玫瑰痤瘡患者血清血管活性腸肽及內毒素與腸道菌群失調的相關性研究

梁 博, 李國東, 崔 昭

(1. 河北省保定市第二醫(yī)院 皮膚科, 河北 保定, 071000;2. 河北省保定市第一中心醫(yī)院 消化三科, 河北 保定, 071000)

玫瑰痤瘡為臨床常見疾病，是主要發(fā)生在顏面中部的一種慢性炎癥性皮膚病[1]。玫瑰痤瘡主要表現為陣發(fā)性潮紅、紅斑、丘疹、膿皰等癥狀[2], 少數患者可發(fā)展成鼻贅，嚴重影響患者的生活質量。玫瑰痤瘡的發(fā)生與天然免疫、微生物感染、血管神經功能失調及皮膚屏障受損等因素有關[3]。研究[4]表明，玫瑰痤瘡患者常伴有菌群失調，與克羅恩病、潰瘍性結腸炎等胃腸道疾病有關。內毒素為革蘭陰性菌的主要致病物質，與腸道疾病感染關系密切[5], 能夠引發(fā)白細胞反應、發(fā)熱反應、內毒素休克等毒性反應。血管活性腸肽是一種神經遞質，能夠舒張腸道平滑肌，是胃腸道疾病研究的重要指標[6]。本研究分別使用凝膠法和免疫組化法檢測內毒素、血管活性腸肽在玫瑰痤瘡患者中的表達水平，探討內毒素、血管活性腸肽與腸道菌群失調的相關性，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2018年10月—2020年6月收治的玫瑰痤瘡患者70例為玫瑰痤瘡組，同期體檢健康患者70例為對照組。玫瑰痤瘡組納入標準: ① 所有患者均知情本研究內容并由本院倫理委員會批準; ② 所有患者均符合《中國玫瑰痤瘡診療專家共識》[7]中玫瑰痤瘡的診斷標準; ③ 能夠配合并完成本研究內容的患者。排除標準: ① 合并其他皮膚疾病患者; ② 合并嚴重肝腎功能不全患者; ③合并心血管疾病、腫瘤疾病患者。玫瑰痤瘡的診斷必備條件: 鼻部或口周或面頰無明顯誘因出現陣發(fā)性潮紅，且受紫外線、情緒及溫度等影響，或有持久性紅斑出現。次要條件: ① 眼部癥狀; ② 口周、面頰及鼻部肥大增生改變; ③ 鼻部、口周或面頰丘膿皰疹或丘疹; ④ 鼻部、口周或面頰毛細血管擴張; ⑤ 瘙癢、干燥、刺痛或灼熱等皮膚過敏癥狀。排除因局部外用糖皮質激素或化學換膚或口服異維A酸膠囊等明顯誘因引起的皮膚屏障受損導致的持久性紅斑或陣發(fā)性潮紅。滿足必備條件及1個次要條件即可確診。對照組年齡22～45歲，平均(33.42±3.73)歲; 體質量指數(BMI)為19.60～22.43 kg/m2, 平均(21.51±0.68) kg/m2; 無皮膚問題及胃腸疾病。玫瑰痤瘡組年齡20～46歲，平均(32.89±3.71)歲; 病程3個月～6年，平均(2.58±0.65)年; BMI為20.10～22.62 kg/m2, 平均(21.64±0.69) kg/m2; 輕度45例，中度15例，重度10例。2組患者年齡、性別、BMI等資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

表1 2組患者一般資料比較

1.2 方法

采集患者清晨空腹靜脈血5 mL, 以3 000轉/min的速度分離血清，于-30 ℃冰箱內保存待檢。分別使用凝膠法、免疫組化法檢測血清內毒素、血管活性腸肽水平，試劑盒均購自上海伊華公司。腸道菌群培養(yǎng)方法: 使用無菌便盒收取大便標本，使用系列稀釋法稀釋大便，使用雙歧桿菌BS培養(yǎng)基(Bifidobacterium BS Medium)250培養(yǎng)雙歧桿菌; 經MRS培養(yǎng)基(deMan-Rogosa-Sharpe medium)培養(yǎng)乳酸桿菌; 麥康凱瓊脂板培養(yǎng)大腸埃希桿菌; 腸球菌培養(yǎng)基(MERCK)培養(yǎng)糞腸球菌。乳酸桿菌和雙歧桿菌的培養(yǎng)需在37 ℃的厭氧環(huán)境中使用孵箱培養(yǎng)3 d, 大腸埃希桿菌和糞腸球菌需在37 ℃的需氧條件下使用孵箱培養(yǎng)2～4 d。使用ATB(Automicrobic)半自動微生物鑒定系統(tǒng)鑒定細菌，以每克糞便濕重中菌落形成的單位對數值表示結果(lg CFU/g)。

1.3 皮損面積評分

參照2004年美國國家玫瑰痤瘡協(xié)會專家委員會制定的分型分級評分標準[8]: 將重度、輕度、中度患者(主癥狀評分為0～3分)作為研究對象，其中輕度45例，中度15例，重度10例。皮損評分標準為: 0分為無皮損、丘疹及膿包、毛細血管擴張及紅斑; 1分為皮損面積不足面部面積的10%, 丘疹及膿包0～10個，毛細血管輕度擴張，紅斑輕度發(fā)紅; 2分為皮損面積為面部面積的10%～30%, 丘疹及膿包10～20個，毛細血管中度擴張，紅斑中度發(fā)紅; 3分為皮損面積超過面部面積的30%，丘疹及膿包≥20個，毛細血管重度擴張，紅斑重度發(fā)紅或紫紅。依據嚴重程度指數及皮損面積，分別對皮損面積、丘疹與膿包指數、毛細血管擴張、紅斑進行評分，皮損總面積評分=(丘疹及膿包數目+毛細血管擴張評分+紅斑評分)×皮損面積評分。玫瑰痤瘡組皮損面積評分為5～23分，平均評分為(14.12±3.25)分。

1.4 統(tǒng)計學分析

使用SPSS 22.0軟件處理數據，計量資料以均數±標準差表示，組間比較采用t檢驗; 多組間差異比較采用單因素方差分析，進一步兩兩比較采用SNK-q檢驗; 相關性行Pearson相關性分析，計數資料采用卡方檢驗;P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 2組患者血清內毒素、血管活性腸肽水平比較

玫瑰痤瘡組血清內毒素、血管活性腸肽水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組血清內毒素、血管活性腸肽水平比較

2.2 2組患者菌群情況比較

玫瑰痤瘡組腸球菌、大腸埃希桿菌、糞腸球菌數量高于對照組，雙歧桿菌數量、雙歧桿菌與腸桿菌的數量比值(B/E值)低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 2組患者菌群情況比較 lg CFU/g

2.3 不同程度玫瑰痤瘡患者血清內毒素、血管活性腸肽水平比較

輕度、中度、重度患者血清內毒素、血管活性腸肽水平呈逐漸升高趨勢，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 不同程度玫瑰痤瘡患者血清內毒素、血管活性腸肽水平比較

2.4 血清內毒素、血管活性腸肽與腸道菌群數量的相關性分析

將血清內毒素、血管活性腸肽與腸道菌群分布情況行Pearson相關性分析，結果顯示，血清內毒素、血管活性腸肽水平與腸道菌群中腸球菌、大腸埃希桿菌、糞腸球菌數量均呈正相關(P<0.05), 與雙歧桿菌數量均呈負相關(P<0.05)。見表5。

表5 血清內毒素、血管活性腸肽與腸道菌群數量的相關性分析

3 討 論

腸道菌群在維生素合成、免疫調節(jié)及營養(yǎng)物質代謝等過程中發(fā)揮重要作用[9]。腸道菌群的數量、組成、生物活性及分布與人體消化系統(tǒng)疾病、代謝活動、感染及免疫功能等密切相關[10]。在人體腸道菌群中，雙歧桿菌是腸道的優(yōu)勢菌群，是保護性有益菌; 腸球菌、大腸埃希桿菌、糞腸球菌均為致病菌[11-12]。定植抗力是評估機體菌群紊亂的常用指標, B/E為雙歧桿菌與腸桿菌的比值, B/E≥1表示腸道定植抗力正常, B/E<1表示定植抗力降低。研究[13]發(fā)現，腸道菌群失調與代謝綜合征、炎癥性腸病、2型糖尿病、肥胖、神經系統(tǒng)疾病、高血壓等多種疾病有關。早在1930年，有學者[14]提出“腸-腦-皮膚”軸理論，認為精神狀態(tài)、皮膚狀態(tài)均與腸道環(huán)境有關。腸道菌群失調可能與玫瑰痤瘡的發(fā)病關系密切，玫瑰痤瘡中41.7%患者存在空腸未知細菌的過度生長，而處于丘疹皰疹期的患者可達52.8%。研究[15]發(fā)現，抑制空腸未知細菌過度生長可顯著提高玫瑰痤瘡的治愈率，降低復發(fā)率，推測玫瑰痤瘡與腸道菌群失調具有一定相關性。本研究結果顯示，玫瑰痤瘡組腸球菌、大腸埃希桿菌、糞腸球菌數量高于對照組，雙歧桿菌數量、B/E值低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05), 提示玫瑰痤瘡患者腸道菌群出現失調，分析原因可能是腸道菌群失調情況下，人體腸道免疫、代謝功能出現異常，進而導致玫瑰痤瘡的發(fā)生。

腸道菌群參與玫瑰痤瘡的作用機制目前尚不完全清楚，研究[16]報道玫瑰痤瘡患者核轉錄因子Kappa B、Toll樣受體(TLR)2、TRL4呈高表達，說明腸道菌群經TRL模式識別并激活轉錄因子Kappa B通路，進而將下游的腫瘤壞死因子-α、白細胞介素-1β等炎性因子激活，使其釋放進入外周血。血管活性腸肽作為神經內分泌肽在胃腸道黏膜中含量較為豐富，能夠抑制胃腸道環(huán)形平滑肌，能夠與周圍嗜酸性粒細胞(EOS)、肥大細胞相互作用，形成神經-內分泌-免疫系統(tǒng)。腸道菌群失調是導致內毒素水平升高的因素之一，正常情況下，腸道菌群能夠產生少量內毒素，可清除大分子化合物、微生物及體內毒素[19]。本研究對患者血管活性腸肽及內毒素水平進行分析，結果顯示，玫瑰痤瘡患者血清內毒素、血管活性腸肽水平高于對照組，且在輕度、中度、重度患者血清中依次升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05), 提示血清內毒素、血管活性腸肽可能在玫瑰痤瘡的發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用。分析原因可能是玫瑰痤瘡患者腸道菌群失調，導致內毒素生成增多[17], 誘導血管活性腸肽的釋放[18], 進而損傷毛囊、血管內皮，最終誘導玫瑰痤瘡的發(fā)生，并促進其進一步發(fā)展。本研究還發(fā)現玫瑰痤瘡患者血清內毒素、血管活性腸肽水平與腸道菌群中腸球菌、大腸埃希桿菌、糞腸球菌數量均呈正相關，與雙歧桿菌數量均呈負相關，推測血清內毒素、血管活性腸肽升高與腸道菌群失調密切相關，二者水平升高又可引發(fā)機體炎癥因子釋放，加重炎癥反應，進一步加重痤瘡程度。

綜上所述，玫瑰痤瘡患者血清內毒素、血管活性腸肽呈高表達，其水平隨疾病嚴重程度的加重逐漸升高，且患者腸道菌群呈失調狀態(tài)，與血清內毒素、血管活性腸肽水平具有一定相關性，可能在玫瑰痤瘡發(fā)生發(fā)展過程中起一定作用。