MiR-146a、sLOX-1、HCY診斷妊娠期高血壓疾病合并腎功能損害效果

郭陸晉 李逸群 鄭 暉 張家榮

甘肅省定西市人民醫(yī)院(743000)

據(jù)調查[1]我國妊娠婦女發(fā)生妊娠期高血壓疾病幾率為9.4%～10.4%，是造成孕產(chǎn)婦和新生兒死亡的重要因素。妊娠期高血壓疾病的發(fā)生發(fā)展，對腎臟、心臟、肝臟及大腦造成嚴重損害[2]。盡早發(fā)現(xiàn)并及時干預對預防妊娠期高血壓疾病早期腎損害有重要意義。有研究[3]指出，同型半胱氨酸(HCY)與高血壓疾病早期腎損傷發(fā)病有一定相關性；miR-146a、可溶性凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體-1(sLOX-1)參與了高血壓腎功能損害的發(fā)生發(fā)展[4-5]。但上述指標在妊娠期高血壓合并腎功能損害中的作用機制研究報道較少，是否能準確反映腎臟功能損害尚不清楚。故本研究選取妊娠期高血壓疾病患者與健康孕婦臨床資料進行回顧性分析，探討miR-146a、sLOX-1和HCY在診斷妊娠期高血壓疾病合并腎功能損害的應用價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

回顧性收集2019年3月—2021年3月本院診治的119例妊娠孕婦臨床資料，分為觀察組(妊娠期高血壓疾病，n=69)與對照組(健康孕婦，n=50)，觀察組根據(jù)病情分為妊娠期高血壓組(n=25)、子癇前期輕度組(n=25)、子癇前期重度組(n=19)；根據(jù)肌酐清除率(Ccr)分為Ccr<80ml/min組(n=35)與Ccr≥80ml/min組(n=34)。納入標準：①符合相關診治及子癇前期輕度與重度標準[6]；②孕周>20周；③單胎妊娠；④無原發(fā)性腎臟疾病。排除標準：①由其他疾病或藥物引起的腎臟損害；②伴有自身免疫系統(tǒng)障礙；③合并嚴重糖尿病。本研究經(jīng)本院倫理委員會審批。

1.2 miR-146a、sLOX-1和HCY檢測

于患者入院3d內采集晨空腹靜脈血。①miR-146a檢測：提取miRNA，標本經(jīng)紫外分光光度計檢測吸光值，即吸光度比值為1.8～2.0，采用miRNA反轉錄試劑盒將miRNA反轉錄為cDNA，選擇SYBR-Green熒光定量PCR檢測試劑盒(美國賽默飛世爾科技有限公司)對血漿miR-146a進行熒光定量PCR檢測；反應條件：預變性溫度95℃ 10min，95℃ 5s，60℃ 60s，共進行40個循環(huán)，根據(jù)2-△△Ct法計算miR-146a相對表達量。引物序列miR-146a上游引物：CACGGACCTGAAGAACACTGG；下游引物：AGAAATGAAATTAGAACACACATCAATTCC。②酶聯(lián)免疫吸附法檢測sLOX-1和HCY，試劑盒由博研生物科技有限公司生產(chǎn)。

1.3 觀察指標

收集119例妊娠孕婦的年齡、孕周、孕次、產(chǎn)次及miR-146a、sLOX-1、HCY資料兩組比較。觀察觀察組不同特征患者miR-146a、sLOX-1、HCY水平，并分析3項指標與病情嚴重程度相關性，以及診斷妊娠期高血壓疾病患者并發(fā)腎功能損害效能。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結果

2.1 一般資料比較

兩組年齡、孕周、孕次、產(chǎn)次等無差異(P>0.05)。見表1。

表1 兩組一般資料比較

2.2 miR-146a、sLOX-1、HCY水平比較

miR-146a、sLOX-1、HCY水平，觀察組均高于對照組，且子癇前期重度組高于妊娠期高血壓組和子癇前期輕度組，Ccr<80ml/min組高于Ccr≥80ml/min組(均P<0.05)。見表2。

表2 各組miR-146a、sLOX-1、HCY比較

2.3 miR-146a、sLOX-1、HCY相關性及與病情程度關系

Spearman相關性分析顯示，miR-146a、sLOX-1與HCY正相關(r=0.803、0.748，均P<0.001)。miR-146a、sLOX-1、HCY與妊娠期高血壓疾病程度正相關(r=0.886、0.474、0.875，均P<0.001)。

2.4 診斷效能分析

ROC曲線分析顯示，miR-146a、sLOX-1、HCY聯(lián)合診斷妊娠期高血壓疾病患者并發(fā)腎功能損害效能最佳。見表3。

表3 miR-146a、sLOX-1、HCY診斷并發(fā)腎功能損害效能

3 討論

早期腎損害為妊娠期高血壓疾病主要并發(fā)癥，可能是因妊娠期高血壓發(fā)生時，全身血管痙攣，不僅會改變機體血流動力學，還會損傷內皮細胞，通過引起腎血管痙攣及降低腎臟血流量和腎小球濾過率，引起血清肌酐升高和損害腎功能[6]。以往臨床針對腎功能損害常采用血清肌酐指標檢測。但有研究表示其濃度會受多種因素的影響，當腎小球損傷不明顯時，血清肌酐仍處于正常范圍?；诖耍瑢ふ颐舾卸雀?、特異度高的指標評估妊娠期高血壓疾病患者腎功能尤為重要。有研究[7]認為高血壓腎損害的發(fā)生與多種基因密切關聯(lián)，即認為微小RNA(miRNA)參與了高血壓腎病的發(fā)生發(fā)展?；蛏飳W[8]證實，miR-146a參與了動脈粥樣硬化和高血壓腎病的病理生理過程?，F(xiàn)有研究[9]表示，miR-146a是急性冠脈綜合征的重要危險因素，既是評估動脈粥樣硬化程度的重要指標，又是反映腎臟功能損害的特異性指標。

miR-146a在正常情況下相對表達量極低，但在高血壓影響下會隨血壓水平升高而上調，可能與高血壓引起血管內皮功能障礙有關。有研究[10]表示，miR-146a是高血壓腎損害的一種保護性miRNA，其表達量增加能通過抑制溶血磷脂酶1升高小動脈中的一氧化氮水平，起到保護血管內皮和調節(jié)血壓作用。但這一說法并未被證實?；谏鲜鲇^點，本研究發(fā)現(xiàn)miR-146a在高血壓腎損害病理進程中同樣具有重要作用，即miR-146a表達量會隨著腎功能損害程度的加重而上升，即A組的miR-146a高于B組。sLOX-1是一種Ⅱ型跨膜糖蛋白，主要分布于血管豐富部位[11-12]。正常情況下含量較低，但當受到炎性細胞因子、蛋白激酶C、血管緊張素Ⅱ及氧化應激等誘導時表達量上升。本研究顯示， sLOX-1水平Ccr<80ml/min組高于Ccr≥80ml/min組，子癇前期重度組高于妊娠期高血壓組和子癇前期輕度組，提示sLOX-1可能參與了妊娠期高血壓疾病和腎損害發(fā)生發(fā)展。相關性分析，sLOX-1與娠期高血壓疾病的進展呈正相關，說明sLOX-1會隨著病情發(fā)展而上調。分析認為：可能與妊娠期高血壓疾病患者存在內皮細胞損傷，導致炎性因子介入，血管內皮源性舒張因子及一氧化氮減少有關，在一定程度上誘導sLOX-1分泌[13-14]。

HCY是一種廣泛分布于機體的氨基酸半胱氨酸異種[15]。有研究[16]指出，其水平上升與腎功能損害有關。正常情況下HCY代謝相關酶主要生存于腎臟，經(jīng)腎臟清除，但當腎功能受損HCY代謝相關酶也會隨之缺乏或活性喪失，通過阻滯代謝通道造成血液HCY蓄積，故本研究觀察組的表達量高于對照組。另外，HCY水平上升也會一定程度誘導動脈平滑肌細胞增生及損傷血管內皮細胞，使其發(fā)生血管痙攣、血氧不足，加重對腎臟的損害[17-18]?；谏鲜?種指標在妊娠期高血壓合并腎功能損害患者中的異常升高，本文對其進行ROC曲線分析顯示，3者均有較高的評估敏感度和特異性，但聯(lián)合檢測預測價值更高。

綜上所述，miR-146a、sLOX-1、HCY水平會隨著妊娠期高血壓疾病的發(fā)展而上升，聯(lián)合檢測有利于提高診斷妊娠期高血壓并發(fā)腎功能損害效能，為臨床治療提供指導。本研究局限在于為單中心回顧研究，入組樣本相對較少且均為本院收治病例，雖體現(xiàn)出miR-146a、sLOX-1、HCY聯(lián)合診斷的優(yōu)勢，但尚缺乏大量研究證實。仍有待行大樣本隨機對照實驗驗證結論。