基于指紋圖譜和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的連翹質(zhì)量標(biāo)志物預(yù)測分析

景奉堂 馮帥 王靜 呂緒楨 張?zhí)煲?張?zhí)戾a 李峰

中圖分類號 R284;R285.5 文獻標(biāo)志碼 A 文章編號 1001-0408（2022）03-0293-07

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2022.03.07

摘 要 目的 預(yù)測連翹的質(zhì)量標(biāo)志物（Q-Marker）。方法 采用高效液相色譜法建立10批連翹藥材的指紋圖譜，并進行共有峰指認(rèn)，篩選連翹藥材中的Q-Marker候選成分;采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）對連翹揮發(fā)油成分進行分析，篩選揮發(fā)油中的Q-Marker候選成分;然后將篩選的Q-Marker候選成分進行網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析，構(gòu)建“連翹Q-Marker候選成分-靶點-通路”網(wǎng)絡(luò)，并預(yù)測連翹的Q-marker。結(jié)果與結(jié)論 10批連翹藥材共得到21個共有峰，指認(rèn)了連翹苷、連翹酯苷A、松脂素-β-D-葡萄糖苷、蘆丁4個成分;經(jīng)GC-MS分析后得到連翹揮發(fā)油中β-蒎烯、α-蒎烯、松油烯-4-醇、檸檬烯、γ-松油烯、α-水芹烯、β-月桂烯7個Q-Marker候選成分;進一步經(jīng)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析共得到16個關(guān)鍵靶點和17條通路，初步預(yù)測連翹苷、連翹酯苷A、松脂素-β-D-葡萄糖苷、蘆丁、松油烯-4-醇、α-水芹烯、α-蒎烯、β-蒎烯為連翹的Q-marker。

關(guān)鍵詞 連翹;質(zhì)量標(biāo)志物;指紋圖譜;網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)

Predictive analysis of quality markers of Forsythia suspensa based on fingerprint and network pharmacology

JING Fengtang1，F(xiàn)ENG Shuai1，2，WANG Jing3，LYU Xuzhen1，ZHANG Tianyi1，ZHANG Tianxi1，LI Feng1，2（1. School of Pharmacy， Shandong University of Traditional Chinese Medicine， Jinan 250355， China; 2. Collaborative Innovation Center for Quality Control and Construction of Whole Industrial Chain for Traditional Chinese Medicine in Universities of Shandong Province， Jinan 250355， China; 3. Dongying District Market Supervision and Administration Bureau in Dongying City， Shandong Dongying 257000， China）

ABSTRACT? ?OBJECTIVE To predict the quality marker （Q-Marker） of Forsythia suspensa. METHODS The fingerprints of 10 batches of F. suspensa were established by high performance liquid chromatography. The common peaks were confirmed. The candidate components of Q-Marker in F. suspensa were screened. The volatile oil of F. suspensa were analyzed by gas chromatography-mass spectrometry （GC-MS）， and the candidate components of Q-Marker in volatile oil were screened. The network pharmacology analysis was performed for the candidate components of Q-Marker. The network diagram of the “candidate components of F. suspensa Q-Marker-target-pathway” was constructed to predict the Q-marker of F. suspensa. RESULTS & CONCLUSIONS Twenty-one common peaks were obtained for 10 batches of F. suspensa， and four components were identified as phillyrin， forsythoside A， pinoresinol-4-O-β-D-glucoside and rutin. Seven candidate components were obtained by GC-MS analysis， such as β-pinene， α-pinene， terpinen-4-ol， limonene， γ-terpinene， α-phellandrene， β-myrcene. By network pharmacology analysis， 16 key targets and 17 pathways were obtained. It was preliminarily predicted that phillyrin， forsythoside A， pinoresinol-4-O-β-D-glucoside， rutin， terpinen-4-ol， α-phellandrene， α-pinene and β-pinene were Q-marker of F. suspensa.

KEYWORDS? ?Forsythia suspensa; quality marker; fingerprint; network pharmacology

連翹為木犀科植物連翹Forsythia suspensa （Thunb.） Vahl的干燥果實。根據(jù)采收期的不同，初熟尚帶綠色時采收、除去雜質(zhì)、蒸熟、曬干者，習(xí)稱“青翹”;果實熟透時采收、除去雜質(zhì)、曬干者，習(xí)稱“老翹”[1]。連翹具有清熱解毒、消腫散結(jié)、疏散風(fēng)熱之功效，常用于治療風(fēng)熱感冒、溫病初起、乳癰腫毒等[1]，其中青翹在發(fā)汗、抑菌解毒方面優(yōu)于老翹，已成為市場主流品種[2]?，F(xiàn)代研究表明，連翹中主要含有木脂素類、苯乙醇苷類、揮發(fā)油類成分，具有抗炎、抑菌、抗腫瘤、抗氧化等藥理作用[3]。

目前，市售連翹藥材質(zhì)量參差不齊，存在采收搶“青”、市場等級規(guī)格劃分不清的情況。2020年版《中國藥典》連翹含量測定項下僅對連翹苷、連翹酯苷A、總揮發(fā)油進行控制[1]，而連翹中含有的化學(xué)成分復(fù)雜，揮發(fā)性成分缺乏細(xì)致研究，其主要活性成分及作用靶點尚不明確，無法反映中藥多成分、多靶點、整體性的特點。因此，如何制定合理的連翹質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、保障連翹藥材質(zhì)量，是亟待解決的問題。

中藥指紋圖譜可以對化學(xué)成分進行較全面控制[4-5]，而網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)基于數(shù)據(jù)庫，以“網(wǎng)絡(luò)靶標(biāo)”為核心，可對中藥成分、靶點、通路進行梳理分析[6]，因此兩者相結(jié)合既可以從整體上控制藥材質(zhì)量，也可以揭示中藥發(fā)揮其功效的物質(zhì)基礎(chǔ)及途徑?；诖?，本研究采用高效液相色譜（HPLC）法建立連翹藥材的指紋圖譜，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）對連翹揮發(fā)油成分進行分析，再利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法對連翹成分、靶點、通路進行整理分析，并預(yù)測其潛在的質(zhì)量標(biāo)志物（quality marker，Q-marker），旨在為連翹質(zhì)量控制提供參考。

1 材料

1.1 主要儀器

本研究所用主要儀器有：1260 InfinityⅡ型HPLC儀、7890B/7000D型GC-MS儀（美國Agilent公司），F(xiàn)W-80型高速萬能粉碎機、DZTW型電子調(diào)溫電熱套（北京市永光明醫(yī)療儀器有限公司），F(xiàn)A2004B型萬分之一電子天平（上海天美天平儀器有限公司），KQ-500DB型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），TDL-5-A型離心機（上海安亭科學(xué)儀器廠）。

1.2 主要藥品與試劑

連翹苷（批號Z27A9X59731）、連翹酯苷A（批號Z10N9L71605）、松脂素-β-D-葡萄糖苷（批號M25GB- 142883）、蘆?。ㄅ朰24F11Y17051）的對照品（純度均大于98%）購自上海源葉生物科技有限公司;無水硫酸鈉（分析純，批號F20110307）購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司）;乙酸乙酯（分析純，批號20170816）購自天津市富宇精細(xì)化工有限公司;甲醇、甲酸均為色譜純;水為娃哈哈飲用純凈水。

本研究所用10批連翹藥材（均為青翹，編號S1～S10）購自不同產(chǎn)地（S1、S4樣品購自山西，S2樣品購自河北，S3樣品購自江西，S5樣品購自陜西商洛，S6～S8樣品購自安徽亳州，S9樣品購自四川，S10樣品購自山東泰安），經(jīng)山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院李峰教授鑒定，符合2020年版《中國藥典》規(guī)定，均為木犀科植物連翹F. suspensa （Thunb.） Vahl的干燥果實。

2 方法與結(jié)果

2.1 連翹HPLC指紋圖譜的建立

2.1.1 色譜條件 色譜柱為ZORBAX SB-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）;流動相為0.2%甲酸溶液（A）-甲醇（B）（梯度洗脫：0～15 min，10%B→20%B;15～30 min，20%B→26.5%B;30～31 min，26.5%B→29.2%B;31～50 min，29.2%B→35%B;50～63 min，35%B→40%B;63～69 min，40%B→48%B;69～75 min，48%B→53%B;75～80 min，53%B→60%B）;檢測波長為242 nm;流速為1 mL/min;柱溫為30 ℃;進樣量為5 μL。

2.1.2 供試品溶液的制備 取10批連翹藥材，粉碎過四號篩，精密稱定1.5 g粉末，置于具塞錐形瓶中，加入70%甲醇20 mL，密塞，稱定，超聲提取（頻率40 kHz，功率300 W）30 min;放冷，稱定，用70%甲醇補足減失質(zhì)量，搖勻，以5 000 r/min離心5 min;取上清液，過0.22 μm微孔濾膜，取續(xù)濾液，即得。

2.1.3 混合對照品溶液的制備 取連翹苷、連翹酯苷A、松脂素-β-D-葡萄糖苷、蘆丁對照品，精密稱定，加甲醇振搖、溶解制成含連翹苷84 μg/mL、連翹酯苷A 174? ? μg/mL、松脂素-β-D-葡萄糖苷128 μg/mL、蘆丁 92 μg/mL的混合對照品溶液。

2.1.4 精密度試驗 取連翹供試品溶液（編號S10），按“2.1.1”項下色譜條件連續(xù)進樣6次，記錄色譜圖。以15號峰為參照峰，計算各共有峰的相對保留時間和相對峰面積。結(jié)果顯示，各共有峰相對保留時間RSD均小于0.23%，相對峰面積RSD均小于3.86%，表明儀器精密度良好。

2.1.5 重復(fù)性試驗 取連翹藥材S10樣品平行制備6份供試品溶液，按“2.1.1”項下色譜條件進樣分析，記錄色譜圖。以15號峰為參照峰，計算各共有峰的相對保留時間和相對峰面積。結(jié)果顯示，各共有峰相對保留時間RSD均小于1.03%，相對峰面積RSD均小于3.14%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.1.6 穩(wěn)定性試驗 取連翹供試品溶液（編號S10），于室溫放置0、2、4、8、12、24 h時按“2.1.1”項下色譜條件進樣分析，記錄色譜圖。以 15號峰為參照峰，計算各共有峰的相對保留時間和相對峰面積。結(jié)果顯示，各共有峰相對保留時間RSD均小于0.22%，相對峰面積RSD均小于3.41%，表明供試品溶液在室溫放置24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.1.7 指紋圖譜建立 取10批連翹藥材，按“2.1.2”項下方法制備供試品溶液，按“2.1.1”項下色譜條件進樣分析，記錄色譜圖。采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)（2012年版）》，以S1樣品的色譜圖作為參照圖譜，運用中位數(shù)法，將時間窗寬度設(shè)置為0.1 min，然后生成10批連翹藥材的疊加HPLC指紋圖譜（圖1）和連翹藥材的對照指紋圖譜R（圖2）;并進行相似度評價，得到10批連翹藥材指紋圖譜的相似度在0.902～0.997范圍內(nèi)（表1）。

2.1.8 共有峰指認(rèn) 取“2.1.3”項下混合對照品溶液，按“2.1.1”項下色譜條件進樣分析，得到混合對照品溶液色譜圖（圖3）。

由圖1可知，10批連翹藥材有21個共有峰，通過與圖3進行比對，指認(rèn)出13號峰為蘆丁（rutin）、15號峰為連翹酯苷A（forsythoside A）、16號峰為松脂素-β-D-葡萄糖苷（pinoresinol-4-O-β-D-glucoside）、18號峰為連翹苷（phillyrin）。經(jīng)筆者查詢發(fā)現(xiàn)，2020年版《中國藥典》連翹含量測定項下規(guī)定了連翹苷、連翹酯苷A的含量[1]，由此可認(rèn)為這兩者是連翹質(zhì)量的指標(biāo)性成分。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，蘆丁、松脂素-β-D-葡萄糖苷具有顯著的抗炎、抗菌、抗病毒作用，也可認(rèn)為是連翹發(fā)揮功效的主要有效成分[7-10]?；诖?，筆者將這4種成分作為連翹Q-marker的候選成分。

2.2 連翹揮發(fā)油的GC-MS圖譜建立

2.2.1 色譜條件 色譜柱為HP-5MS（30 m×0.25 mm，0.25 μm）;進樣溫度為200 ℃;載氣為氮氣;分流比為20 ∶ 1;流速為1 mL/min;進樣量為1 μL;采用程序升溫方式 （50 ℃保持5 min;以0.75 ℃/min升至65 ℃，保持5 min;以5 ℃/min升至105 ℃，保持2 min;以20 ℃/min升至225 ℃，保持4 min）。

2.2.2 質(zhì)譜條件 離子源為電轟擊離子源;電子能量為70 eV;接口溫度為250 ℃;離子源溫度為200 ℃;四極桿溫度為150 ℃;電子倍增電壓為1 906 V;質(zhì)量掃描范圍為50～550 amu。

2.2.3 揮發(fā)油供試品溶液制備 取連翹粉末50 g，精密稱定，置于1 L圓底燒瓶中，加水500 mL浸泡0.5 h，然后采用水蒸氣蒸餾法連續(xù)回流6 h[11];收集揮發(fā)油，加適量無水硫酸鈉粉末干燥，除去固體不溶物，即得連翹揮發(fā)油（得率為0.94%～1.62%）。移取連翹揮發(fā)油0.4 mL，置于10 mL量瓶中，用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，過0.22 μm微孔濾膜，即得揮發(fā)油供試品溶液。

2.2.4 精密度試驗 取連翹揮發(fā)油供試品溶液（編號S10），按“2.2.1”與“2.2.2”項下條件連續(xù)進樣6次，記錄色譜圖。以3號峰為參照峰，計算各峰峰面積。結(jié)果顯示，各峰峰面積RSD均小于0.2%，表明儀器精密度良好。

2.2.5 重復(fù)性試驗 取連翹藥材S10樣品平行制備6份揮發(fā)油供試品溶液，按“2.2.1”與“2.2.2”項下條件進樣分析，記錄色譜圖。以3號峰為參照峰，計算各峰峰面積。結(jié)果顯示，各峰峰面積RSD均小于0.1%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.2.6 穩(wěn)定性試驗 取連翹揮發(fā)油供試品溶液（編號S10），于室溫放置0、2、4、8、12、24 h后，按“2.2.1”與“2.2.2”項下條件進樣分析，記錄色譜圖。以3號峰為參照峰，計算各峰峰面積。結(jié)果顯示，各峰峰面積RSD均小于0.2%，表明供試品溶液在室溫放置24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.7 GC-MS圖譜分析 取“2.2.3”項下連翹揮發(fā)油供試品溶液，按“2.2.1”與“2.2.2”項下條件進樣分析，得到連翹揮發(fā)油成分的GC-MS總離子流圖（圖4）。然后將所得質(zhì)譜數(shù)據(jù)通過質(zhì)譜工作站標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫檢索、匹配后，確定各成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)，通過與各樣品圖譜對比，得到連翹揮發(fā)油7個成分，分別為β-蒎烯（β-pinene）、α-蒎烯（α-pinene）、松油烯-4-醇（terpinen-4-ol）、檸檬烯（limonene）、γ-松油烯（γ-terpinene）、α-水芹烯（α-phellandrene）、β-月桂烯（β-myrcene）。采用峰面積歸一化法進行定量分析，得出上述7個連翹揮發(fā)油成分的相對百分含量總和約80%（表2），表明這7個成分在連翹揮發(fā)油中的代表性較強，可作為連翹揮發(fā)油Q-marker的候選成分。

3 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測連翹Q-Marker

通過上述對10批連翹藥材的研究，筆者推測出蘆丁、連翹酯苷A、松脂素-β-D-葡萄糖苷、連翹苷、β-蒎烯、α-蒎烯、松油烯-4-醇、檸檬烯、γ-松油烯、α-水芹烯、β-月桂烯11個成分可能是連翹Q-Marker的候選成分?；诖耍P者采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法進一步預(yù)測連翹的Q-Marker。

3.1 連翹Q-Marker候選成分的靶點預(yù)測

采用TCMSP、SwissTargetPrediction、PubChem Compound等數(shù)據(jù)庫檢索連翹11個Q-Marker候選成分的靶點信息，除去重復(fù)信息后，最終得到相關(guān)靶點共97個。將這11個成分和97個相關(guān)靶點導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2軟件中，構(gòu)建“連翹Q-Marker候選成分-靶點”網(wǎng)絡(luò)，結(jié)果見圖5（圖中三角形節(jié)點代表連翹Q-Marker候選成分;圓形節(jié)點代表靶點;節(jié)點大小代表度值大小，度值越大，說明靶點間相互作用關(guān)系越密切[12-13]）。

3.2 蛋白互作網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及關(guān)鍵靶點篩選

將“3.1”項下所得的97個相關(guān)靶點導(dǎo)入STRING 11.0數(shù)據(jù)庫中，選擇物種為“Homo sapiens”，去掉單一節(jié)點，結(jié)果保存成.tsv格式，將建立的蛋白相互作用關(guān)系導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2軟件中進行可視化分析[14]，得到蛋白互作 （protein-protein interaction，PPI）網(wǎng)絡(luò)，結(jié)果見圖6（圖中節(jié)點大小、顏色深淺均代表度值大?。?選取網(wǎng)絡(luò)中度值大于9的靶點作為關(guān)鍵靶點[15]，結(jié)果共獲得16個關(guān)鍵靶點（表3）。

3.3 基因本體功能富集分析

利用DAVID 6.8數(shù)據(jù)庫對“3.2”項下獲得的16個關(guān)鍵靶點進行基因本體（gene ontology，GO）富集分析，以P<0.05進行篩選，并根據(jù)P值從小到大排序，得到66個生物過程（biological process，BP）條目、17個細(xì)胞組成（cellular component，CC）條目和11個分子功能（molecular function，MF）條目。筆者選取各條目的前10條進行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，16個關(guān)鍵靶點的BP主要參與脂質(zhì)分解代謝過程的負(fù)調(diào)控（negative regulation of lipid catabolic process）、平滑肌收縮的調(diào)節(jié)（regulation of smooth muscle contraction）、一氧化氮生物合成過程的正調(diào)控（positive regulation of nitric oxide biosynthetic process）等;CC主要與質(zhì)膜（plasma membrane）、神經(jīng)元（neuron）等有關(guān);MF主要參與調(diào)控G蛋白偶聯(lián)腺苷受體活性（G-protein coupled adenosine receptor activity）、α2腎上腺素能受體活性（alpha2-adrenergic receptor activity）、大麻素受體活性（cannabinoid receptor activity）等，詳見圖7。

3.4 京都基因與基因組百科全書富集分析

采用David 6.8數(shù)據(jù)庫對16個核心靶點進行京都基因與基因組百科全書（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）分析，限定物種為“人類（Homo sapiens）”，P值越小，顯著性越強。將P值由小到大排序，共得到17條信號通路，主要包括神經(jīng)活性配體-受體相互作用通路（neuroactive ligand-receptor interaction）、鞘脂信號通路（sphingolipid signaling pathway）、環(huán)磷酸鳥苷-蛋白激酶G信號通路（cGMP-PKG signaling pathway）、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信號通路（PI3K/Akt signaling pathway）、絲裂原活化蛋白激酶信號通路（MAPK signaling pathway）等，詳見圖8。

3.5 “連翹Q-Marker候選成分-靶點-通路”網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建與Q-Marker預(yù)測分析

將11個連翹Q-Marker候選成分、16個關(guān)鍵靶點、17條通路，在Cytoscape 3.7.2軟件中構(gòu)建“連翹Q-Marker候選成分-靶點-通路”網(wǎng)絡(luò)，詳見圖9（圖中紅色三角形節(jié)點代表活性成分，綠色圓形節(jié)點代表關(guān)鍵靶點，紫色正方形節(jié)點代表通路，節(jié)點大小代表度值大?。?。度值可以衡量活性成分與疾病靶點通路的關(guān)聯(lián)度，因此筆者以連翹Q-Marker候選成分的度值為指標(biāo)，經(jīng)計算后發(fā)現(xiàn)，檸檬烯、γ-松油烯、β-月桂烯的度值均低于連翹11個Q-Marker候選成分度值的平均值[15-16];且經(jīng)筆者查詢SwissADME數(shù)據(jù)庫（http：//www.swissadme.ch/）發(fā)現(xiàn)，前面3個成分的胃腸吸收較低[17-19]，故不作為連翹的Q-marker。而其余8個成分蘆丁、連翹苷、松脂素-β-D-葡萄糖苷、連翹酯苷A、松油烯-4-醇、α-水芹烯、β-蒎烯、α-蒎烯的度值均大于平均值，且已有相關(guān)文獻報道這幾個成分是連翹發(fā)揮防治疾病作用的主要成分[7-10，20-21]。基于此，可初步認(rèn)為蘆丁、連翹苷、松脂素-β-D-葡萄糖苷、連翹酯苷A、松油烯-4-醇、α-水芹烯、β-蒎烯、α-蒎烯是連翹的Q-marker。

4 討論

中藥的質(zhì)量是保證其臨床療效的關(guān)鍵。中藥具有多成分、多靶點、整體性的特點，劉昌孝院士提出的“Q-marker”概念[22]，有利于闡明中藥有效物質(zhì)基礎(chǔ)，且對控制中藥總體質(zhì)量具有重要作用。

目前，連翹藥材質(zhì)量高低不等，且其中揮發(fā)油成分也缺少質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)?；诖?，本文以Q-marker理論為指導(dǎo)，結(jié)合指紋圖譜和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)，預(yù)測連翹的Q-marker。結(jié)果顯示，連翹苷、連翹酯苷A、松脂素-β-D-葡萄糖苷、蘆丁、松油烯-4-醇、α-水芹烯、α-蒎烯、β-蒎烯 8個成分可作為連翹的Q-marker。

連翹發(fā)揮清熱解毒、疏散風(fēng)熱等傳統(tǒng)功效與其抗炎、抗菌、抗病毒等作用密切相關(guān)。經(jīng)筆者查詢文獻發(fā)現(xiàn)，連翹苷可抑制促炎因子的產(chǎn)生和MAPK通路的激活來預(yù)防急性肺損傷[23];可逆轉(zhuǎn)β-淀粉樣蛋白片段25-35損傷導(dǎo)致的2-花生四烯酸甘油酯水平下降，從而改善阿爾茲海默病的癥狀[24]。連翹酯苷A可調(diào)節(jié)MAPK、PI3K/Akt信號通路來抑制炎癥反應(yīng)[25-27]。松脂素-β-D-葡萄糖苷可通過胃腸代謝后發(fā)揮抗炎、抗真菌活性[28]。腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）是炎癥反應(yīng)中一類重要的細(xì)胞因子，通常與其他細(xì)胞因子共同參與抑制細(xì)胞炎癥、阻止細(xì)胞凋亡反應(yīng)[29]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，蘆丁可通過降低TNF-α、TNF受體相關(guān)因子6水平，抑制核因子κB的磷酸化來發(fā)揮抗炎作用[30-31]。連翹揮發(fā)油具有明顯的止痛和抗病毒作用，也可通過抑制炎癥因子表達[32]、下調(diào)代謝物鞘氨醇的水平來發(fā)揮抗炎作用[33]，還可通過下調(diào)下丘腦環(huán)磷酸腺苷含量來發(fā)揮解熱作用[34]。本研究篩選的松油烯-4-醇、α-水芹烯、α-蒎烯、β-蒎烯在連翹揮發(fā)油中含量較高，可能是連翹揮發(fā)油發(fā)揮藥效的主要成分。

綜上所述，連翹苷、連翹酯苷A、松脂素-β-D-葡萄糖苷、蘆丁、松油烯-4-醇、α-水芹烯、α-蒎烯、β-蒎烯 8個成分可作為連翹的Q-marker。

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（收稿日期：2021-08-22 修回日期：2021-12-25）

（編輯：唐曉蓮）

基金項目：國家科技重大專項“重大新藥創(chuàng)制”項目（No.2017ZX09301058）;山東省中醫(yī)藥科技項目（No.2021Q073）;山東省高校中藥質(zhì)量控制與全產(chǎn)業(yè)鏈建設(shè)協(xié)同創(chuàng)新中心項目（No.CYLXTCX2020-09）

碩士研究生。研究方向：中藥鑒定學(xué)、中藥質(zhì)量控制與中藥資源。E-mail：jingfengtang@163.com

通信作者：教授，博士生導(dǎo)師，博士。研究方向：中藥鑒定學(xué)、中藥質(zhì)量控制與中藥資源。E-mail：13969141796@163.com