MMR蛋白表達(dá)與不同子宮內(nèi)膜病變類型的相關(guān)性

劉曉娟 馬 會(huì) 馬麗莎 李 坤

1.河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院(張家口，075000)；2.河北省張家口市傳染病醫(yī)院

子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率僅次于宮頸癌[1]。錯(cuò)配修復(fù)基因(MMR)是一組參與DNA錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)的關(guān)鍵基因[2-3]，其功能喪失(dMMR)可導(dǎo)致基因組微衛(wèi)星不穩(wěn)定(MSI-H)，進(jìn)而導(dǎo)致基因組出現(xiàn)高突變表型[4]，子宮內(nèi)膜癌中dMMR發(fā)生率達(dá)20%～40%[5]。臨床子宮內(nèi)膜病變常見類型包括子宮內(nèi)膜息肉、子宮內(nèi)膜不典型增生、子宮內(nèi)膜癌。子宮內(nèi)膜息肉是常見的婦科良性疾病之一，由子宮內(nèi)膜局部過度增生導(dǎo)致[6]。子宮內(nèi)膜不典型增生即腺體存在細(xì)胞異型性，但未發(fā)展至浸潤(rùn)[7]。近年來子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)且趨于年輕化，美國(guó)癌癥協(xié)會(huì)已將與非息肉性遺傳性結(jié)直腸癌相關(guān)的基因突變者及可疑攜帶者列為罹患子宮內(nèi)膜癌的高危人群，建議對(duì)子宮內(nèi)膜癌高危人群應(yīng)自35歲開始每年進(jìn)行一次子宮內(nèi)膜癌篩查。本研究通過檢測(cè)不同子宮內(nèi)膜病變類型的病理組織標(biāo)本中MMR蛋白，探究MMR蛋白在不同病變組織表達(dá)差異，及其與子宮內(nèi)膜癌臨床指標(biāo)相關(guān)性，為臨床預(yù)防、治療子宮內(nèi)膜病變疾病提供參考。

1 材料與方法

1.1 受試者資料來源

回顧性收集2017年1月—2019年12月于本院治療的子宮內(nèi)膜病變患者，包括子宮內(nèi)膜息肉、子宮內(nèi)膜不典型增生、子宮內(nèi)膜癌，收集患者年齡、體質(zhì)指數(shù)(BMI)、產(chǎn)次、宮內(nèi)節(jié)育器史等相關(guān)資料，對(duì)子宮內(nèi)膜癌者收集臨床病理指標(biāo)等。納入標(biāo)準(zhǔn)：診斷為子宮內(nèi)膜不典型增生[8]，非典型性質(zhì)的單純性增生或復(fù)雜擁擠的伴有非典型細(xì)胞的腺體增生，子宮內(nèi)膜息肉病理確診符合婦產(chǎn)科診斷病理學(xué)(第2版)診斷標(biāo)準(zhǔn)，子宮內(nèi)膜癌病理診斷符合診治規(guī)范[9]；年齡18～75歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他子宮、宮頸惡性病變或其他惡性腫瘤。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)審批，患者均簽署知情同意書。

1.2 免疫組化分析

采用免疫組化SP法檢測(cè)病理組織中MMR蛋白表達(dá)情況，使用來自北京中山杉金橋生物技術(shù)公司的單克隆抗體[MLH1(1：80)、MSH2(1：100)、MSH6(1：200)、PMS2(1：40)]。由兩位病理醫(yī)師進(jìn)行盲法判定，計(jì)數(shù)5個(gè)視野或500個(gè)細(xì)胞，腺上皮細(xì)胞核內(nèi)染色為棕黃色顆粒評(píng)估為陽(yáng)性細(xì)胞，周圍正常細(xì)胞如間質(zhì)細(xì)胞、淋巴細(xì)胞作為對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定

按美國(guó)病理學(xué)家協(xié)會(huì)CAP標(biāo)準(zhǔn)判定，即存在任何確定的病變組織細(xì)胞核染色為陽(yáng)性判定為陽(yáng)性，完全不表達(dá)判定為陰性，任一MMR蛋白(MLH1、MSH2、MSH6、PMS2)陰性即為dMMR，所有蛋白陽(yáng)性判定為pMMR(MMR-proficient)[10]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 基本情況

子宮內(nèi)膜息肉、子宮內(nèi)膜非典型增生、子宮內(nèi)膜癌各60例，3組患者BMI、產(chǎn)次、宮內(nèi)節(jié)育器史無差異(P>0.05)，年齡子宮內(nèi)膜癌組大于子宮內(nèi)膜息肉組和子宮內(nèi)膜非典型增生組(P<0.05)。見表1。

表1 各組一般資料比較

2.2 MMR蛋白表達(dá)情況

子宮內(nèi)膜癌、子宮內(nèi)膜非典型增生、子宮內(nèi)膜息肉各組患者dMMR發(fā)生率分別為33.3%(20/60)、15%(9/60)、6.7%(4/60)(P<0.001)。MLH1、PMS2表達(dá)缺失發(fā)生比例，子宮內(nèi)膜癌組與子宮內(nèi)膜非典型增生組無差異(P=0.092)但均高于子宮內(nèi)膜息肉組(P<0.05)；PMS2表達(dá)缺失比例子宮內(nèi)膜癌組與子宮內(nèi)膜非典型增生組無差異(P>0.05)但均高于子宮內(nèi)膜息肉組(P<0.05)。MSH2、MSH6表達(dá)缺失比例3組無差異(P>0.05)(表2)。

表2 不同子宮內(nèi)膜病變組MMR蛋白缺失表達(dá)比較[例(%)]

2.3 子宮內(nèi)膜癌MMR蛋白表達(dá)與臨床病理指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)患者年齡、腫瘤分期、肌層浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小與子宮內(nèi)膜癌dMMR發(fā)生相關(guān)性發(fā)現(xiàn)，肌層浸潤(rùn)≥1/2時(shí)dMMR發(fā)生率(58.9%)高于肌層浸潤(rùn)<1/2(23.3%)，而在年齡、腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小之間均未發(fā)現(xiàn)dMMR發(fā)生率有差異(P>0.05)。見表3。

表3 子宮內(nèi)膜癌不同MMR蛋白表達(dá)與臨床病理指標(biāo)比較[例(%)]

3 討論

子宮內(nèi)膜息肉是一種突出于子宮內(nèi)膜表面的腺體和間質(zhì)的局部性、無序增生。有研究認(rèn)為他莫西芬通過誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜細(xì)胞KRAS突變(45%)進(jìn)而引起子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞單克隆過度生長(zhǎng)以及二次誘導(dǎo)引起的多克隆良性腺體增生導(dǎo)致子宮內(nèi)膜息肉腫瘤的發(fā)生，子宮內(nèi)膜息肉與基因表達(dá)、突變和免疫系統(tǒng)有相關(guān)性[11]。子宮內(nèi)膜非典型增生是一種發(fā)生在子宮內(nèi)膜的癌前病變，由異常細(xì)胞的過度生長(zhǎng)，或是由子宮內(nèi)膜增生引起[12]。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展以及精準(zhǔn)醫(yī)療的進(jìn)步，子宮內(nèi)膜癌分型從雌激素依賴分型、世界衛(wèi)生組織學(xué)分型到發(fā)展到TCGA分子分型。微衛(wèi)星不穩(wěn)定超突變型是一組分子診斷伴有錯(cuò)配修復(fù)蛋白缺失的病理類型，該類型患者具有較高的腫瘤突變負(fù)荷，是PD-1/PD-L1抑制劑的獲益人群。MSI-H/dMMR狀態(tài)的子宮內(nèi)膜癌也在帕博麗珠單抗的臨床試驗(yàn)中取得顯著獲益[13]。

子宮內(nèi)膜增生活躍及子宮內(nèi)膜癌實(shí)體瘤中dMMR發(fā)生率均較高[14]。本研究顯示在不同類型子宮內(nèi)膜病變中，子宮內(nèi)膜癌dMMR發(fā)生率高于不典型增生和息肉，提示dMMR的發(fā)生與腫瘤發(fā)生可能有關(guān)，子宮內(nèi)膜息肉dMMR發(fā)生率較低(6.7%)，提示dMMR不適宜作為子宮內(nèi)膜息肉的常規(guī)分子篩查指標(biāo)。有研究表明多發(fā)性息肉與單純?cè)錾韵⑷鈦喰蚫MMR更常見[15]。作為子宮內(nèi)膜癌的癌前病變，子宮內(nèi)膜不典型增生也有較高的dMMR發(fā)生率，略低于子宮內(nèi)膜癌。MMR蛋白參與全周期的細(xì)胞分裂DNA修復(fù)，MMR蛋白功能丟失增加了癌前病變發(fā)生發(fā)展的可能性。

本研究中子宮內(nèi)膜癌MLH1與PMS2缺失率較高。MMR蛋白中，MLH1缺失率較高，而PMS2與MLH1形成異二聚體起協(xié)同作用，若MLH1表達(dá)缺失，則存在雙蛋白缺失情況[16]。為進(jìn)一步分析子宮內(nèi)膜癌MMR蛋白表達(dá)與臨床病理指標(biāo)的相關(guān)性，本研究發(fā)現(xiàn)dMMR發(fā)生與肌層浸潤(rùn)有關(guān)，與年齡、腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移未見差異，與既往報(bào)道一致[17]。

綜上所述，MMR蛋白參與了子宮內(nèi)膜病變的發(fā)生發(fā)展。dMMR在不同類型子宮內(nèi)膜病變均存在，提示了篩查的意義；dMMR在子宮內(nèi)膜癌中發(fā)生率最高且與肌層浸潤(rùn)有關(guān)，提示MMR蛋白可能參與了子宮內(nèi)膜惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展。