胡進平 陳 健 張金玉 任文陟
(吉林大學動物科學學院,長春 130062)
比格犬(Beagle),又稱為米格魯獵兔犬。由于其具有性格溫順,適應性強等優(yōu)良的特點,且在實驗結果上具有均一性、可重復性等特征,是世界上公認的實驗用犬[1]。在生理學、毒理學和外科學等眾多學科中,比格犬均被廣泛應用[2]。而比格犬的飼養(yǎng)環(huán)境則是根據(jù)實驗需求變化而變化,大多數(shù)為普通環(huán)境。為了更好地提供實驗環(huán)境,SPF級比格犬對于飼養(yǎng)環(huán)境的要求更加嚴格。由于不同的飼養(yǎng)環(huán)境會導致比格犬的血液學和生理生化指標等相關參考值產(chǎn)生差異[3]。
本研究以SPF級比格犬作為研究對象,分析隨著月齡增長血液生化指標的變化,并分析血液生化指標不同月齡的變化及其原因,以此來對SPF級比格犬的基礎資料進行填充,有利于SPF級比格犬的育種,并為有關疾病的預防提供理論依據(jù),填充SPF級比格犬作為國際公認的實驗用犬的血液相關指標的數(shù)據(jù)庫。
SPF級比格犬由青島博隆實驗動物有限公司(中國唯一的SPF級實驗用比格犬種群飼養(yǎng)基地)提供,嚴格按照SPF級要求進行飼養(yǎng)。隨機選取健康且體質量給出范圍的2、6和9月齡比格犬各12只用于后續(xù)樣本采集。
分別采集不同月齡SPF級比格犬的血樣。采血前,禁食12 h,在清醒不麻醉狀態(tài)下,于前肢靜脈采血10 mL,分裝于含有肝素鋰的抗凝采血管,作為生化指標監(jiān)測使用。
實驗主要進行的血液生化指標包括:鉀(K,mmol/L)、鈉(Na,mmol/L)、氯(Cl,mmol/L)、鈣(Ca,mmol/L)、鎂(Mg,mmol/L)、無機磷(P,mmol/L)、血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、血清天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、血清總蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、總膽紅素(TBIL)、血清堿性磷酸酶(ALP)、乳酸脫氫酶(LDH)、血清肌酸激酶(CK)、尿素(urea)、尿酸(UA)、血清總膽固醇(TC)、血清三酰甘油(TG)和空腹血糖(GLU)。
貝克曼庫爾特AU5800全自動生化分析儀(貝克曼庫爾特有限公司)。
不同月齡SPF級比格犬的血液電解質濃度分析結果。如圖1A~C,鈉離子(Na+)濃度在9月齡最高(145.00 mmol/L),與2月齡氯離子(Cl-)濃度(108.48 mmol/L)比較,6月齡(106.14 mmol/L)降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。9月齡趨于穩(wěn)定,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);與2月齡鉀(K)和無機磷(P)比較,9月齡差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。鎂離子(Mg2+)含量不同月齡無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
如圖1D所示,在不同月齡中,血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)含量上下浮動,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
如圖1F,尿酸(UA)的含量6月齡降低,9月齡上升,并與6月齡相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)??偰懠t素(TBIL)含量沒有較大的波動。SPF級比格犬不同月齡的三酰甘油(TG)和空腹時血糖含量均處于一個平穩(wěn)狀態(tài),不同月齡之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。如圖1G中所示,尿素(urea)含量在6月齡時達到5.73 mmol/L(5.43~6.87 mmol/L),到9月齡時出現(xiàn)顯著性下降(P<0.05)。血清中總膽固醇(TC)含量6月齡呈上升趨勢,9月齡趨于平穩(wěn),差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
注:A~C.血液電解質離子濃度分析;D.血液肝功能指標分析;E.血液蛋白含量分析;F.血液尿素和總膽紅素含量分析;G.血液代謝相關指標分析;H.血液ALP、LDH、CK含量分析
血清中電解質的含量,是檢測心力衰竭和失水等的必需項目。不同月齡的檢測結果,鈉離子(Na+)含量最高,且隨著月齡的增加逐漸升高。鎂離子(Mg2+)含量在所有無機鹽中最低,且在不同月齡中沒有出現(xiàn)明顯變化[4]。根據(jù)這些無機鹽的變化可以適當調整SPF級犬的飼養(yǎng),適當補充相應的無機鹽能夠增加SPF級犬的健康程度,有利于其生長[5]。
血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)和血清天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)等酶的含量能夠快速準確的反應肝細胞是否發(fā)生損傷以及損傷的程度[6]。血清總蛋白(TP)包括了血清白蛋白(ALB)和球蛋白兩種,是能夠清楚反應肝合成和儲存功能的指標。白蛋白含量的下降表示肝合成能力出現(xiàn)問題[7-8]。血清堿性磷酸酶(ALP)、乳酸脫氫酶(LDH)和血清肌酸激酶(CK)等酶類的含量則能夠充分的反應出動物機體的健康水平[9]。
肝和腎的分泌與排泄等功能則是通過總膽紅素(TBIL)和尿酸(UA)進行的反應[10]。膽固醇(TC)和三酰甘油(TG)是臨床上重要的生化指標,三酰甘油是血液中十分必要的一種脂肪[11]。血糖(GLU)是指血液中的葡萄糖,是機體中相當重要的成分,能夠保障機體中的能量來源,維持機體的運行[12]。不同月齡間的SPF級比格犬的血糖和三酰甘油的含量沒有明顯差異,SPF級比格犬在不同月齡中的健康狀態(tài)保持相對穩(wěn)定。
通過以上分析,不同月齡SPF級比格犬的血液生化指標的分析,豐富了SPF級實驗用犬的基礎數(shù)據(jù),重新考慮怎么描述SPF級比格犬的飼養(yǎng)以及環(huán)境,繼續(xù)維持均一性、可重復性的優(yōu)良特點,能夠更加健康,避免疾病的侵害。