幾種殺菌劑對大豆銹病的室內(nèi)活性及田間防效比較

鄭 斐，李宏偉，張 揚，周 飛，賈云鶴

（上海曉明檢測技術(shù)服務(wù)有限公司，上海 201612）

大豆銹病是由豆薯層銹菌（Phakopsora pachyrhizi）侵染引起的一種氣傳真菌病害[1]，主要為害大豆的葉片、葉柄，嚴(yán)重時也可為害大豆的莖稈和豆莢[2]。病害病原菌從大豆子葉期到成熟期均可發(fā)生侵染，開花后侵染大豆發(fā)病較重[3]，染病后的大豆植株多從下部葉片開始發(fā)病，癥狀由下而上蔓延，導(dǎo)致受害葉片迅速變黃、干枯并提早脫落，后期導(dǎo)致癟莢或空莢[4]。我國先后有24個省報道有大豆銹病發(fā)生，每年大豆銹病的發(fā)病面積約為66.67 萬hm2[5]，一般損失在10%～30%，發(fā)病嚴(yán)重地塊損失達(dá)50%以上，甚至?xí)斐山^收，嚴(yán)重制約了我國大豆生產(chǎn)的發(fā)展[6-8]。

大豆銹病的防治手段包括：培育抗病品種[9]；作物輪作、避免重茬、合理安排田間種植密度等農(nóng)業(yè)措施[6]，以及篩選活性生防菌、提煉生物制劑等生物防治手段[10]。但目前，化學(xué)農(nóng)藥仍然是大豆銹病最高效、快捷的防治手段[11]。大豆銹病常用的防治藥劑主要包括三唑類、甲氧基丙烯酸酯類和琥珀酸脫氫酶抑制劑類等殺菌劑[12-13]。其中，三唑類殺菌劑主要有戊唑醇、苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑等；甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑主要有嘧菌酯、吡唑醚菌酯、肟菌酯等；琥珀酸脫氫酶抑制劑類殺菌劑主要有苯并烯氟菌唑、氟唑菌酰胺、氟吡菌酰胺等。生產(chǎn)中防治大豆銹病的藥劑品種較多，為了便于更好地指導(dǎo)農(nóng)民用藥，亟待明確不同結(jié)構(gòu)類型的殺菌劑及相同結(jié)構(gòu)類型殺菌劑中的不同品種對大豆銹病的活性差異[14]。

本研究采用盆栽法測定了8種殺菌劑對大豆銹病的室內(nèi)保護和治療活性，同時選擇室內(nèi)活性表現(xiàn)較優(yōu)的3種殺菌劑在沈陽和上海兩地進行田間防效驗證，以期篩選出高效殺菌劑，為防治大豆銹病提供指導(dǎo)和借鑒。

1 材料與方法

1.1 試驗靶標(biāo)

豆薯層銹菌(Phakopsora pachyrhizi)，該靶標(biāo)是2020 年在沈陽田間發(fā)病的大豆葉片上收集的銹菌夏孢子，之后在本實驗室大豆植株上長期活體保存。

1.2 供試藥劑

室內(nèi)盆栽試驗（均使用原藥TC）：98%嘧菌酯TC、98%肟菌酯TC，92.2%吡唑醚菌酯TC，97%戊唑醇TC，95%丙硫菌唑TC、96%氯氟醚菌唑TC、97%苯并烯氟菌唑TC、97%氟唑菌酰胺TC、99%百菌清TC，由本機構(gòu)提供。

田間小區(qū)試驗：100 g·L-1苯并烯氟菌唑乳油（EC）、250 g·L-1嘧菌酯懸浮劑（SC），先正達(dá)作物有限公司生產(chǎn)；480 g·L-1丙硫菌唑SC，上海泰禾國際貿(mào)易有限公司提供。

1.3 試驗方法

1.3.1 室內(nèi)保護活性試驗

選擇長勢一致的兩葉一心期盆栽大豆苗，將大豆植株放置于生測噴霧塔轉(zhuǎn)盤上（頻率設(shè)定為F35，即14 rpm）。用喉頭噴霧器（壓力為0.1 MPa）將不同梯度濃度的藥劑均勻噴灑于準(zhǔn)備好的大豆苗上，每處理3盆缽大豆，噴施藥液10 mL，施藥后放置于室內(nèi)自然晾干。藥劑處理24 h 后，將配制好的5×105個·mL-1的孢子液接種于大豆葉片上，自然晾干后置于保濕間，溫度25 ℃，濕度100%，黑暗保濕培養(yǎng)24 h。24 h之后，放至25 ℃左右培養(yǎng)室正常培養(yǎng)，光暗比為12 hL/12 hD，空氣相對濕度為60%～80%。

接種孢子后12～15 d，待空白對照發(fā)病穩(wěn)定（病斑占葉面積90%以上且產(chǎn)孢量大）時，參考GB/T 17980.89-2004[15]，調(diào)查不同藥劑的保護活性。

分級方法如下：

0級：無??；

1級：病斑面積占整片葉面積的5%以下；

3級：病斑面積占整片葉面積的6%～25%；

5級：病斑面積占整片葉面積的26%～50%；

7級：病斑面積占整片葉面積的51%～75%；

9級：病斑面積占整片葉面積的76%以上。

用下面的公式計算各處理的病情指數(shù)和防治效果：

防治效果=(清水對照平均病情指數(shù)-藥劑處理施藥后平均病情指數(shù))/清水對照平均病情指數(shù)×100

利用DPS（v16.05）統(tǒng)計分析軟件，對藥劑濃度和防治效果進行數(shù)量反應(yīng)生測概率值分析，計算各藥劑的EC75值及其95%置信限，得到毒力基線和相關(guān)系數(shù)。

1.3.2 室內(nèi)治療活性試驗

將配制好的5×105個·mL-1的孢子液接種于大豆葉片上靜置24 h 后，再均勻噴灑不同梯度濃度的藥劑，其他同“1.3.1”。

1.3.3 田間小區(qū)藥效試驗

基于室內(nèi)試驗結(jié)果，選擇各結(jié)構(gòu)類型中活性最優(yōu)的藥劑品種（480 g·L-1丙硫菌唑SC、250 g·L-1嘧菌酯SC、100 g·L-1苯并烯氟菌唑SC）進行田間藥效評價，使用3 種殺菌劑的田間推薦用量，比較其對大豆銹病的防效差異。

2021年進行兩地田間藥效試驗。1）試驗點1：沈陽市蘇家屯試驗地，大豆品種為遼豆15，于當(dāng)年5 月中旬露地播種。8 月14 日首次施藥，8 月28 日第二次施藥，共施藥2 次。2）試驗點2：上海市新浜鎮(zhèn)試驗地，大豆品種為遼豆15，于當(dāng)年8 月27 日在日光大棚內(nèi)播種。10月13日首次施藥，10月21日第二次施藥，共施藥2次。

試驗地均于首次施藥前一周人工接種大豆銹病孢子，孢子濃度為5×104個·mL-1。施藥方法為莖葉噴霧法。

二次施藥后25 d 進行末次藥效調(diào)查。調(diào)查全部小區(qū)，每小區(qū)隨機調(diào)查15株，每株從基部第一個三出復(fù)葉開始，向上調(diào)查4 片葉。調(diào)查及計算方法參照國標(biāo)GB/T 17980.89-2004。用“1.3.1”的公式計算各處理的病情指數(shù)和防治效果。

用DPS v16.05 統(tǒng)計分析軟件，對各處理的防效進行鄧肯氏新復(fù)極差法差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同殺菌劑對大豆銹病的室內(nèi)保護活性分析

8種試驗藥劑對大豆銹病表現(xiàn)出不同程度的保護活性，其中丙硫菌唑活性最優(yōu)，EC75值為0.152 2 mg·L-1，其次為嘧菌酯、苯并烯氟菌唑、吡唑醚菌酯，EC75值依次為0.187 6、0.286 3、0.692 0 mg·L-1，以上4 個藥劑的EC75值均小于1。EC75值介于1～10 mg·L-1之間的藥劑為肟菌酯、戊唑醇、氟唑菌酰胺、氯氟醚菌唑，EC75值依次為1.533 1、2.494 5、2.829 0、6.440 6 mg·L-1（見表1）。

表1 8種殺菌劑對大豆銹病的室內(nèi)保護活性測定

2.2 不同殺菌劑對大豆銹病的室內(nèi)治療活性分析

8 種試驗藥劑中，丙硫菌唑?qū)Υ蠖逛P病的治療效果最好，EC75值為0.845 1 mg·L-1，其次為氯氟醚菌唑和戊唑醇，EC75值分別為：3.541 6 mg·L-1和4.383 3 mg·L-1，三者EC75值均小于5 mg·L-1。EC75值介于10～20 mg·L-1之間的藥劑依次為苯并烯氟菌唑、嘧菌酯、肟菌酯，EC75值分別是13.07 3、15.754 9、15.874 7 mg·L-1。再次是吡唑醚菌酯，EC75值為26.939 1 mg·L-1。氟唑菌酰胺在所有藥劑中表現(xiàn)最差，EC75值為50.458 6 mg·L-1（見表2）。

表2 8種殺菌劑對大豆銹病的室內(nèi)治療活性測定

2.3 田間藥效分析

兩地試驗結(jié)果表明：供試的3 種殺菌劑對田間大豆銹病均有一定的防治效果。其中，480 g·L-1丙硫菌唑SC 和100 g·L-1苯并烯氟菌唑SC 對大豆銹病的防效較好，這兩種藥劑在66.67 mg·L-1劑量下對大豆銹病的防效均可達(dá)到80%以上，且480 g·L-1丙硫菌唑SC的防效（97.51%/91.31%）優(yōu)于100 g·L-1苯并烯氟菌唑SC（85.08%/80.15%）。250 g·L-1嘧菌酯SC 在66.67 mg·L-1劑量下對大豆銹病的防效略低于前兩者，防治效果分別為53.89%和65.41%（見表3）。

表3 不同殺菌劑對大豆銹病的田間藥效

3 結(jié)論與討論

本研究根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)類型，選擇了甲氧基丙烯酸酯類、三唑類（包含三唑硫酮類）、琥珀酸脫氫酶抑制劑類殺菌劑中的8 個品種對大豆銹病進行室內(nèi)保護和治療活性測定，結(jié)果表明3 類藥劑對大豆銹病均表現(xiàn)出較優(yōu)的保護活性，三唑類殺菌劑對大豆銹病的治療活性最優(yōu)，其次為琥珀酸脫氫酶抑制劑類，甲氧基丙烯酸酯類位列最后。

室內(nèi)研究結(jié)果表明：丙硫菌唑?qū)Υ蠖逛P病表現(xiàn)出優(yōu)異的保護和治療活性。丙硫菌唑?qū)Υ蠖逛P病室內(nèi)保護活性的EC75值僅為0.152 2 mg·L-1，與嘧菌酯相當(dāng)，略優(yōu)于苯并烯氟菌唑、吡唑醚菌酯，明顯優(yōu)于肟菌酯、戊唑醇、氟唑菌酰胺、氯氟醚菌唑和百菌清。室內(nèi)治療活性試驗中，丙硫菌唑?qū)Υ蠖逛P病的EC75值為0.845 1 mg·L-1，優(yōu)于氯氟醚菌唑和戊唑醇，明顯優(yōu)于苯并烯氟菌唑、嘧菌酯、肟菌酯、吡唑醚菌酯和氟唑菌酰胺。

綜合各藥劑的保護和治療活性，三唑類殺菌劑中丙硫菌唑的活性最優(yōu)，保護和治療活性的EC75值分別為0.152 2 mg·L-1和0.845 1 mg·L-1，其次為戊唑醇和氯氟醚菌唑；甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑中嘧菌酯的活性最優(yōu)，保護和治療活性的EC75值分別為0.187 6 mg·L-1和15.754 9 mg·L-1，其次為肟菌酯和吡唑醚菌酯；琥珀酸脫氫酶抑制劑類殺菌劑中苯并烯氟菌唑的活性最優(yōu)，保護和治療活性的EC75值分別為0.286 3 mg·L-1和13.073 0 mg·L-1，其次為氟唑菌酰胺。選擇各結(jié)構(gòu)類型中活性最優(yōu)的藥劑品種在沈陽市和上海市兩地進行田間藥效評價，480 g·L-1丙硫菌唑懸浮劑在66.67 mg·L-1有效用量下防效達(dá)到97.51%和91.31%，優(yōu)于同等施藥劑量下100 g·L-1苯并烯氟菌唑懸浮劑（85.08%/80.15%）和250 g·L-1嘧菌酯懸浮劑（53.89%/65.41%）的防效。

綜合室內(nèi)和田間試驗結(jié)果，丙硫菌唑、苯并烯氟菌唑、嘧菌酯及其同類藥劑均可用于大豆銹病的防治。王鵬飛研究發(fā)現(xiàn)嘧菌酯和苯醚甲環(huán)唑?qū)Υ蠖逛P病具有較好的保護和治療活性[14]，這與本研究結(jié)果一致，但本研究發(fā)現(xiàn)丙硫菌唑無論室內(nèi)還是田間均優(yōu)于其他藥劑。為提高藥效，上述藥劑應(yīng)該在大豆銹病發(fā)病前或發(fā)病初期使用，根據(jù)氣候條件間隔10～14 d 左右，施藥2～3次，使用劑量不低于66.67 mg·L-1。

丙硫菌唑作為新型三唑硫酮類殺菌劑，具有良好的內(nèi)吸性、優(yōu)異的保護治療活性及持效期長等優(yōu)點，與其他類殺菌劑無交互抗性，可同時與三唑類、甲氧基丙烯酸酯類和吡唑類殺菌劑進行復(fù)配[16-17]。目前，丙硫菌唑單劑及相關(guān)復(fù)配產(chǎn)品在我國僅登記用于防治部分小麥病害[18]，本研究通過室內(nèi)及田間試驗，為大豆銹病的田間防治提供一些思路和借鑒，并篩選出防治大豆銹病的藥劑丙硫菌唑，后續(xù)是否可登記用于防治大豆銹病，還需要進一步研究和探討。