文│聶后福(湖南省瀏陽(yáng)市淳口鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村辦)
劉增再 楊輝 朱紅剛(湖南省長(zhǎng)沙市動(dòng)植物疫病預(yù)防控制中心)
黃甜(湖南省瀏陽(yáng)市佳和養(yǎng)殖專業(yè)合作社)
近年來(lái),隨著養(yǎng)禽業(yè)工廠化、商品化,湖南省瀏陽(yáng)市引入了湘黃雞、桃源雞、東安雞等外來(lái)地方品種家禽,在利用地方品種獨(dú)特優(yōu)良性狀的基礎(chǔ)上,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的生產(chǎn)實(shí)踐培育出瀏黃雞、香黃雞等優(yōu)良地方品種家禽,對(duì)瀏陽(yáng)市養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展起到了推動(dòng)作用。高致病性禽流感、新城疫、禽白血病和雞白痢是嚴(yán)重危害我國(guó)家禽業(yè)健康發(fā)展的四種主要疫病,在我國(guó)大部分地方家禽中普遍存在,且發(fā)病種類和發(fā)病數(shù)量也長(zhǎng)期居高不下,給家禽養(yǎng)殖場(chǎng)戶造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,嚴(yán)重影響地方家禽品種的健康發(fā)展。為掌握湖南省瀏陽(yáng)市地方品種規(guī)模雞場(chǎng)主要?jiǎng)游镆卟〉牧餍星闆r,2020年7月~2021年6月,筆者對(duì)瀏陽(yáng)市的4個(gè)規(guī)模雞場(chǎng)進(jìn)行禽流感、新城疫、雞白痢和禽白血病4種疫病的監(jiān)測(cè),以期為瀏陽(yáng)市的地方品種雞主要疫病凈化工作提供依據(jù)。
1.試驗(yàn)動(dòng)物。由4個(gè)以地方品種為主的規(guī)模禽場(chǎng)提供,各養(yǎng)殖場(chǎng)布局規(guī)范合理,生物安全條件較好,設(shè)施設(shè)備齊全,管理制度健全,常年存欄商品生態(tài)土雞8萬(wàn)多只,蛋雞5萬(wàn)余羽,年出欄商品家禽30萬(wàn)只左右,其中A場(chǎng)為湘黃雞,B場(chǎng)為桃源雞,C場(chǎng)為雪峰烏骨雞,D場(chǎng)為其他品種混養(yǎng)。
2.樣品采集。由4個(gè)規(guī)模禽場(chǎng)隨機(jī)從翅靜脈采集480份血液樣品,血清自然析出后置于1.5毫升離心管中,可直接進(jìn)行血清學(xué)抗體檢測(cè)。由4個(gè)規(guī)模雞場(chǎng)隨機(jī)采集480份咽-泄殖腔棉拭子樣品,以1.5毫升離心管取1毫升磷酸鹽緩沖液(pH7.2),用棉簽在雞只咽喉、泄殖腔內(nèi)左轉(zhuǎn)3圈,右轉(zhuǎn)3圈,刮取咽喉、泄殖腔內(nèi)側(cè)3~4厘米處黏液,注意不要刮出血。刮取后,將棉簽頭折斷放于離心管中靜置過(guò)夜,浸出液上清可直接進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)。
表1 4個(gè)規(guī)模雞場(chǎng)主要疫病血清學(xué)抗體檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)
3.檢測(cè)試劑。禽流感H5亞型(Re-11)、H5亞型(Re-12)、H7亞型(Re-2)和新城疫抗體檢測(cè)試劑,購(gòu)于哈爾濱國(guó)生生物科技股份有限公司(批號(hào)分別為20191209、20191106、20191206和20191212);禽白血病P27抗原檢測(cè)試劑(批號(hào)為MR358),購(gòu)于IDEXX公司;雞白痢抗體試劑,購(gòu)于北京中海生物科技有限公司(批號(hào)201801);禽流感H5病毒、禽流感H7病毒和新城疫病毒核酸實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑,購(gòu)于中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司(批號(hào)分別為20201007、20201208和20201106)。
4.檢測(cè)方法。血清抗體檢測(cè),參照國(guó)家或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),按照試劑配套說(shuō)明書進(jìn)行操作和結(jié)果判定。病毒核酸提取,取采集的咽-泄殖腔棉拭子浸出上清液200微升,運(yùn)用西安天隆科技有限公司的核酸提取儀以及配套核酸提取試劑盒(磁珠法)提取病毒核酸,按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè),按照相應(yīng)疫病的病毒核酸檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作及結(jié)果判定。
1.血清學(xué)抗體檢測(cè)結(jié)果。對(duì)480份血清學(xué)樣品分別進(jìn)行禽流感H5亞型(Re-11和Re-12)、禽流感H7亞型(Re-2)、新城疫抗體、雞白痢抗體檢測(cè)。從表1可知,禽流感H5亞型(Re-12)、禽流感H7亞型(Re-2)、新城疫抗體合格率均為100%;禽流感H5亞型(Re-11)抗體合格率C場(chǎng)為95%(114/120),其他三個(gè)場(chǎng)均為100%(120/120)。雞白痢抗體陽(yáng)性率分別為:8.33%(10/120)、4.17%(5/120)、12.5%(15/120)和10.83%(13/120)。
2.病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果。對(duì)480份咽-泄殖腔棉拭子樣品分別進(jìn)行禽流感H5亞型病毒核酸、禽流感H7亞型病毒核酸、新城疫病毒核酸、禽白血病病毒P27抗原檢測(cè)。從表2可知,禽流感H5亞型、H7亞型和新城疫病毒核酸檢測(cè)全部為陰性;禽白血病病毒P27抗原陽(yáng)性率分別為11.67%(14/120)、5.83%(7/120)、24.17%(29/120)和17.5%(21/120)。
對(duì)4個(gè)地方品種規(guī)模雞場(chǎng)血清樣品分別檢測(cè)禽流感H5亞型(Re-11和Re-12)、禽流感H7亞型(Re-2)和新城疫抗體,檢測(cè)結(jié)果見表1。4個(gè)規(guī)模雞場(chǎng)的禽流感H5亞型、H7亞型和新城疫免疫抗體合格率較高,均超過(guò)95%,遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的不低于70%的標(biāo)準(zhǔn)。咽-泄殖腔棉拭子均未檢測(cè)出禽流感H5亞型、H7亞型和新城疫病毒核酸,雞群未感染相應(yīng)病毒。說(shuō)明該4個(gè)規(guī)模雞場(chǎng)高致病性禽流感和新城疫免疫程序合理,疫苗免疫效果良好,為雞群提供了較好的保護(hù)力。
從雞白痢抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果看,4個(gè)規(guī)模雞場(chǎng)均存在不同程度的感染,B場(chǎng)檢出率最低(4.17%),C場(chǎng)檢出率最高(12.5%),陽(yáng)性感染率相差不大。目前雞白痢并沒(méi)有疫苗,主要以凈化為主要的綜合防控措施。
從禽白血病病毒P27抗原監(jiān)測(cè)結(jié)果看,4個(gè)規(guī)模雞場(chǎng)均檢出了陽(yáng)性,陽(yáng)性率在5.83%~24.17%之間,說(shuō)明4個(gè)規(guī)模雞場(chǎng)在一定范圍內(nèi)存在禽白血病隱性感染情況,但由于未進(jìn)行禽白血病A/B和J亞群病毒的抗體檢測(cè),雞群禽白血病真實(shí)感染率還需作進(jìn)一步檢測(cè)來(lái)確定,而且不同類型雞泄殖腔棉拭子禽白血病毒P27抗原檢測(cè)法存在較高的假陽(yáng)性率和漏檢率。禽白血病尚無(wú)疫苗和特效藥,有效的防控方法是以“檢測(cè)-淘汰陽(yáng)性雞”為主的凈化措施。
從監(jiān)測(cè)結(jié)果來(lái)看,4個(gè)規(guī)模雞場(chǎng)禽流感和新城疫的防控效果較為理想,基礎(chǔ)免疫效果良好,未檢出相應(yīng)的病原。禽白血病和沙門氏菌病存在一定程度的感染,且禽白血病感染較為嚴(yán)重,主要是因?yàn)楣芾硭絽⒉畈积R,技術(shù)操作不規(guī)范,清欄、消毒等措施落實(shí)不徹底。因此,要加強(qiáng)日常管理,提高生物安全意識(shí),嚴(yán)格落實(shí)各項(xiàng)消毒制度,從而降低禽白血病和雞白痢的發(fā)生及危害。
通過(guò)對(duì)湖南省瀏陽(yáng)市4個(gè)地方品種規(guī)模雞場(chǎng)的960份樣品進(jìn)行的4種主要?jiǎng)游镆卟∶庖呖贵w和病原學(xué)的監(jiān)測(cè),發(fā)現(xiàn)該4個(gè)雞場(chǎng)禽流感、新城疫免疫抗體水平良好,雞群未攜帶相應(yīng)病原,禽白血病和雞白痢存在帶毒情況,且均為混合感染。因此,要重點(diǎn)加強(qiáng)養(yǎng)殖環(huán)節(jié)雞白痢和禽白血病的防控,有條件的規(guī)模雞場(chǎng)可探索開展“兩白”的凈化工作。
表2 4個(gè)規(guī)模雞場(chǎng)主要疫病病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)