁油能夠縮短睡眠潛伏期，延長(zhǎng)睡眠時(shí)間，壓榨與超臨界萃取2種工藝提取的酸棗仁油在鎮(zhèn)靜催眠作用方面具有等效性[39-41]。作為主效應(yīng)成分，酸棗仁油與梔子油、柏子仁油配伍可起到協(xié)同增效的作用，隨用藥時(shí)間延長(zhǎng)鎮(zhèn)靜作用逐漸增強(qiáng)[42]。失眠與γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、5-羥色胺(5-HT)等神經(jīng)遞質(zhì)有關(guān)，其中GABA 具有鎮(zhèn)靜、催眠等作用，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最重要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)[7,43]?；谑荏w配體理論確認(rèn)被地西泮競(jìng)爭(zhēng)置換出的酸棗仁中有效鎮(zhèn)靜催眠化合物，發(fā)現(xiàn)飽和脂肪酸類物質(zhì)棕櫚酸可能是酸棗仁中鎮(zhèn)靜催眠的活性成分之一[44]。也有報(bào)道稱，酸棗油中反-9-十八碳烯酸甲酯、棕櫚酸甲酯等物質(zhì)可在體內(nèi)?；蓛?nèi)源性睡眠誘導(dǎo)物—油酰胺(OLA)，OLA可誘導(dǎo)生理性睡眠[45]。經(jīng)尿素法分離的酸棗仁油不飽和脂肪酸類部分同樣有明顯的鎮(zhèn)靜催眠作用，說(shuō)明酸棗仁油的飽和脂肪酸與不飽和脂肪酸成分均具有鎮(zhèn)靜催眠作用[46]。

3.2 抗焦慮、抗抑郁作用及機(jī)制

焦慮癥與抑郁癥二者密不可分，?；ハ噢D(zhuǎn)化。王歡歡等[47]研究證實(shí)高劑量的酸棗仁油具有抗焦慮作用，以酸棗仁油軟膠囊高劑量連續(xù)給藥14 d，可明顯增加焦慮模型大鼠的開(kāi)臂次數(shù)和開(kāi)臂次數(shù)比例，開(kāi)臂時(shí)間和開(kāi)臂時(shí)間比例。趙啟鐸等[48]證實(shí)酸棗仁油具有良好的抗實(shí)驗(yàn)性抑郁作用后，基于復(fù)方協(xié)同作用理念，對(duì)酸棗仁3種抗抑郁組分(酸棗仁油、酸棗仁總黃酮、酸棗仁總皂苷)進(jìn)行最佳配伍研究，發(fā)現(xiàn)其最佳配伍組合抗抑郁效果優(yōu)于原藥材[49]。經(jīng)脂肪酸分析發(fā)現(xiàn)，抑郁樣行為小鼠體內(nèi)棕櫚酸、油酸、亞油酸、花生四烯酸水平與抑郁樣行為顯著相關(guān)[50]。OLA除鎮(zhèn)靜催眠作用外，對(duì)急性應(yīng)激模型和慢性溫和應(yīng)激抑郁模型均表現(xiàn)出抗抑郁活性，OLA抗抑郁作用機(jī)制可能與抑制氧化應(yīng)激，調(diào)節(jié)能量代謝，信號(hào)傳導(dǎo)等有關(guān)[51]。

3.3 抗腫瘤作用及機(jī)制

王清蓮等[52]證實(shí)酸棗仁油對(duì)荷瘤小鼠有明顯的抗癌作用。杜遠(yuǎn)東等[53]酸棗仁油大劑量組對(duì)荷S180小鼠的抑瘤率為58.21%，證實(shí)酸棗仁油對(duì)荷S180小鼠的實(shí)體瘤具有一定的抑制作用。其抗腫瘤作用機(jī)制可能是增強(qiáng)了機(jī)體的非特異性吞噬及特異性體液和細(xì)胞免疫功能，也可能是酸棗仁油中含有的白樺脂酸和γ-亞麻酸起到了抗腫瘤的作用。

3.4 降血脂作用及機(jī)制

每天加喂2.5mL/kg酸棗仁油能顯著降低高血脂模型鵪鶉的總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白(LDL)水平[54]。以酸棗仁油灌胃大耳白家兔60天后進(jìn)行耳緣靜脈采血，與對(duì)照組相比，TC、TG、LDL的平均降幅達(dá)53%，HDL增幅達(dá)198%[55]。證實(shí)口服酸棗仁油具有降血脂作用，吳璟等[56]高血脂大鼠模型確證了此觀點(diǎn)。

酸棗仁油降血脂的物質(zhì)基礎(chǔ)可能是多不飽和脂肪酸(PUFA)如亞油酸、單不飽和脂肪酸如棕櫚油酸等[54]。亞油酸和亞麻酸本身具有一定的調(diào)血脂作用，后者還可在體內(nèi)經(jīng)轉(zhuǎn)化、代謝產(chǎn)生PGE1，呈現(xiàn)調(diào)血脂效應(yīng)[56]。單不飽和脂肪酸能夠通過(guò)對(duì)血脂、凝血和纖溶系統(tǒng)及LDL氧化敏感性的調(diào)節(jié)，正向調(diào)節(jié)血脂，降低心血管疾病發(fā)生的概率[57]。

3.5 抗氧化作用及機(jī)制

人體在代謝過(guò)程中或受到外部損傷時(shí)會(huì)產(chǎn)生具有很強(qiáng)氧化作用的活性氧自由基(ROS)，體內(nèi)過(guò)多的ROS可誘導(dǎo)發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，致使細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化，使細(xì)胞發(fā)生功能障礙或死亡[58]。MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化的主要代謝產(chǎn)物之一，機(jī)體受到損傷后MDA 含量升高[59]。為保護(hù)機(jī)體免受ROS的傷害，細(xì)胞形成了一套獨(dú)特的防御體系，包括過(guò)氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)等[60]。

吳璟等[56]測(cè)定了高血脂大鼠的CAT、SOD及MDA的活性，不同劑量酸棗仁油組大鼠血清SOD含量及全血CAT含量均明顯高于生理鹽水組和單純高脂組，血清MDA含量顯著降低。張雪等[61]以D-半乳糖氧化模型小鼠血液和肝臟中的MDA含量和GSH-Px活力的影響為指標(biāo)檢測(cè)酸棗仁油的抗氧化作用，低劑量組與高劑量組小鼠血與肝臟中MDA含量明顯小于模型組，高、中、低3個(gè)劑量組的小鼠肝臟中GSH-Px活力明顯高于模型組，表明不同濃度的酸棗仁油均有較好的體內(nèi)抗氧化作用。

體外抗氧化活性方面，在相同濃度下，酸棗仁油的總抗氧化能力與VE相當(dāng)，酸棗仁油清除 DPPH 自由基、超氧陰離子自由基能力和抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用都優(yōu)于VE。也有研究表明，不同提取方式的酸棗仁油均有良好的體外抗氧化活性[15]。

3.6 改善學(xué)習(xí)記憶功能及機(jī)制

吳尚霖等[62]利用昆明種封閉群小鼠研究0.175、0.35、0.70 mL/kg酸棗仁油對(duì)正常小鼠和地西泮造成護(hù)憶損傷的小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響，證明酸棗仁油有良好的改善學(xué)習(xí)記憶功能，推測(cè)其機(jī)理可能與對(duì)抗中樞GABA系統(tǒng)有關(guān)。酸棗仁油、梔子油(2∶1)的復(fù)配油脂對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的改善高于二者單獨(dú)使用，表明油脂復(fù)配能起到協(xié)同作用，其改善學(xué)習(xí)記憶作用可能與脂肪酸有關(guān)，亞油酸可在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成花生四烯酸，花生四烯酸的代謝產(chǎn)物加壓素可提高長(zhǎng)時(shí)學(xué)習(xí)記憶功能[63]。另外，復(fù)配油脂可能作為植物雌激素或通過(guò)增加雌激素水平降低大鼠海馬組織和去卵巢大鼠腦組織中的乙酰膽堿酯酶活性，增加大鼠海馬組織一氧化氮和去卵巢大鼠腦組織中一氧化氮合酶的含量，從而增強(qiáng)大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力[64]。

3.7 其他作用

酸棗仁油對(duì)離體蟾蜍心臟具有強(qiáng)心抗心衰作用，在5×10-3～2×10-2mL/10 mL的濃度范圍內(nèi)，隨酸棗仁油濃度的升高，其增強(qiáng)心肌收縮力的作用明顯提升，強(qiáng)心機(jī)制為促使細(xì)胞外鈣離子內(nèi)流[65]。李寶莉等[66]研究發(fā)現(xiàn)酸柏梔油(3∶3∶1)軟膠囊具有改善血液流變性的作用，其作用可能與其能增加雌激素水平和/或富含多不飽和脂肪酸有關(guān)。將酸棗仁油作為熱應(yīng)激肉仔雞的中草藥飼料添加劑，能夠顯著改善其生產(chǎn)性能和胴體品質(zhì)，作用效果強(qiáng)于常規(guī)熱應(yīng)激飼料添加劑[67]。

4 展望

酸棗仁油的應(yīng)用已成一定規(guī)模，已經(jīng)和正在開(kāi)發(fā)的酸棗仁油藥品、保健食品制劑類型豐富包括滴丸、凝膠、軟膠囊、微膠囊等[68]。亦有以酸棗仁油為原料開(kāi)發(fā)的護(hù)膚精油、潤(rùn)唇膏、卸妝油等化妝產(chǎn)品[69-71]。隨著人們對(duì)酸棗仁油藥食兩用價(jià)值認(rèn)識(shí)的深入，酸棗仁油的市場(chǎng)發(fā)展前景廣闊。但酸棗仁油的研究與應(yīng)用中也存在不少問(wèn)題，現(xiàn)有酸棗油提取方式的出油率、化學(xué)成分?jǐn)?shù)、相對(duì)含量各異，對(duì)酸棗仁功效影響的研究尚不充分，也不利于產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)化，應(yīng)選育出油率高的酸棗優(yōu)良品種，進(jìn)行提取方式探究，保證酸棗仁油的質(zhì)量穩(wěn)定。酸棗仁油中的化學(xué)成分和藥理活性研究仍處于基礎(chǔ)階段，其發(fā)揮作用的物質(zhì)基礎(chǔ)、各成分間的相互作用尚不明確，作用機(jī)制鮮有報(bào)道，為更好地開(kāi)發(fā)利用酸棗仁油資源，應(yīng)深入探索其化學(xué)成分、藥理作用、藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、作用機(jī)制，為酸棗仁油的推廣應(yīng)用提供堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。