7%甲維·氯蟲苯甲酰胺懸浮劑對(duì)七星瓢蟲室內(nèi)毒性研究

須秋靜 蔣立奔 唐冬蘭 張普娟 郭成寶 曹榮祥

摘??? 要：為了評(píng)價(jià)殺蟲劑對(duì)七星瓢蟲的毒性風(fēng)險(xiǎn)，采用藥膜法測(cè)定了7%甲維·氯蟲苯甲酰胺懸浮劑對(duì)七星瓢蟲的室內(nèi)毒性效應(yīng)，設(shè)置0.606，0.909，1.36，2.05，3.08，4.62 g a.i.·hm-2 6個(gè)濃度處理，以去離子水和丙酮處理為對(duì)照，監(jiān)測(cè)七星瓢蟲死亡數(shù)、羽化數(shù)和化蛹數(shù)指標(biāo)。結(jié)果表明，7%甲維·氯蟲苯甲酰胺懸浮劑對(duì)七星瓢蟲第9～15天的半致死劑量（LR50）均為1.588 g a.i.·hm-2，毒力回歸方程為Y=3.037X-0.610;溶劑（丙酮）對(duì)照的七星瓢蟲幼蟲全部化蛹，空白對(duì)照（去離子水）幼蟲化蛹9.7頭，隨著7%甲維·氯蟲苯甲酰胺懸浮劑處理濃度的增加，化蛹數(shù)逐漸下降，從8.7頭降低到0.3頭，化蛹的幼蟲100%完成羽化。該結(jié)果為7%甲維·氯蟲苯甲酰胺懸浮劑的合理使用提供了參考數(shù)據(jù)。

關(guān)鍵詞：7%甲維·氯蟲苯甲酰胺懸浮劑;七星瓢蟲;室內(nèi)毒力測(cè)定

中圖分類號(hào)：S476+.2????????? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A???????? DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2022.01.010

Study on Indoor Toxicity of 7% Methotrexate·Chloramphetamine Benzamide Suspension to Coccinella septempunctata

XU Qiujing， JIANG Liben， TANG Donglan， ZHANG Pujuan， GUO Chengbao， CAO Rongxiang

（Nanjing Institute of Agricultural Sciences in Jiangsu Hilly Area， Nanjing， Jiangsu 210046，China）

Abstract： In order to assess the toxicity risk of insecticides to Coccinella septempunctata，the indoor toxicity of 7% methotrexate·chloramphetamine benzamide suspension against the ladybird beetles Coccinella septempunctata were tested in the laboratory using the insecticide film method，setting six concentration treatments including 0.606，0.909，1.36，2.05，3.08，4.62 g a.i.·hm-2，with deionized water and acetone treatments as controls，the indicator of death number，eclosion number and pupation number were monitored.The results showed that the LR50 values were 1.588 g a.i.·hm-2 on the 9th～15th day，virulence regression equations wereY=3.037X-0.610.All the? larvae treated with acetone and 9.7 larvae with deionized water were pupated.With the increase of reagent concentration，the number of pupae gradually decreased from 8.7 to 0.3，and the eclosion rate of pupated larvae were 100%.This paper could provide a reference for the reasonable use of 7% methotrexate·chloramphetamine benzamide suspension to Coccinella septempunctata.

Key words： 7% methotrexate·chloramphetaminebenzamide suspension; Coccinella septempunctata; indoor toxicity test

收稿日期：2021-09-03

基金項(xiàng)目：江蘇（南京）現(xiàn)代農(nóng)業(yè)（草莓-花卉）科技綜合示范基地（JATS[2021]008）;亞夫科技服務(wù)項(xiàng)目（KF（20）1021）

作者簡介：須秋靜（1989—），女，江蘇江陰人，農(nóng)藝師，碩士，主要從事果樹病蟲害綜合防治方面研究。

通訊作者簡介：曹榮祥（1971—），男，江蘇高郵人，副研究員，主要從事草莓栽培與生理方面研究。

七星瓢蟲（Coccinella septempunctata Linnaeus）屬于鞘翅目瓢蟲科，主要捕食各種農(nóng)作物及果樹上的蚜蟲，在我國各省均有分布，是小麥、棉花、油料和蔬菜等主要作物上蚜蟲的重要捕食性天敵[1-2]，近年來發(fā)現(xiàn)七星瓢蟲對(duì)草地貪夜蛾也有一定的控害效果[3]，是應(yīng)用較為成功的天敵產(chǎn)品之一。

甲維·氯蟲苯甲酰胺是由甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽和氯蟲苯甲酰胺兩種作用機(jī)理的殺蟲劑混配而成，具有胃毒、觸殺及葉片滲透作用?？煞乐胃仕{(lán)小菜蛾、甜菜夜蛾、水稻稻縱卷葉螟、三化螟、棉花棉鈴蟲、蘋果桃小食心蟲等害蟲。目前大多數(shù)研究集中于傳統(tǒng)殺蟲劑對(duì)七星瓢蟲的急性毒性效應(yīng)，例如有機(jī)磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥等的研究[4-8]，而對(duì)近年來新上市的殺蟲劑的研究相對(duì)較少。本試驗(yàn)選擇7%甲維·氯蟲苯甲酰胺懸浮劑作為研究對(duì)象，在室內(nèi)條件下，測(cè)定了其對(duì)七星瓢蟲的毒性，為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上科學(xué)用藥提供參考。

1 材料和方法

1.1 儀器和藥劑

1.1.1 試驗(yàn)儀器 人工氣候箱、電子天平、數(shù)位式照度計(jì)、藥膜管制備機(jī)、無色指形管（直徑2.51 cm，管長4.40 cm，內(nèi)表面積39.6 cm2）等。

1.1.2 供試藥劑 7%甲維·氯蟲苯甲酰胺懸浮劑（生產(chǎn)廠家：河北蘭邦生物科技有限公司）。供試生物：七星瓢蟲 （Coccinella septempunctata），江蘇丘陵地區(qū)南京農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所昆蟲實(shí)驗(yàn)室從福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院引種，室內(nèi)用豌豆修尾蚜人工繁殖、飼養(yǎng)，試驗(yàn)采用七星瓢蟲二齡幼蟲。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)藥劑設(shè)置0.606，0.909，1.36，2.05，3.08，4.62 g a.i.·hm-26個(gè)試驗(yàn)濃度，分別記為C1、C2、C3、C4、C5、C6，同時(shí)設(shè)置空白（去離子水）對(duì)照組和溶劑（丙酮）對(duì)照組，試驗(yàn)組和對(duì)照組均設(shè)置 3 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù) 10 頭瓢蟲。試驗(yàn)溫度為25±2 ℃，相對(duì)濕度為70%～78%，光照周期為16 h ∶ 8 h（光照 ∶ 黑暗），光照強(qiáng)度為 1 100～1 200 lx。

試驗(yàn)采用藥膜法進(jìn)行毒力水平測(cè)定。移取1.0 mL試驗(yàn)濃度溶液于內(nèi)壁面積為39.6 cm2指形管中，充分滾吸均勻，待工作溶液完全揮發(fā)即得相應(yīng)濃度的藥膜管，空白對(duì)照組和溶劑對(duì)照組分別移取 1.0 mL 的去離子水和丙酮于內(nèi)壁面積為 39.6 cm2指形管中，充分滾吸均勻，待去離子水和丙酮完全揮發(fā)即得空白對(duì)照組和溶劑對(duì)照組的藥膜管。每個(gè)藥膜管中轉(zhuǎn)入 1 頭2齡期的七星瓢蟲，飼喂足量的活蚜蟲供瓢蟲取食，用紗布封緊管口，之后每天飼喂充足活蚜蟲，每次飼喂前將殘余的蚜蟲清理干凈，保證瓢蟲能夠充分接觸藥膜。對(duì)照組與試驗(yàn)組同時(shí)進(jìn)行。

每天觀察并記錄七星瓢蟲的中毒癥狀與死亡數(shù)量。記錄死亡的幼蟲、蛹與行為異常（活動(dòng)不靈活、抽搐等）的瓢蟲數(shù)直至化蛹?；己?，繼續(xù)觀察至成蟲羽化，計(jì)算羽化率，未羽化成蟲均計(jì)入死亡蟲數(shù)。

面積濃度（g a.i.·hm-2）=

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析

采用統(tǒng)計(jì)軟件 SPSS 19.0 進(jìn)行相關(guān)數(shù)據(jù)方差分析，并利用SPSS 19.0中Probit分析方法對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算藥劑濃度的對(duì)數(shù)與校正死亡率之間的回歸方程的 a 和 b 值、LR50、R2和 95%置信區(qū)間值。

2 結(jié)果與分析

2.1 各處理對(duì)七星瓢蟲死亡率的影響

由表1可知，7%甲維·氯蟲苯甲酰胺懸浮劑對(duì)七星瓢蟲2齡幼蟲具有一定殺傷力，且死亡率隨藥劑濃度的升高而增大?？瞻讓?duì)照和丙酮對(duì)照的處理幾乎沒有死亡，C1—C6處理分別在藥劑處理后的第6天、第8天、第5天、第9天、第5天、第3天死亡率達(dá)到最高值并在之后保持無新增死亡記錄。

2.2 藥劑處理對(duì)七星瓢蟲的毒力測(cè)定

由表2可知，隨著供試藥劑濃度增大，其毒力呈明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系。隨著處理天數(shù)的增加，7%甲維·氯蟲苯甲酰胺對(duì)七星瓢蟲的半致死劑量（LR50）的值不斷降低，當(dāng)處理達(dá)到第9天時(shí)，對(duì)七星瓢蟲的毒力水平穩(wěn)定，即對(duì)七星瓢蟲的LR50為1.588 g a.i.·hm-2，

95 %置信限為1.453～1.734 g a.i.·hm-2，毒力回歸方程為Y=3.037X-0.610。

2.3 各處理對(duì)七星瓢蟲羽化量的影響

由表3可以看出，隨著處理天數(shù)的增加，羽化量顯著增加;同時(shí)，隨著藥劑處理濃度的增加，羽化量顯著降低（P<0.01）。所有處理均在第12天開始出現(xiàn)羽化，并在第15天羽化結(jié)束?？瞻祝ㄈルx子水）對(duì)照總計(jì)羽化9.7頭，溶劑（丙酮）對(duì)照全部羽化。C1處理共羽化成功8.7頭，C2處理共羽化成功7.0頭，C3處理共羽化成功6.0頭，C4處理共羽化成功3.7頭，C5處理共羽化成功2.3頭，C6處理共羽化成功0.3頭。

2.4 各處理對(duì)七星瓢蟲化蛹量的影響

從表4可以看出，7%甲維·氯蟲苯甲酰胺懸浮劑處理會(huì)顯著影響七星瓢蟲的化蛹量。隨著處理濃度的增加，化蛹數(shù)逐漸下降。除C6處理外，其他所有處理均從第8天開始化蛹，空白（去離子水）對(duì)照至第10天結(jié)束化蛹，化蛹期為3 d，化蛹數(shù)為9.7頭;溶劑（丙酮）對(duì)照至第10天結(jié)束化蛹，化蛹期為3 d，化蛹數(shù)為10頭;C1處理至第10天結(jié)束化蛹，化蛹期為3 d，化蛹數(shù)為8.7頭;C2處理至第11天結(jié)束化蛹，化蛹期為4 d，化蛹數(shù)為7.0頭;C3處理至第11天結(jié)束化蛹，化蛹期為4 d，化蛹數(shù)為6.0頭;C4處理至第10天結(jié)束化蛹，化蛹期為3 d，化蛹數(shù)為4.0頭;C5處理至第11天結(jié)束化蛹，化蛹期為4 d，化蛹數(shù)為2.3頭;C6處理僅在第10天有化蛹，化蛹期為1 d，化蛹數(shù)為0.3頭。

3 結(jié)論與討論

化學(xué)防治是農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)中最常用的一種病蟲害防治措施，而天敵與病蟲害幾乎共處同一環(huán)境中，農(nóng)藥防治病蟲害的同時(shí)，對(duì)捕食性天敵也存在威脅，并且不同藥劑、不同濃度對(duì)不同天敵的毒性差異較大[9]。本研究結(jié)果表明，7%甲維·氯蟲苯甲酰胺懸浮劑對(duì)七星瓢蟲的毒性主要表現(xiàn)為急性毒性，隨著藥劑濃度的增加，七星瓢蟲的化蛹量和羽化量均有不同程度的降低，但沒有死亡的幼蟲基本上能夠正?；己陀鸹?/p>

化學(xué)殺蟲劑一般具有廣譜性，在防治害蟲的同時(shí)，易殺死害蟲的天敵，存活的天敵也會(huì)產(chǎn)生亞致死效應(yīng)[10-11]，易出現(xiàn)一些主要害蟲的再猖獗和次要害蟲上升為主要害蟲。亞致死效應(yīng)的影響主要包括對(duì)天敵昆蟲的行為和生理的影響，例如藥劑處理后，會(huì)縮短天敵的壽命、發(fā)育遲緩、繁殖力下降等[12-13]，因此也不能忽視7%甲維·氯蟲苯甲酰胺懸浮劑對(duì)七星瓢蟲可能存在的慢性毒性。

因此，在進(jìn)行害蟲防治時(shí)，應(yīng)充分考慮農(nóng)藥品種和劑量的選擇，最大限度兼顧保護(hù)天敵種群。本試驗(yàn)中7%甲維·氯蟲苯甲酰胺懸浮劑對(duì)七星瓢蟲存在急性毒性，在使用過程中應(yīng)控制劑量或者避開七星瓢蟲等天敵的幼蟲期和繁殖期，以保護(hù)農(nóng)田內(nèi)的天敵種群，發(fā)揮其自然控制作用。

參考文獻(xiàn)：

[1] 程英，李忠英，李鳳良.七星瓢蟲的研究進(jìn)展[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，34（5）： 117-119，116.

[2] 金劍雪，李鳳良，程英，等.七星瓢蟲的抗藥性選育及其生物學(xué)特性研究[J].中國生物防治學(xué)報(bào)，2014，30（1）： 45-50.

[3] 孔琳，李玉艷，王孟卿，等.七星瓢蟲對(duì)草地貪夜蛾低齡幼蟲的捕食能力評(píng)價(jià)[J].中國生物防治學(xué)報(bào)，2019，35（5）： 715-720.

[4] 郭志芯，蔣紅云，張?zhí)m，等.四種殺蟲劑對(duì)七星瓢蟲和松毛蟲赤眼蜂的負(fù)效應(yīng)[J].中國生物防治學(xué)報(bào)，2019，35（4）： 542-547.

[5] 賈海民，高占林，潘文亮，等.20種殺蟲劑對(duì)七星瓢蟲不同蟲態(tài)的毒力測(cè)定[J].昆蟲天敵，1999（4）： 160-163.

[6] 王小藝，沈佐銳.四種殺蟲劑對(duì)桃蚜和異色瓢蟲的選擇毒性及害蟲生物防治與化學(xué)防治的協(xié)調(diào)性評(píng)價(jià)[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2002，4（1）： 34-38.

[7] 金劍雪，程英，李忠英，等.殺蟲劑對(duì)七星瓢蟲幼蟲的敏感性測(cè)定[J].現(xiàn)代農(nóng)藥，2009，8（5）： 49-51.

[8] 冀祿祿，董宇奎，李照會(huì).四種殺蟲劑對(duì)七星瓢蟲成蟲的室內(nèi)毒力測(cè)定[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011（5）： 74-75.

[9] 劉瓊，袁善奎，周欣欣，等.速滅威對(duì)七星瓢蟲的急性毒性及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理，2021，42（1）： 27-32.

[10] DELPUECH J M，LEGALLET B，F(xiàn)OUILLET P.Partial compensation of the sublethal effect of deltamethrin on the sex pheromonal communication of Trichogramma brassicae[J].Chemosphere，2001，42（8）： 985-991.

[11] DESNEUX N，DECOURTYE A，DELPUECH J M.The sublethaleffects of pesticides on beneficialarthropods[J].Annual Review of Entomology，2007（52）： 81-106.

[12] 孫小玲，陳威，楊巧燕，等.三種殺蟲劑對(duì)多異瓢蟲的毒力及亞致死效應(yīng)[J].草地學(xué)報(bào)，2016，24（5）： 1094-1099.

[13] VARMA G C，SINGH P P.Effects of insecticides on the emergence of Trichogramma brasiliensis[Hymenoptera： Trichogrammatidae] from parasitized host eggs[J].BioControl，1987，32（5）： 443-448.